層析柱裝填方法您知道嗎？

1. 填裝之前,，檢查層析柱各接頭,、部件不能有破損漏氣，并將層析柱清洗干凈,，壁上不要有殘留小顆粒,，會(huì)影響層析效果；

2. 確保填料,、層析柱,、所有的緩沖液以及樣品溫度一致，溫度不一致容易導(dǎo)致產(chǎn)生氣泡,。

3. 所有過柱子的液體（包括水,、平衡緩沖液、洗脫緩沖液,、再生溶液）用0.45um濾膜抽濾,，并進(jìn)行超聲脫氣，注意填料不可超聲脫氣,；

4. 將填料用純水清洗幾遍,，洗掉保存液，并將上層的細(xì)小顆粒棄去,；

5. 關(guān)閉層析柱出水口,，玻璃棒引流往層析柱內(nèi)倒入約1/4柱體積的水（或緩沖液），務(wù)必使底端無(wú)氣泡,；

6. 將填料用玻璃棒攪勻成懸漿,，用玻璃棒引流,，均勻的一次性倒入柱子內(nèi)，注意務(wù)必不要產(chǎn)生氣泡,，待柱子內(nèi)填料穩(wěn)定,，打開出液管，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,。

7. 如果是手動(dòng)操作,，將柱子用純水沖幾個(gè)柱體積，使柱床穩(wěn)定,；

如果儀器操作,，用逐漸加大流速的方法，將填料壓實(shí),，注意：既不能過松,，也不能過緊，要注意不能超過填料的最大耐壓,。

8. 上樣前,，樣品要進(jìn)行離心或者用0.45um濾膜過濾；

注意：

1. 始終保持柱內(nèi)液面高于凝膠表面,，否則水分蒸發(fā),，凝膠變干，影響填料的純化效果,，有轉(zhuǎn)換接頭的柱子,，需要保證進(jìn)出液管密封；

2. 防止液體流干,，使柱內(nèi)混入大量氣泡,，影響純化效果,；

3. 切莫超過填料的最大耐壓,，以免對(duì)填料造成不可逆的損壞；

4. 注意不要超過層析柱的最大耐壓,，超過最大耐壓可能會(huì)漏液,，甚至沖掉柱頭；

5. 凝膠一般都比較昂貴,，需小心操作,，實(shí)驗(yàn)后回收，盡量避免污染,、浪費(fèi)和損失,。

層析柱裝填方法您知道嗎？