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發(fā)福利了,!信帆生物為您提供:實(shí)驗(yàn)室常用的染色液的配方集錦

時(shí)間:2018/8/31閱讀:2745
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發(fā)福利了,!信帆生物為您提供:實(shí)驗(yàn)室常用的染色液的配方集錦

染色液是實(shí)驗(yàn)室中常用的試劑之一,,分為天然染液和人工染料,也分堿性染料和酸性染料,,以下來詳細(xì)介紹一下實(shí)驗(yàn)室常見染色液的配制,。


⒈ 碘-碘化鉀(I2-KI)溶液 能將淀粉染成藍(lán)紫色,蛋白質(zhì)染成黃色,,也是植物組織化學(xué)測(cè)定的重要試劑,。 
配方:碘化鉀2g ;蒸餾水300ml ,; 碘1g 
先將碘化鉀溶于少量蒸餾水中,,待全溶解后再加碘,,振蕩溶解后稀釋至300mL,,保存在棕色玻璃瓶?jī)?nèi)。用時(shí)可將其稀釋2-10倍,,這樣染色不致過深,,效果更佳。 


⒉ 蘇丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化,、角質(zhì)化的細(xì)胞壁及脂肪,、揮發(fā)油,、樹脂等染成紅色或淡紅色,是的脂肪染色液,。 
配方:(1)蘇丹III或蘇丹Ⅳ干粉 ,; 95%酒精10ml ; 過濾后再加入10ml甘油 
(2)先將蘇丹III或IV溶解在50ml丙酮中,,再加入70%酒精50ml,。 
(3)蘇丹III 70%乙醇的飽和溶液。 


⒊ 1%醋酸洋紅(aceto carmine) 酸性染料,,適用于壓碎涂抹制片,,能使染色體染成深紅色,細(xì)胞質(zhì)成淺紅色,。 
配方:洋紅1g ,; 45%醋酸100ml 
煮沸2h左右,并隨時(shí)注意補(bǔ)充加入蒸餾水到原含量,,然后冷卻過濾,,加入4%鐵明礬溶液1~2滴(不能多加,否則會(huì)發(fā)生沉淀),,放入棕色瓶中備用,。 


⒋ 改良苯芬品紅染色液(Carbol fuchsine) 核染色劑。 
配制步驟: 先配成三種原液,,再配成染色液,。 
原液A:3g堿性品紅溶于100ml 70%酒精中。 
原液B:取原液A10ml加入到90ml 5%石炭酸水溶液中,。 
原液C:取原液B 55ml,,加入6ml冰醋酸和6ml福爾馬林(38%的甲醛)。 
(原液A和原液C可長期保存,,原液B限兩周內(nèi)使用) 
染色液:取C液10~20ml,,加45%冰醋酸80~90ml,再加山梨醇1~,,配成10%~20%濃度的石炭酸品紅液,,放置兩周后使用,*(若立即用,,則著色能力差),。 
適用范圍:適用于植物組織壓片法和涂片法,染色體著色深,,保存性好,,使用2~3年不變質(zhì)。山梨醇為助滲劑,,兼有穩(wěn)定染色液的作用,,假如沒有山梨醇也能染色,,但效果較差。 


⒌ 中性紅(neutral red)溶液 用于染細(xì)胞中的液泡,,可鑒定細(xì)胞死活,。 
配方:中性紅 ;蒸餾水100ml 
使用時(shí)再稀釋10倍左右,。 


⒍ 曙紅Y(伊紅,,eosin Y)酒精溶液 常與蘇木精對(duì)染,能使細(xì)胞質(zhì)染成淺紅色,,起襯染作用,。 
配方:曙紅 ; 95%酒清100ml 
也常用于95%酒精脫水時(shí),,加入少量曙紅溶液,,其目的是在包埋、切片,、展片,、鏡檢時(shí)便于識(shí)別材料。 


