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細(xì)胞樣本在做實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的時(shí)候需要多少數(shù)量的細(xì)胞呢
做實(shí)時(shí)熒光定量PCR細(xì)胞樣本寄送量:
細(xì)胞樣本:細(xì)胞數(shù)107個(gè)以上
上海信帆生物提供實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)服務(wù),,服務(wù)內(nèi)容包括:
RNA提取,逆轉(zhuǎn)錄,,引物設(shè)計(jì),、合成及調(diào)試,,相對(duì)定量PCR分析
RNA質(zhì)量檢測(cè)
a)測(cè)定樣品在260nm和280nm的吸收值確定RNA的質(zhì)量(儀器ND5000超微量紫外可見(jiàn)分光光度儀),不同樣品OD值測(cè)定,。
b)進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,,確定抽提RNA的完整性和DNA的污染情況,不同樣品RNA電泳圖譜,。
細(xì)胞樣本在做實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的時(shí)候需要多少數(shù)量的細(xì)胞呢
關(guān)于實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果分析的幾個(gè)問(wèn)題:
麻煩問(wèn)一下大家,,如何分析real time PCR的結(jié)果,用的是SYBR Green的方法,,做相對(duì)表達(dá)量的分析,。結(jié)果怎么作圖怎么描述?升高或者降低的倍數(shù)達(dá)到多少才有意義呢,?
簡(jiǎn)單說(shuō)就就是運(yùn)用2-deltadeltaCT運(yùn)算后的結(jié)果和作圖,。不在于升高或降低多少倍數(shù)才有意義,而是統(tǒng)計(jì)是不是有意義,。
為什么合成的引物做不加摸板的對(duì)照也能擴(kuò)增出目的條帶,,而內(nèi)參用同樣體系就沒(méi)有呢?
引物被污染。
3實(shí)時(shí)定量PCR,,熒光定量PCR,,實(shí)時(shí)熒光定量PCR,,real-time PCR,,這些是不是同一個(gè)概念
是一個(gè)概念。
細(xì)胞樣本在做實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的時(shí)候需要多少數(shù)量的細(xì)胞呢
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