RAG-1 ELISA
RAG-1 ELISA標(biāo)本必須為液體,,不含沉淀。包括血清,、血漿,、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個(gè)標(biāo)本量收集體積=100ul×檢測(cè)種類,。
◇ 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。收集上清。如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
◇ 血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
◇ 尿液,、胸腹水、腦脊液:
用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
◇ 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
◇ 組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量,。加入一定量的PBS,,緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清置于-20度或- 70度保存,,如有必要,,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè),,其余冷凍備用,。
1.快速提?。?5分鐘快速基因組DNA提取,無需組織裂解試劑,,實(shí)驗(yàn)過程無需調(diào)pH值,、離心;
2.快速分型擴(kuò)增:45分鐘快速高效擴(kuò)增,;
3.擴(kuò)增試劑:分熱啟動(dòng)型和非熱啟動(dòng)型兩種,含有染料,,擴(kuò)增后可直接電泳,;
4.減少繁瑣步驟,,降低污染風(fēng)險(xiǎn),;
5.高通量操作:可在PCR儀上批量處理樣本;
6.擴(kuò)增產(chǎn)物末端加A,且可進(jìn)行下游酶切,、測(cè)序等;
7.節(jié)約成本,,提取+擴(kuò)增,合計(jì)低于6元,。
屬進(jìn)口分裝試劑盒類產(chǎn)品。公司還有血清,、細(xì)胞、抗體,、細(xì)胞因子、實(shí)驗(yàn)試劑,、移液器、實(shí)驗(yàn)耗材,、實(shí)驗(yàn)儀器及實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)等等產(chǎn)品,歡迎新老客戶,。
水貂的綠膿桿菌外毒素A能用小鼠的ELISA試劑盒檢驗(yàn)嗎,?
導(dǎo)向抗癌藥物—凍干重組人促黃體激素釋放激素-綠膿桿菌外毒素A融合蛋白已進(jìn)入“我國水貂病毒性腸炎病原分離,、鑒定,、特異性診斷及同源組織滅活疫苗的研究”
小鼠尾靜脈采血,,如何從全血中制備ELISA用血清,有什么原則嗎,?
放4℃過夜,然后4℃離心,,取上清即可用于ELISA。
細(xì)胞株
Q1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好,?還是冷凍好?
要冷藏?。∫?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí),,其溶液的pH值會(huì)發(fā)生改變,,溶液往往變堿,,某些成分溶解也會(huì)受到影響對(duì)細(xì)胞生長不利,。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個(gè)月 ~ 一年,。
Q2. 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用,及使用方法,。
幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),,在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞生長不良而死亡,。所以,,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺,。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,,應(yīng)置-20 ?C冰凍保存,,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí),,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺,。基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)細(xì)胞中心在其服務(wù)項(xiàng)目中配制分裝了高濃度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支),。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中,其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基,。包裝為粉紅色.細(xì)胞計(jì)數(shù)及存活測(cè)試 計(jì)算細(xì)胞數(shù)目可用血球計(jì)數(shù)盤,。