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10145ES60耐U+高保真DNA聚合酶
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 10145ES60 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):406更新時間:2025-02-07 13:38:37

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100U
貨號 10145ES60 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
耐U+高保真DNA聚合酶:Hieff Canace Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase是一種基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代高保真DNA聚合酶,,和Pfu DNA Polymerase相比,Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase的性能得到大幅度提升
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

價格(元)

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase

Hieff Canace® 耐U+高保真DNA聚合酶

10145ES60

100 U

395.00

10145ES76

500 U

1995.00

耐U+高保真DNA聚合酶描述

Hieff Canace Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase是一種基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代高保真DNA聚合酶,和Pfu DNA Polymerase相比,,Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase的性能得到大幅度提升,針對復(fù)雜的模板也能快速準(zhǔn)確的完成PCR反應(yīng),。其保真性改善顯著,,且*克服了常規(guī)高保真酶無法以dUTP為原料進行聚合反應(yīng)、無法使用含有dUTP的擴增引物以及無法使用含有dUTP的DNA作為擴增模板等諸多弊病,。本產(chǎn)品配備了優(yōu)化后的酶緩沖液,,添加了PCR增強組分,使得該酶具有的擴增效率和廣泛的模板適應(yīng)性,,適合復(fù)雜模板的擴增,。擴增產(chǎn)物為平末端。

產(chǎn)品組分

組分編號

組分名稱

產(chǎn)品編號/規(guī)格

10145ES60(100 U)

10145ES76(500 U)

10145-A

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA Polymerase(1 U/μL)

100 μL

500 μL

10145-B

2×Canace® Uracil+ PCR buffer (含Mg2+,,dNTPs)

3×1 mL

15×1 mL

運輸和保存方法

冰袋運輸,。-20 °C保存,有效期一年,。

產(chǎn)品應(yīng)用

使用含dUTP的引物進行高保真文庫擴增

使用含dUTP的模板進行高保真文庫擴增

使用含dUTP的dNTP進行高保真文庫擴增

注意事項

1. 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2. 本產(chǎn)品僅作科研用途,!

使用方法

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase與常規(guī)高保真酶的使用方法略有不同,。在使用前,請務(wù)必仔細(xì)閱讀使用說明,。

1. 推薦反應(yīng)體系

所有操作應(yīng)于冰上進行,,2×Canace® Uracil+ PCR buffer解凍后請充分混勻。體系配置之前請預(yù)熱PCR儀,,各組分添加完成之后用移液器吸打充分混勻并短暫離心至管底,,然后置于預(yù)熱的PCR儀中進行反應(yīng)。所有組份使用完畢之后及時放回-20 °C保存,。

表1 PCR擴增反應(yīng)體系

組分

體積 (µL)

模板DNA

X

2×Canace® Uracil+ PCR buffer (含Mg2+,,dNTPs)

25

正向引物 (10-25 μM)

1-2.5

反向引物 (10-25 μM)

1-2.5

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase(1 U/µL)

1

ddH2O

Total to 50

【注】:

1) 模板:使用純化后的高質(zhì)量DNA模板可以顯著提高擴增效率和成功率。

2) dNTPs:反應(yīng)體系中dNTPs使用終濃度為200 μM,。試劑盒中提供的dNTPs中不含dUTP,,如特殊情況下需要制備含dUTP的模板,,可自行額外添加dUTP至終濃度為400 μM。

3) 聚合酶濃度:在50 μL體系中,,推薦使用1 U,,可以在0.5-2 U之間進行優(yōu)化,請勿超過2 U,。為了防止聚合酶因3’→5’外切酶活性降解引物,,建議將聚合酶在最后一步加到反應(yīng)體系中。

4) Mg2+終濃度:反應(yīng)體系中Mg2+終濃度為2 mM,。如有特殊需要,,可向我公司咨詢,要求提供低Mg2+濃度或不含Mg2+的buffer,。

2.推薦反應(yīng)程序

表2 PCR擴增反應(yīng)程序

步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

98 °C

1 min

1

變性

98 °C

圖片1.png10 sec

1-15(根據(jù)實驗要求)

退火

60 °C

30 sec

延伸

72 °C

30 sec

終延伸

72 °C

5 min

1

Hold

4 °C

-

-

【注】:

1)預(yù)變性溫度推薦使用98 °C,。預(yù)變性推薦時間:質(zhì)粒DNA等簡單模板為30 sec;文庫為1 min,;cDNA,、基因組DNA等復(fù)雜模板為3 min;高GC含量模板為5-10 min,。

2) 退火溫度推薦使用60 °C,,也可根據(jù)需要,設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度,。推薦退火時間為20 sec,可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié),。退火時間太長可能導(dǎo)致擴增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀,。

3) 延伸溫度和時間:推薦使用72 °C。延伸時間根據(jù)實際需要進行調(diào)整,。



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