新品上市：明膠酶譜實(shí)驗(yàn)配套用的配膠試劑盒

很多老師在使用我們的明膠酶譜試劑盒時(shí)候，還需要自己準(zhǔn)備配置大膠小膠用的試劑,，上海信帆特別推出配套用的配膠試劑盒,，一步解決實(shí)驗(yàn)中遇到的各種問(wèn)題,，下面我們一起來(lái)了解一下吧,、

描述：本產(chǎn)品提供了配制SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑，用戶只需自備制膠器具和蒸餾水,，即可配制高質(zhì)量的各種濃度的變性PAGE膠,，方便，快捷,。本試劑盒至少可以配制30塊常規(guī)大小的PAGE膠,，并且其中的分離膠緩沖液和濃縮膠緩沖液中已加入10%SDS，使用時(shí)無(wú)需另外加入,。

組成：

*試劑盒中提供的APS（過(guò)硫酸銨）為固體粉末，使用前加入雙蒸水溶解即配制成10%APS（0.5g APS加入5ml雙蒸水）,，將溶液分裝后置于-20℃保存,，通常半年內(nèi)有效。

操作步驟：根據(jù)目的蛋白分子量大小選擇合適的凝膠濃度,，不同濃度的SDS-PAGE分離膠的最佳分離范圍參考附表1,。

1．灌制分離膠

（1）參照凝膠模具說(shuō)明書(shū),，裝配好凝膠模具。

（2）將不同體積的30%Acr-Bis（29:1）,、分離膠緩沖液和雙蒸水在小燒杯中混合,。

（3）加入10%APS和TEMED，輕輕攪拌混勻,，避免產(chǎn)生氣泡,。

（4）將分離膠溶液灌入凝膠玻璃槽中，然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-3cm的水層,，用于壓平液面,。

（5）靜置30-60min,，至分離膠凝固,。

2．灌制濃縮膠

（1）去除覆蓋在分離膠上的水層，并用濾紙吸干,，水份吸不干,，可能會(huì)導(dǎo)致濃縮膠和分離膠分開(kāi)。

（2）將不同體積的30%Acr-Bis（29:1）,、分離膠緩沖液和雙蒸水在小燒杯中混合,。

（3）加入10%APS和TEMED，輕輕攪拌混勻,，避免產(chǎn)生氣泡,。

（4）將濃縮膠溶液加至分離膠的上面，插入樣品梳,，避免產(chǎn)生氣泡,，靜置20-30min，直至濃縮膠聚合,。

（5）待凝膠聚合后,，小心拔下梳子，以免破壞加樣孔,。

（6）進(jìn)行常規(guī)電泳,。

注意事項(xiàng)：

1.10%APS配置好后，應(yīng)當(dāng)-20℃保存,，并且應(yīng)盡量減少室溫存放時(shí)間,，以防失效。

2.TEMED易揮發(fā),，使用后請(qǐng)擰緊瓶蓋,。

3.凝膠凝聚的速度與溫度等關(guān)系密切，可通過(guò)調(diào)節(jié)APS和TEMED的用量,，控制凝膠的聚合速度,，凝膠聚合過(guò)快不利于操作。

4.丙烯酰胺，TEMED等有毒,，操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴手套,。

5.在凝膠配制過(guò)程中，應(yīng)盡量避免產(chǎn)生氣泡,。

6.在分離膠上層加蒸餾水時(shí)要小心操作,，加水時(shí)速度不宜過(guò)快。

新品上市：明膠酶譜實(shí)驗(yàn)配套用的配膠試劑盒