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小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)elisa試劑盒年底大促

時(shí)間:2018/1/8閱讀:1524
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小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)elisa試劑盒年底大促

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(英文:vascularendothelialgrowthfactor,簡(jiǎn)稱:VEGF),,早期亦稱作血管通透因子(英文:vascularpermeabilityfactor,簡(jiǎn)稱:VPF),,是血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性的肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子(heparin-bindinggrowthfactor),,可在體內(nèi)誘導(dǎo)血管新生(induceangiogenesisinvivo),。

中文名 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

簡(jiǎn) 稱 VEGF

外文名 vascular endothelial growth factor

作 用 在體內(nèi)誘導(dǎo)血管新生

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收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定,。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,請(qǐng)?jiān)炷H〔暮?,將?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,,直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,所以避免反復(fù)凍融,。

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA ,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,加入 10 %( v/v )抗凝劑( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分),。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形 成,應(yīng)再次離心,。

3. 尿液:用無菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照實(shí)行,。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量,。加入一定量的PBS,,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),,其余冷凍備用,。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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