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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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36415ESrProtein L 4FF Chromatography Column, 1mL
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- 36415ES 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：291更新時間：2025-02-07 13:46:58
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,制藥/生物制藥 |
|---|
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品簡介
天然蛋白L（Protein L）是從馬格努斯消化鏈球菌分離出來的能和免疫球蛋白特異性結(jié)合的蛋白質(zhì),，分子量為36 KD。本產(chǎn)品使用的是基因改造后的蛋白L ,，既保留了與抗體k鏈結(jié)合的特性，同時也不會影響抗體的抗原結(jié)合位點,。與 protein A 和 Protein G 相比,，Protein L 更能廣泛地結(jié)合各種來源及亞類的抗體，包括人,、小鼠,、大鼠、兔和雞,，但不結(jié)合牛,、山羊或綿羊來源的免疫球蛋白。
rProtein L Agarose Resin 4FF是用于分離和純化單克隆抗體的通用性親和層析介質(zhì),，產(chǎn)品以高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠為基質(zhì),，重組Protein L為配基,，具有很高的物理化學穩(wěn)定性，可以在相對較高的流速下進行抗體的純化,，適用于工業(yè)客戶,。利用本產(chǎn)品經(jīng)過一步親和層析，可從腹水,、血清和培養(yǎng)液等樣品中得到高純度的抗體,，使用方便，應用廣泛,。
本品rProtein L 4FF Chromatography Column,，1 mL是一種裝填了rProtein L Agarose Resin 4FF的中壓預裝柱，規(guī)格1 mL,，預裝柱具有標準接口,，可以適配商品化的各類中壓色譜系統(tǒng)，如?KTA 等,，方便客戶操作,。
產(chǎn)品信息
貨號 | 36415ES03 / 36415ES08 |
規(guī)格 | 1 mL /5×1 mL |
產(chǎn)品性質(zhì)
基質(zhì)（Matrix） | 高度交聯(lián)的4%瓊脂糖微球 |
配體（Ligand） | 重組蛋白L |
孔徑（Bead size） | 45-165 µm |
最大流速（Flowmax） | 0.3 MPa, 3 bar |
儲存緩沖液（Buffer） | 含20%乙醇的1×PBS |
載量（Capacity） | ＞15 mg Mouse IgG/mL基質(zhì) |
pH范圍（pH range） | 3-10 |
儲存條件
2~8℃保存，有效期2年,。
需準備試劑
所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過濾除菌,。
平衡/洗雜緩沖液：0.15 M NaCl，20 mM Na2HPO4,，pH 7.0
洗脫緩沖液：0.1 M甘氨,，pH 3.0
中和液：1 M Tris-HCl，pH 8.5
使用說明
【注】上柱之前要確保樣品溶液有合適的離子強度和pH值,，可以用平衡/洗雜緩沖液對血清樣品,、腹水或細胞培養(yǎng)液稀釋，或者樣品用平衡/洗雜緩沖液透析,。樣品在上樣前最好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過濾,，減少雜質(zhì)以防阻塞柱子。
樣品純化（以Akta為例）
1）準備：將泵管道中注滿去離子水,。去掉上塞子,，將層析柱連接至色譜系統(tǒng)中。再折斷下口,，將預裝柱下端口接到色譜系統(tǒng)中,，并旋緊。
2）清洗：3-5倍柱體積去離子水沖洗層析柱中儲存液,。
3）平衡：用5倍柱體積的平衡Buffer平衡層析柱,，使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下，起到保護蛋白的作用。
4）上樣：將樣品加到平衡好的層析柱中,，推薦流速1-5 mL/min,，保證目的蛋白與樹脂充分接觸，提高目的蛋白的回收率,，收集流出液,，待檢測。
【注】樣品的粘度增加使得即使上樣體積很少,，也會導致層析柱很大的反壓,。上樣量不要超過柱子的結(jié)合能力。大量的樣品體積也可能造成很大的反壓,，使得進樣器更難使用,。
5）洗雜：用10-15倍柱體積的洗雜Buffer進行清洗，直到紫外吸收達到一個穩(wěn)定的基線,，去除非特異性吸附的雜蛋白,，收集洗雜液，待檢測,。
6）洗脫：用洗脫Buffer 采用一步法或線性梯度洗脫,。一步洗脫中，通常5倍柱體積洗脫液足夠?qū)⒛康牡鞍紫疵撓聛?。也可以用一個小的梯度,，例如20倍柱體積或更多，來分離不同結(jié)合強度的蛋白質(zhì),。
7）清洗及保存：依次使用3倍柱體積的平衡Buffer和5倍柱體積的去離子水平衡填料,，最后再用5倍柱體積的20%的乙醇平衡，然后保存在等體積的20%的乙醇中,，置于4℃保存,，防止填料被細菌污染。
2. SDS-PAGE檢測
將純化過程中得到的樣品（包括原始樣品,、流出組分,、洗雜及洗脫組分等）利用SDS-PAGE進行檢測，判定其純化效果,。
3. 填料清洗
rProtein L 4FF Chromatography Column可以重復使用而無需再生,，但隨著一些變性物質(zhì)的沉淀和蛋白的聚集，往往造成流速和結(jié)合載量下降,，影響柱子的性能，這時需對柱子進行清洗：
1）去除沉淀或變性物質(zhì)
用2倍柱體積的6 M 鹽酸胍溶液進行清洗,，然后立即用5倍柱體積的PBS,，pH 7.4 清洗。
2）去除由于疏水性吸附造成的非特異吸附物質(zhì)
用3-4倍柱體積的70%乙醇或2倍柱體積的1% Triton™ X-100清洗,，然后立即用5倍柱體積的PBS,，pH 7.4 清洗,。
注意事項
1. 請勿冷凍保存本產(chǎn)品。
2. 所有操作過程中,，樣本需要在4℃或冰上操作,。
3. 本產(chǎn)品僅作科研用途。
4. 為了您的安全和健康,，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作,。
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