MAO ELISA
MAO ELISA標本必須為液體,不含沉淀,。包括血清,、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類,。
◇ 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。收集上清,。如有沉淀形成,應再次離心,。
◇ 血漿:
應根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成,應再次離心,。
◇ 尿液,、胸腹水,、腦脊液:
用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。如有沉淀形成,,應再次離心,。
◇ 細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。檢測細胞內的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心,。
1.快速提?。?5分鐘快速基因組DNA提取,無需組織裂解試劑,,實驗過程無需調pH值,、離心,;
2.快速分型擴增:45分鐘快速高效擴增,;
3.擴增試劑:分熱啟動型和非熱啟動型兩種,,含有染料,擴增后可直接電泳,;
4.減少繁瑣步驟,,降低污染風險,;
5.高通量操作:可在PCR儀上批量處理樣本,;
6.擴增產物末端加A,,且可進行下游酶切,、測序等,;
7.節(jié)約成本,提取+擴增,,合計低于6元。
屬進口分裝試劑盒類產品,。公司還有血清,、細胞、抗體,、細胞因子,、實驗試劑、移液器,、實驗耗材,、實驗儀器及實驗技術服務等等產品,歡迎新老客戶,。
水貂的綠膿桿菌外毒素A能用小鼠的ELISA試劑盒檢驗嗎,?
放4℃過夜,然后4℃離心,,取上清即可用于ELISA。
細胞株
液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好,?還是冷凍好,?
要冷藏!,!因為液體培養(yǎng)基經冷凍后再經溶化時,,其溶液的pH值會發(fā)生改變,溶液往往變堿,,某些成分溶解也會受到影響對細胞生長不利,。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年。
細胞計數(shù)及存活測試
1,、原理:
(1)計算細胞數(shù)目可用血球計數(shù)盤或是Coultercounter粒子計數(shù)器自動計數(shù),。
(2)血球計數(shù)盤一般有二個chambers,每個chamber中細刻9個1mm2大正方形,,其中4個角落之正方形再細刻16個小格,,深度均為0.1mm。當chamber上方蓋上蓋玻片后,,每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml,。使用時,計數(shù)每個大正方形內之細胞數(shù)目,,乘以稀釋倍數(shù),,再乘以104,即為每ml中之細胞數(shù)目,。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion,,利用染料會滲入死細胞中而呈色,而活細胞因細胞膜完整,,染料無法滲入而不會呈色,。一般使用藍色之trypan blue染料,如果細胞不易吸收trypan blue,,則用紅色之Erythrosin bluish,。計算細胞活率:活細胞數(shù)/(活細胞數(shù)+死細胞數(shù))×100%。計數(shù)應在臺盼蘭染色后數(shù)分鐘內完成,,隨時間延長,,部分活細胞也開始攝取染料;因為臺盼蘭對蛋白質有很強的親和力,用不含血清的稀釋液,,可以使染色計數(shù)更為準確,。