提供ACTH放免試劑盒,,ACTH放免實驗檢測
ACTH是由垂體前葉細胞分泌的39個氨基酸組成的直鏈多肽,分子量4500,,在循環(huán)中的半衰期僅為10~25min,。ACTH的生理作用為促進腎上腺皮質增生、合成和分泌皮質類固醇,,同時也促時腎上腺素,、生長激素合成。ACTH的合成和分泌受下丘腦促腎上腺皮質激素釋放激素(CRH),、腎上腺皮質激素以及加壓素的調節(jié),。我們利用ACTH的18~39片段的特異抗體,建立了特異,、靈敏的測定血漿,、體液中ACTH18-39片段的放射免疫分析方法。該抗體也能同組織,、細胞切片中特異的ACTH和體外純化的ACTH特異結合,,用于研究組織化學診斷ACTH水平變化。因此該方法適用于腎上腺皮質功能亢進,、異位ACTH綜合征,、腎上腺腺瘤上腺皮質功能減退等諸多研究疾病時血漿ACTH水平的監(jiān)測。
標準ACTH 溶液:使用前用緩沖液1ml溶解,,混勻,。2~8℃避光保存,,在標識的有效期內穩(wěn)定,濃度分別為0,、5,、15、45,、135,、405pg/ml。
125I- ACTH溶液:使用前用緩沖液(100管10.5ml溶解,,50管5.5ml
溶解),,混勻。如一次加樣超過100管,,兩瓶混合后使用,;2~8℃避光保存標識的有效期內穩(wěn)定。
兔抗-ACTH 抗血清:使用前用緩沖液(100管10.5ml溶解,,50管5.5ml
溶解),,混勻。如一次加樣超過100管,,兩瓶混合后使用,;2~8℃避光保存標識的有效期內穩(wěn)定。
驢抗兔免疫分離試劑:1瓶,,液體,,2~8℃保存,在標識的有效期內穩(wěn)定,。加樣前必須搖勻,!
取靜脈血2ml,注入含10%EDTA二鈉30ul的試管中,,混勻4℃,3000rpm離心10 min,分離血漿,,待測;如不立即測量,,可將樣本密封后,,置于2~8℃或-20℃儲存?zhèn)錅y,2~8℃保存不應超過48小時,,-20℃保存不超過2個月,。冰凍樣品測定前,
2.手工作圖或計算器處理:
1).百分結合率計算:設S0管計數為B0,,各標準管或樣品管計數為B,,非特異管計數為NSB,則百分結合率計算公式如下:B/ B0=(B-NSB)/( B0-NSB)×100%
2).logit計算:各標準點或樣品管的logit值計算公式如下:
logit=ln(B/ B0)/(1-B/ B0)
3)手工作圖:以標準濃度取log值為橫坐標,對應的logit值為縱坐標在普通坐標紙上或以標準濃度為橫坐標,,對應的B/B0為縱坐標在logit-log坐標紙上畫出標準曲線(理想化時是一條直線),。根據待測樣品的B/B0可以從坐標紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標紙,,查出的數值應取反對數才是后的濃度值。
4).計算器處理,;使用有線性擬合功能的計算器,,可以比較方便地計算出樣品濃度值,具體操作方法請查閱計算器的使用說明書,。
本測定盒主要技術指標
1.標準范圍:5—405pg/ml
2.靈敏度:<5pg/ml
3.批內變異系數(CV):<10%;
批間變異系數(CV):<15%
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