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ELISA的基本原理:
①使抗原或抗體結(jié)合固相載體表面,,并保持活性,。
②使抗體或抗原與某種酶連接成酶標抗體或抗原。
③在測定時,,把受檢抗體(或抗原)和酶標抗原(或抗體)按不同的步驟與固相載體表面的抗原(或抗體)起反應(yīng),。
④用洗滌的方法去除未結(jié)合的酶標抗原(或抗體),zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例,。
⑤加入酶反應(yīng)的底物后,,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物。
⑥產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),,故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺來定性或定量分析,。
ELISA方法的基本原理是:①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性,。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性,。在測定時,,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質(zhì)分開,,zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),,故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析,。由于酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應(yīng)效果,,從而使測定方法達到很高的敏感度,。因此,ELISA檢測是一項定位,、定性和定量(敏感度可達每毫升ng~pg水平)的綜合技術(shù),。常用的酶是辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(AKP)
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