植物可溶性糖含量檢測(cè)試劑盒說明書

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可見分光光度法

規(guī)格：50T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容： 試劑一：粉劑×2 瓶,，4℃避光保存,；

試劑二：液體 10mL×1 瓶，4℃保存,；

標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 支,，4℃保存，含 10mg 無水葡萄糖（干燥失重<0.2%）,，

臨用前加入 1mL 蒸餾 水溶解,，配制成 10mg/mL 葡萄糖溶液備用，4℃可保存 1 周,，或者用飽和苯甲酸溶液溶解,，可保存 更長時(shí)間。

標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋至 0.3,、0.2,、0.1、0.05,、0.025,、0.0125mg/mL。

產(chǎn)品說明： 糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一,，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì),?？偺鞘侵?樣品中的還原單糖及在本法測(cè)定條件下能水解成還原單糖的蔗糖,、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的 淀粉。

檢測(cè)原理為蒽酮比色法,?？捎糜诳扇苄詥翁恰⒐烟呛投嗵堑暮繙y(cè)定,，具有靈敏度高﹑簡(jiǎn)便快 捷﹑適用于微量樣品的測(cè)定等優(yōu)點(diǎn),。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑： 可見分光光度計(jì)、水浴鍋,、可調(diào)式移液器,、1mL 玻璃比色皿、濃硫酸,、研缽和蒸餾水,。

操作步驟： 一、樣品中可溶性糖的提?。?稱取約 0.1～0.2g 樣本,，加入 1mL 蒸餾水研磨成勻漿，倒入有蓋離心管中,，沸水浴 10 min（蓋 緊,，以防止水分散失）,，冷卻后，8000g,，常溫離心 10min,，取上清液于 10mL 試管中，用蒸餾水定 容至 10mL,，搖勻備用,。

二、測(cè)定操作表：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,，調(diào)節(jié)波長至 620nm,，蒸餾水調(diào)零。

2. 調(diào)節(jié)水浴鍋至 95℃,。

3. 工作液的配制：在試劑一中加入 5 mL 試劑二,，充分溶解后使用，如較難溶解,，可加熱攪拌,。

4. 加樣表（在 EP 管中反應(yīng))： 試劑（µL） 空白管 測(cè)定管 標(biāo)準(zhǔn)管 樣本 200 標(biāo)準(zhǔn)液 200 蒸餾水 

混勻，置 95℃水浴中 10min（蓋緊,，以防止水分散失）,，冷卻至室溫后，于 620nm 處,，分別讀 取空白管和測(cè)定管吸光值,，?A=A 測(cè)定管-A 空白管。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：620nm 處蒸餾水調(diào)零,，讀標(biāo)準(zhǔn)管吸光值,，A=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管。以濃度（y）為 縱坐標(biāo),，吸光度 A（x）為橫坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,。

注意： 1. 空白管只要做一管。 2. 如果?A 大于 1,，需要將樣本用蒸餾水稀釋,，計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。 3. 由于濃硫酸具有強(qiáng)腐蝕性,，請(qǐng)謹(jǐn)慎操作,。

三、可溶性糖含量計(jì)算： 1,、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,，將?A 帶入公式中（x）計(jì)算樣品濃度 y（mg/mL）。 2,、按樣本鮮重計(jì)算： 可溶性糖（mg /g 鮮重）＝ (y×V1)÷（W×V1÷V2）＝10×y÷W 3,、按樣本蛋白濃度計(jì)算： 可溶性糖（mg / mg prot）= (y×V1)÷（V1×Cpr）＝y(tǒng)÷Cpr V1：加入樣本體積,，0.2mL；V2：提取液體積,，10mL,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL,；W： 樣本鮮重,，g。

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