MSA ELISA

MSA ELISA標(biāo)本必須為液體,，不含沉淀,。包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個(gè)標(biāo)本量收集體積＝100ul×檢測(cè)種類,。
◇      血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。收集上清,。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
◇      血漿：
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
◇      尿液、胸腹水,、腦脊液：
用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
◇      細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),，用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
◇      組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶),。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清置于-20度或- 70度保存,，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè),，其余冷凍備用,。

1.快速提取：15分鐘快速基因組DNA提取,，無(wú)需組織裂解試劑,，實(shí)驗(yàn)過(guò)程無(wú)需調(diào)pH值、離心,；
2.快速分型擴(kuò)增：45分鐘快速高效擴(kuò)增,；
3.擴(kuò)增試劑：分熱啟動(dòng)型和非熱啟動(dòng)型兩種,，含有染料,，擴(kuò)增后可直接電泳；
4.減少繁瑣步驟,，降低污染風(fēng)險(xiǎn),；
5.高通量操作：可在PCR儀上批量處理樣本；
6.擴(kuò)增產(chǎn)物末端加A,，且可進(jìn)行下游酶切,、測(cè)序等；
7.節(jié)約成本,，提取+擴(kuò)增,，合計(jì)低于6元。

屬進(jìn)口分裝試劑盒類產(chǎn)品。公司還有血清,、細(xì)胞,、抗體、細(xì)胞因子,、實(shí)驗(yàn)試劑,、移液器、實(shí)驗(yàn)耗材,、實(shí)驗(yàn)儀器及實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)等等產(chǎn)品,，歡迎新老客戶。

水貂的綠膿桿菌外毒素A能用小鼠的ELISA試劑盒檢驗(yàn)嗎,？

導(dǎo)向抗癌藥物—凍干重組人促黃體激素釋放激素-綠膿桿菌外毒素A融合蛋白已進(jìn)入“我國(guó)水貂病毒性腸炎病原分離,、鑒定、特異性診斷及同源組織滅活疫苗的研究”

小鼠尾靜脈采血,，如何從全血中制備ELISA用血清,，有什么原則嗎？

放4℃過(guò)夜,，然后4℃離心,，取上清即可用于ELISA。

細(xì)胞株

　　Q1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好,？還是冷凍好,？

　　要冷藏！,！因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí),，其溶液的pH值會(huì)發(fā)生改變，溶液往往變堿,，某些成分溶解也會(huì)受到影響對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)不利,。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個(gè)月 ~ 一年,。

　　Q2. 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用,，及使用方法。

　　幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求,，細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),，在缺少谷氨酰胺時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡,。所以,，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,，應(yīng)置-20 ?C冰凍保存,，用前加入培養(yǎng)基中,。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí)，應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺,?；A(chǔ)醫(yī)學(xué)細(xì)胞中心在其服務(wù)項(xiàng)目中配制分裝了高濃度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支）。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中,，其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基,。包裝為粉紅色，-24?C保存

　　Q3.細(xì)胞計(jì)數(shù)及存活測(cè)試
1,、原理：
(1)計(jì)算細(xì)胞數(shù)目可用血球計(jì)數(shù)盤或是Coultercounter粒子計(jì)數(shù)器自動(dòng)計(jì)數(shù),。
(2)血球計(jì)數(shù)盤一般有二個(gè)chambers，每個(gè)chamber中細(xì)刻9個(gè)1mm2大正方形,，其中4個(gè)角落之正方形再細(xì)刻16個(gè)小格,，深度均為0.1mm。當(dāng)chamber上方蓋上蓋玻片后,，每個(gè)大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml,。使用時(shí)，計(jì)數(shù)每個(gè)大正方形內(nèi)之細(xì)胞數(shù)目,，乘以稀釋倍數(shù),，再乘以104，即為每ml中之細(xì)胞數(shù)目,。
(3)存活測(cè)試之步驟為dyeexclusion,，利用染料會(huì)滲入死細(xì)胞中而呈色，而活細(xì)胞因細(xì)胞膜完整,，染料無(wú)法滲入而不會(huì)呈色,。一般使用藍(lán)色之trypan blue染料，如果細(xì)胞不易吸收trypan blue,，則用紅色之Erythrosin bluish,。計(jì)算細(xì)胞活率：活細(xì)胞數(shù)/(活細(xì)胞數(shù)+死細(xì)胞數(shù))×100%。計(jì)數(shù)應(yīng)在臺(tái)盼蘭染色后數(shù)分鐘,。