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糞便基因組DNA提取試劑盒*銷售啦,!
規(guī)格:50T/ 100T
保存:室溫(15℃-25℃) 干燥保存,,復(fù)檢期12個月,2℃-8℃保存時(shí)間更長,。
產(chǎn)品簡介:
本試劑盒適合于從各種糞便中提取微生物DNA,。試劑盒中含有對糞便中各種細(xì)菌、真菌有很好裂解效果,zui大限度的保留了微生物DNA的多態(tài)性,。 使用本試劑盒提取的DNA產(chǎn)量大,、完整性好,可直接用于各種常規(guī)操作,,包括酶切,、PCR 、文庫構(gòu)建,、Southern 雜交等實(shí)驗(yàn),。
操作步驟:
使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶體上的標(biāo)簽,。所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心,。
1. 稱取糞便樣本50-200mg,加入400μL-800μL 溶液SA,,冰上放置10min,,12000g 離心1min。
2. 棄上清,,沉淀中加入400μL溶液SB,,20μL 10mg/ml RNA酶 A ,20μL 10mg/ml 蛋白酶k,,渦旋30s,,65℃水浴30-60min,期間顛倒數(shù)次,,12000g 離心2min,。
3. 取上清于1.5ml 離心管中,加入300-600μL 溶液SC,,12000g,,離心1-2min,取上清,。
4. 吸取上清至DNA吸附柱中,,室溫靜置1-2min,12000g 離心 0.5-1min(可重復(fù)一次),。
5. 倒掉收集管中的廢液,,在吸附柱中加入漂洗液500ul,12000 rpm離心1min,。 (重復(fù)一次)
6. 倒掉收集管中的廢液,,將吸附柱放回收集管,12000 rpm離心0.5-1min,。
7. 拿出吸附柱在室溫干燥數(shù)分鐘( 因季節(jié)及氣候等因素不等),。
8. 將吸附柱放入一個新的離心管中,,加入50-100ul 洗脫液(65 ℃預(yù)熱),12000 rpm離心1min,。
9. 將離心管中的液體重新加入到吸附柱中,,12000 rpm離心1min。離心管中即為糞便微生物DNA 溶液,。
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注意事項(xiàng):
1、新鮮的糞便樣本會得到更高的產(chǎn)率,,不同樣本在采樣前應(yīng)先查閱相應(yīng)的*保存條件,。
2、若溶液中出現(xiàn)渾濁可在37℃水浴中溶解片刻至清澈,,不會影響結(jié)果,。
3、在需要吸取上清液的步驟中應(yīng)避免吸到沉淀,,否則會堵塞吸附柱,,并影響產(chǎn)物純度。
4,、洗脫緩沖液的體積不少于50ul,,體積過小會影響回收效率;建議使用試劑盒附帶的洗脫緩沖液,,用水洗脫也會損失部分產(chǎn)物,;DNA應(yīng)保存在-20 ℃避免反復(fù)凍融,以防降解,。
5,、 液體試劑避免接觸皮膚,若意外接觸應(yīng)立即使用大量清水沖洗,。
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