上海信帆生物供應(yīng)低密度脂蛋白膽固醇測(cè)試盒,，提供LDL-C實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)

低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)

（直接法）

一,、試劑組成及配制(100 管/96 樣)：

三,、測(cè)定步驟：

1、樣本處理:

①,、血清(漿)：直接測(cè)定,，如超過(guò)線性范圍用生理鹽水稀釋后測(cè)定。

②,、培養(yǎng)液樣本：吸取培養(yǎng)液,，1000 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘,，取上清測(cè)定,。

[注]：一般建議細(xì)胞密度在 100 萬(wàn)個(gè)/ml 以上。

③,、組織樣本：準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g)：體積(ml)=1：9 的比例,，加入 9 倍體積的勻漿介 質(zhì)，冰水浴條件下機(jī)械勻漿,，2500 轉(zhuǎn)/分,，離心 10 分鐘，取上清液待測(cè)。

[注]:1,、如組織樣本為非高脂樣本,，勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進(jìn)行提取。 2,、如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本,，勻漿介質(zhì)可統(tǒng)一用無(wú)水乙醇進(jìn)行提取。

④,、細(xì)胞樣本：

A,、細(xì)胞收集:將制備好的細(xì)胞懸液取出，1000 轉(zhuǎn)/分,，離心 10 分鐘,，棄上清液，留細(xì)胞沉 淀,；用等滲緩沖液（推薦 0.1mol/L ,、pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液）清洗 1～2 次，同樣 1000 轉(zhuǎn)/分,，離心 10 分鐘,，棄上清液，留細(xì)胞沉淀,；

B,、細(xì)胞破碎:加入 0.2～0.3ml 的勻漿介質(zhì)（推薦 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液或生理 鹽水）進(jìn)行勻漿,，冰水浴條件下超聲破碎(功率：300W,3～5 秒/次,，間隔 30 秒，重復(fù) 3～ 5 次)或手動(dòng)勻漿,，制備好的勻漿液不離心待測(cè),。也可采用裂解液裂解(推薦 TritonX-100，

1～2%,，裂解 30～40 分鐘),，裂解好的液體不離心直接測(cè)定

[注]：一般建議細(xì)胞密度在 100 萬(wàn)個(gè)/ml 以上。破碎好的液體可顯微鏡觀察細(xì)胞是否破碎*

1,、試劑空白管吸光度≤0.050（光徑 0.5cm）,。

2、靈敏度：測(cè)試 2.6mmol/L 被測(cè)物時(shí),，吸光度差值△A 為 0.180～0.280

3,、線性范圍：2～12mmol/L，r2＞0.995

4,、精密度：變異系數(shù)≤8%,，批間差：相對(duì)偏差≤10%

5,、穩(wěn)定性：原包裝試劑盒在 2℃～8℃避光保存，有效期為 12 個(gè)月,。開(kāi)啟后 2℃～8℃避光保存,， 可穩(wěn)定一個(gè)月。

四,、注意事項(xiàng):

1,、本產(chǎn)品僅用于科研，不得用于研究診斷,，切勿服用,。

2,、樣品含量如超出檢測(cè)范圍上*,，可用生理鹽水稀釋樣本后進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù),。

3,、試劑防止葡萄糖、膽固醇等試劑的污染,。

4,、試劑與樣本量可按照比色杯體積，按比例增減,。

2,、樣品含量如超出檢測(cè)范圍上*，可用生理鹽水稀釋樣本后進(jìn)行測(cè)定,，測(cè)定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù),。

3、試劑防止葡萄糖,、膽固醇等試劑的污染,。

4、試劑與樣本量可按照比色杯體積,，按比例增減,。

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