MCP-2/CCL8 ELISA

MCP-2/CCL8 ELISA標(biāo)本必須為液體,，不含沉淀。包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標(biāo)本量收集體積＝100ul×檢測種類。
◇      血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。收集上清。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
◇      血漿：
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
◇      尿液,、胸腹水、腦脊液：
用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
◇      細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。

1.快速提?。?5分鐘快速基因組DNA提取,，無需組織裂解試劑，實(shí)驗(yàn)過程無需調(diào)pH值,、離心；
2.快速分型擴(kuò)增：45分鐘快速高效擴(kuò)增,；
3.擴(kuò)增試劑：分熱啟動型和非熱啟動型兩種,，含有染料，擴(kuò)增后可直接電泳,；
4.減少繁瑣步驟，降低污染風(fēng)險,；
5.高通量操作：可在PCR儀上批量處理樣本；
6.擴(kuò)增產(chǎn)物末端加A,，且可進(jìn)行下游酶切,、測序等,；
7.節(jié)約成本，提取+擴(kuò)增,，合計低于6元。

屬進(jìn)口分裝試劑盒類產(chǎn)品,。公司還有血清、細(xì)胞,、抗體、細(xì)胞因子,、實(shí)驗(yàn)試劑,、移液器,、實(shí)驗(yàn)耗材,、實(shí)驗(yàn)儀器及實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)等等產(chǎn)品，歡迎新老客戶。

小鼠尾靜脈采血,，如何從全血中制備ELISA用血清，有什么原則嗎,？

放4℃過夜,，然后4℃離心，取上清即可用于ELISA,。

細(xì)胞株

　　液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好,？還是冷凍好,？

　　要冷藏??！因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時,，其溶液的pH值會發(fā)生改變，溶液往往變堿,，某些成分溶解也會受到影響對細(xì)胞生長不利,。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年,。

　細(xì)胞計數(shù)及存活測試
1、原理：
(1)計算細(xì)胞數(shù)目可用血球計數(shù)盤或是Coultercounter粒子計數(shù)器自動計數(shù)。
(2)血球計數(shù)盤一般有二個chambers,，每個chamber中細(xì)刻9個1mm2大正方形,，其中4個角落之正方形再細(xì)刻16個小格,，深度均為0.1mm,。當(dāng)chamber上方蓋上蓋玻片后,，每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時,，計數(shù)每個大正方形內(nèi)之細(xì)胞數(shù)目，乘以稀釋倍數(shù),，再乘以104,，即為每ml中之細(xì)胞數(shù)目。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion,，利用染料會滲入死細(xì)胞中而呈色，而活細(xì)胞因細(xì)胞膜完整,，染料無法滲入而不會呈色,。一般使用藍(lán)色之trypan blue染料,，如果細(xì)胞不易吸收trypan blue，則用紅色之Erythrosin bluish,。計算細(xì)胞活率：活細(xì)胞數(shù)/(活細(xì)胞數(shù)+死細(xì)胞數(shù))×100%。計數(shù)應(yīng)在臺盼蘭染色后數(shù)分鐘內(nèi)完成,，隨時間延長,，部分活細(xì)胞也開始攝取染料;因?yàn)榕_盼蘭對蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的親和力,，用不含血清的稀釋液,，可以使染色計數(shù)更為準(zhǔn)確。