一,、面粉,、小麥等谷物及其加工制品（稀釋倍數(shù)：10） 1. 取 5.0g 粉碎好的樣品，加入 25mL 去離子水,，混勻,； 2. 充分振蕩 15min 后過濾或 4000rpm 離心 5-10min； 3. 取 500μL 濾液或上清液加 500μL 樣品稀釋液（試劑盒中提供）,，充分混勻后即為待測樣液,； 4. 移取該液 50uL 進行檢測。

二,、麩皮,、豆粕等（稀釋倍數(shù)：10） 1. 取 5.0g 粉碎好的樣品，加入 25mL 去離子水,，混勻,； 2. 充分振蕩 15min 后過濾或 4000rpm 離心 5-10min； 3. 取 500μL 濾液或上清液加 500μL 去離子水,，充分混勻后即為待測樣液,； 4. 移取該液 50uL 進行檢測。

三,、玉米粉,、雞料、鴨料,、豬料等（稀釋倍數(shù)：10） 1. 取 5.0g 粉碎好的樣品,，加入 25mL 去離子水，混勻,； 2. 充分振蕩 15min 后過濾或 4000rpm 離心 5-10min,； 3. 取 500μL 濾液或上清液加 500μL 20%甲醇-水,，充分混勻后即為待測樣液,； 4. 稀釋后的待測樣液需 pH 值約 7.0 左右,，移取該液 50uL 進行檢測,。

注意事項：

1. 試劑及樣本沒有恢復(fù)到室溫（20~25℃）會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn) 的 OD 值偏低。

2. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,，則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn) 曲線不成線性,，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng) 立即進行下一步操作,。

3. 每種試劑使用前均需搖勻,。

4. 反應(yīng)終止液為 2M 硫酸,，避免接觸皮膚。

5. 不要使用過了有效期的試劑盒,；也不要摻雜使用過了有效期的試劑盒,；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

6. 儲存條件：試劑盒保存于 2~8℃,，不能冷凍,，將不用的微孔板重新真空密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的顯色劑對光敏感,，因此要避光保存,。 7. 試劑變質(zhì)的跡象：顯色試劑有任何顏色表明顯色劑變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之,。0 標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450/630nm）值小于 0.5 （A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質(zhì),。

8. 對玻璃器皿和DON溶液消毒好用次氯酸鈉（10%,，v/v）溶液浸泡過夜,。

9. 該試劑盒采用室溫反應(yīng)（20~25℃）,，當(dāng)反應(yīng)溫度高于 25℃或者低于 20℃時,，均需相應(yīng)縮短或延長反應(yīng)時間,，具體可咨詢

【概要】

嘔吐毒素(Vomitoxin),，化學(xué)上稱作脫氧腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),，屬于霉菌的單端孢菌素族，具有很高的細胞毒性及免疫抑制性質(zhì),，是由幾種粉色鐮刀霉真菌屬產(chǎn)生的。玉米中容易產(chǎn)生這種毒素,。嘔吐毒素在小麥,、玉米以及稻米中的含量通常是mg/kg級,。DON屬于劇毒或中等毒物,，人畜攝入了被DON污染的食物／飼料后，會導(dǎo)致厭食,、嘔吐,、腹瀉、發(fā)燒,、站立不穩(wěn),、反應(yīng)遲鈍等急性中毒癥狀,，嚴(yán)重時損害造血系統(tǒng)造成死亡。研究表明,，DON可能對免疫系統(tǒng)有影響,，有明顯胚胎毒性和一定致畸作用，可能有遺傳毒性,，但無致癌,、致突變作用。谷物及飼料中DON的含量有嚴(yán)格的*,。我國谷物中DON 的*為1.0 mg／kg ,。HPLC或GC-MS用作檢測嘔吐毒素的方法，但是其前處理步驟繁瑣,，費用昂貴。酶聯(lián)免疫檢測試劑盒則可經(jīng)濟,、快速地檢測嘔吐毒素,。

【試驗原理】

嘔吐毒素檢測試劑盒又稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇檢測試劑盒，本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,，在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被嘔吐毒素抗原,，樣本中嘔吐毒素和此抗原競爭結(jié)合抗嘔吐毒素抗體（抗試劑），同時抗嘔吐毒素抗體與酶標(biāo)二抗（酶標(biāo)物）相結(jié)合,，經(jīng)TMB底物顯色,，樣本吸光值與其所含嘔吐毒素的含量成負(fù)相關(guān)，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線,，再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù),，即可得出樣品中嘔吐毒素的含量。

脫氧雪腐鐮刀菌烯醇酶免檢測試劑盒真的特別好用

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