⒎ 釕紅(ruthenium red)染液 釕紅是細(xì)胞胞間層專性染料,,其配后不易保存,,應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。 
配方:釕紅5~10mg ,; 蒸餾水25-50ml 


⒏ 龍膽紫(gentian violet) 為酸性染料,,適用于細(xì)菌涂抹制片。 
配方:龍膽紫0.2~1 g ,;蒸餾水100ml 


⒐ 苯胺蘭(aniline blue)溶液 為酸性染料,,對(duì)纖維素細(xì)胞壁、非染色質(zhì)的結(jié)構(gòu),、鞭毛等,,尤其是染絲狀藻類效果好。還多用于與真曙紅作雙重染色,,對(duì)于高等植物多用于與番紅作雙重染色,。 
配方:苯胺蘭1 g ; 35%或95%酒精100ml 


⒑ 間本三分(phloroglucin)溶液用于測(cè)定木質(zhì)素,。 
配方:間本三分5g ,; 95%酒精100ml 
注:此溶液呈黃褐色即失效。 


⒒ 橘紅G(orange G)酒精溶液 為酸性染料,,染細(xì)胞質(zhì),,常作二重或三重染色用,。 
配方:橘紅G 1g ,; 95%酒精100ml 
⒓ 番紅(safranin O)為堿性染料,,適用于染木化、角化,、栓化的細(xì)胞壁,,對(duì)細(xì)胞核中染色質(zhì)、染色體和花粉外壁等都可染成鮮艷的紅色,。并能與固綠,、苯胺蘭等作雙重染色,與橘紅G,、結(jié)晶紫作三重染色,。

 
配方:(1)番紅水溶液番紅0.1或1 g ;蒸餾水100ml 
(2)番紅酒精溶液番紅0.5或1 g ,;50%(或95%)酒精100ml 
(3)苯胺番紅酒精染色液 
甲液 番紅5 g +95%酒精50ml 
乙液 苯胺油20ml +蒸餾水450ml 
將甲,、乙二溶液混合后充分搖均勻,過濾后使用,。 


⒔ 固綠(fast green)又稱快綠溶液,。為酸性染料,能將細(xì)胞質(zhì),,纖維素細(xì)胞壁染成鮮艷綠色,,著色很快,故要很好的掌握著色時(shí)間,。 
配方:(1)固綠酒精液固綠0.1 g ,; 95%酒精100ml 
(2)苯胺固綠酒精液固綠 1 g ;* 100ml ,;苯胺油 4ml 
配后充分搖勻,,過濾后使用。現(xiàn)配現(xiàn)用效果好,。 


⒕ 蘇木精(hematoxylin)染液蘇木精是植物組織制片中應(yīng)用廣的染料,,是蘇木科植物蘇木的心材提取出來的。它是很強(qiáng)的細(xì)胞核染料,,而且可以分化出不同顏色,。配方很多,現(xiàn)舉海登漢氏(Heidenhain's)蘇木精染色液,,又稱鐵礬蘇木精染色液,。 
配方:甲液(媒染劑): 硫酸鐵銨(鐵明礬)2-4g ;蒸餾水100ml 
(必須保持新鮮,,臨用之前配制) 
乙液(染色劑):蘇木精 0.5-1g ,;95%酒精 10ml;蒸餾水 90ml 
配制步驟:(1)將蘇木精溶于酒精中,瓶口用雙層紗布包扎,,使其充分氧化(通常在室內(nèi)放置兩個(gè)月后方可使用),。(2)加入蒸餾水,塞緊瓶口,,置冰箱中可長期保存,。 
切片需先經(jīng)甲液媒染,并充分水洗后才能以乙液染色,,染色后經(jīng)水稍洗再用另一瓶甲液分色至適度,。 
鐵礬蘇木精染液為細(xì)胞學(xué)上染細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的染色劑,但要注意甲液與乙液在任何情況下決不能混合,。 


