精華篇:明膠酶譜分析試劑盒跑電泳的時候有什么注意事項
很多老師在使用明膠酶譜試劑盒的時候電泳總是跑不好,要么是時間很短,要么是跑不開等,,今天我們把跑電泳的幾個注意事項分享給大家。
1,、跑電泳的時候,,每一塊小膠電流為20 mA/gel,如果您跑2塊,,增加到30mA左右,,膠的數(shù)量增加,電流也需要增加,,一般需要跑3-6小時,,慢慢壓。
2,、恒流了 電壓就是自動的了
3,、明膠跑的蛋白是非變性的
4、配的下層膠孔徑稍大
5,、跑的時候多跑會兒,,條帶之間拉得開些,為作圖時給各條帶添加文字留出足夠的空間,。
做明膠酶譜法實驗的其他注意事項:
1.制備聚丙烯酰胺時應注意排除氣泡,。
2.明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,,和PH值等因素的影響,,因此緩沖液配制應嚴格準確,盡量用超純水,,孵育溫度也掌握好,。
3.用大梳子
4.孵育液的PH在7.5-7.6,復性的TRITON時間長了會有絮狀物,,所以實驗時盡量使用新鮮配置的,。
5.孵育的37度不要在CO2培養(yǎng)箱中,因為會改變孵育液的PH值,,在普通孵箱即可,。
精華篇:明膠酶譜分析試劑盒跑電泳的時候有什么注意事項
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