Mouse Galectin-7 ELISA Kit
Mouse Galectin-7 ELISA Kit標本必須為液體,不含沉淀,。包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類。
◇ 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。收集上清,。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
◇ 血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
◇ 尿液、胸腹水,、腦脊液:
用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
◇ 細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
◇ 組織標本:
切割標本后,稱取重量,。加入一定量的PBS,,緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清置于-20度或- 70度保存,如有必要,,可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測,,其余冷凍備用。
1.快速提?。?5分鐘快速基因組DNA提取,,無需組織裂解試劑,實驗過程無需調(diào)pH值,、離心,;
2.快速分型擴增:45分鐘快速高效擴增;
3.擴增試劑:分熱啟動型和非熱啟動型兩種,,含有染料,,擴增后可直接電泳;
4.減少繁瑣步驟,,降低污染風(fēng)險,;
5.高通量操作:可在PCR儀上批量處理樣本;
6.擴增產(chǎn)物末端加A,,且可進行下游酶切,、測序等;
7.節(jié)約成本,,提取+擴增,,合計低于6元。
屬進口分裝試劑盒類產(chǎn)品,。公司還有血清,、細胞、抗體,、細胞因子,、實驗試劑、移液器,、實驗耗材,、實驗儀器及實驗技術(shù)服務(wù)等等產(chǎn)品,歡迎新老客戶,。
水貂的綠膿桿菌外毒素A能用小鼠的ELISA試劑盒檢驗嗎,?
導(dǎo)向抗癌藥物—凍干重組人促黃體激素釋放激素-綠膿桿菌外毒素A融合蛋白已進入“我國水貂病毒性腸炎病原分離、鑒定,、特異性診斷及同源組織滅活疫苗的研究”
小鼠尾靜脈采血,,如何從全血中制備ELISA用血清,有什么原則嗎,?
放4℃過夜,,然后4℃離心,取上清即可用于ELISA。
細胞株
Q1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好,?還是冷凍好,?
要冷藏!,!因為液體培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時,,其溶液的pH值會發(fā)生改變,溶液往往變堿,,某些成分溶解也會受到影響對細胞生長不利,。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年,。
Q2. 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用,,及使用方法。
幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求,,細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡,。所以,,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,,應(yīng)置-20 ?C冰凍保存,,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時,,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺,。基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)細胞中心在其服務(wù)項目中配制分裝了高濃度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支),。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中,,其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基。包裝為粉紅色,,-24?C保存
Q3.細胞計數(shù)及存活測試
1,、原理:
(1)計算細胞數(shù)目可用血球計數(shù)盤或是Coultercounter粒子計數(shù)器自動計數(shù)。
(2)血球計數(shù)盤一般有二個chambers,,每個chamber中細刻9個1mm2大正方形,,其中4個角落之正方形再細刻16個小格,深度均為0.1mm,。當chamber上方蓋上蓋玻片后,每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml,。使用時,,計數(shù)每個大正方形內(nèi)之細胞數(shù)目,乘以稀釋倍數(shù),,再乘以104,,即為每ml中之細胞數(shù)目,。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion,利用染料會滲入死細胞中而呈色,,而活細胞因細胞膜完整,,染料無法滲入而不會呈色。一般使用藍色之trypan blue染料,,如果細胞不易吸收trypan blue,,則用紅色之Erythrosin bluish。計算細胞活率:活細胞數(shù)/(活細胞數(shù)+死細胞數(shù))×100%,。計數(shù)應(yīng)在臺盼蘭染色后數(shù)分鐘,。