⒖亞甲基藍(lán)染液 常用于細(xì)菌,、活體細(xì)胞等的染色。 
取亞甲基藍(lán),,溶于100ml蒸餾水中即成,。 


⒗詹納斯綠B(Janus green B)染色液 
將 綠溶于100ml蒸餾水,配成飽和水溶液,。用時(shí)需稀釋,。稀釋的倍數(shù)應(yīng)視材料不同而異。 


⒘硫堇染色液 
取克硫堇(也稱勞氏青蓮或勞氏紫)粉末,,溶于100ml蒸餾水中,,即可使用。使用此液時(shí),,需要用微堿性自來水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,,能成多色反應(yīng)。 


18.黑色素液 
水溶性黑素10g,,蒸餾水100mL,,甲醛(福爾馬林)??捎米髑v膜的背景染色,。 


19.墨汁染色液 國產(chǎn)繪圖墨汁40mL,甘油2mL,,液體石炭酸2mL,。先將墨汁用多層紗布過濾,加甘油混勻后,,水浴加熱,,再加石炭酸攪勻,冷卻后備用,。用作莢膜的背景染色,。 


20.呂氏(Loeffier)美藍(lán)染色液 
A液:美藍(lán)(methylene blue,又名甲烯藍(lán)),95%乙醇30mL; 
B液:。 
混合A液和B液即成,,用于細(xì)菌單染色,,可長期保存。根據(jù)需要可配制成稀釋美藍(lán)液,,按1∶10或1∶100稀釋均可,。

 
21.革蘭氏染色液 
(1)結(jié)晶紫(cristal violet)液:結(jié)晶紫乙醇飽和液(結(jié)晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,,1%草酸銨水溶液80mL,。將兩液混勻置24h后過濾即成。此液不易保存,,如有沉淀出現(xiàn),,需重新配制。 
(2)蘆戈(Lugol)氏碘液:碘1g,,KI 2g,,蒸餾水300mL。先將KI溶于少量蒸餾水中,,然后加入碘使之*溶解,,再加蒸餾水至300mL,即成,。配成后貯于棕色瓶?jī)?nèi)備用,,如變?yōu)闇\黃色能使用。 
(3)95%乙醇:用于脫色,,脫色后可選用以下(4)或(5)的其中一項(xiàng)復(fù)染即可,。 
(4)稀釋石炭酸復(fù)紅溶液:堿性復(fù)紅乙醇飽液(堿性復(fù)紅1g,95%乙醇10mL,,5%石炭酸90mL)10mL,,加蒸餾水90mL。 
(5)番紅溶液:番紅O(safranine O,,又稱沙黃O),,95%乙醇100mL,溶解后可貯存于密閉的棕色瓶中,,用時(shí)取20mL與80mL蒸餾水混勻即可,。 
以上染色液配合使用,可區(qū)分出革蘭氏染色陽性(G+ )或陰性(G- )細(xì)菌,,前者藍(lán)紫色,,后者淡紅色。 


22.齊氏(Ziehl)石炭酸復(fù)紅液:堿性復(fù)紅溶于95%乙醇10mL中為A液,;溶液100mL為B液,。混合A、B液即成,。 


23.姬姆薩(Giemsa)染色液 
(1)貯存液:稱取姬姆薩粉,,甘油33mL,甲醇33mL,。先將姬姆薩粉研細(xì),,再逐滴加入甘油,繼續(xù)研磨,,后加入甲醇,,在56℃放置1-24h后即可使用。 
(2)應(yīng)用液(臨用時(shí)配制):取1mL貯存液加19mLpH7.4磷酸緩沖液即成,。也可以貯存液∶甲醇=1∶4的比例配制成染色液,。 


24. 1%瑞氏(Wright's)染色液 
稱取瑞氏染色粉6g,放研缽內(nèi)磨細(xì),,不斷滴加甲醇(共600mL)并繼續(xù)研磨使溶解,。經(jīng)過濾后染液須貯存一年以上才可使用,保存時(shí)間愈久,,則染色澤愈佳,。 
以上就是一些目前實(shí)驗(yàn)室中常用染色液的配置方法。

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