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產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

Ceturegel™ Matrix 基質(zhì)膠(LDEV-Free)是從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出來的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白,，Ⅳ型膠原,，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包含生長因子如TGF-beta,、EGF,、IGF、FGF,、組織纖溶酶原激活物和EHS腫瘤自身含有的其他生長因子,。在室溫條件下，聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì),，模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu),、組成、物理特性和功能,，有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化,，可用于對細(xì)胞形態(tài)、生化功能,、遷移,、侵襲和基因表達(dá)等的研究。

基質(zhì)膠形成的三維培養(yǎng)基質(zhì),，可促進(jìn)上皮細(xì)胞,、肝細(xì)胞、塞爾托利氏細(xì)胞,、黑色素瘤細(xì)胞,、血管內(nèi)皮細(xì)胞、甲狀腺細(xì)胞及毛囊細(xì)胞等的貼壁與分化,。Ceturegel^TM基質(zhì)膠能影響成鼠肝臟細(xì)胞和人乳腺上皮細(xì)胞三維培養(yǎng)物的基因表達(dá),。同時，Ceturegel^TM 基質(zhì)膠可用作多種腫瘤細(xì)胞侵襲研究的基本支架,，體內(nèi)外血管新生研究的基質(zhì),，以及體內(nèi)動物模型移植瘤細(xì)胞生長的三維支架。Ceturegel^TM基質(zhì)膠還能支持外周神經(jīng)的新生和牛輸卵管上皮細(xì)胞的分化,。

YEASEN基質(zhì)膠為無菌制品,，濃度為8~20 mg/mL，滿足多種實驗要求,，包括：血管生成研究和腫瘤細(xì)胞遷移,。

產(chǎn)品組分

運輸與保存方法

干冰運輸,。-20℃保存，有效期兩年,。

產(chǎn)品應(yīng)用

1. Ceturegel^TM基底膜/基質(zhì)膠的融化與保存

【注】：Ceturegel^TM基質(zhì)膠對溫度非常敏感,，千萬不可多次重復(fù)凍融。Ceturegel^TM基質(zhì)膠的分裝以及凝膠前的準(zhǔn)備過程中都必須在冰上（4℃）操作,，因為溫度稍微提高，都很可能出現(xiàn)成膠現(xiàn)象,，從而導(dǎo)致基質(zhì)膠不均勻或者影響后續(xù)的凝膠,。用來盛放的試管或者分裝的槍頭都必須進(jìn)行預(yù)冷。

a）收到產(chǎn)品后,，如果暫時不使用,，請整瓶直接放到-20℃凍存（不要放在無霜冰箱內(nèi)）。

b）第一次使用,，將整瓶Ceturegel^TM基質(zhì)膠放入冰盒內(nèi)再放到4℃過夜,，使其充分融解。建議：在4℃ 14000 rpm離心20 min,，小心吸取上清,。

2. Ceturegel^TM基底膜/基質(zhì)膠的使用特別注意

基質(zhì)膠在22-35℃能夠快速成膠。為了保證Ceturegel^TM基質(zhì)膠的成膠性能與穩(wěn)定性,，最終稀釋濃度不應(yīng)低于3 mg/mL（Ceturegel^TM基質(zhì)膠原液的濃度因批次不同有差異）,。可用無血清培養(yǎng)基來稀釋Ceturegel^TM基質(zhì)膠,，稀釋后需要立即使用,。

A. 薄膠制備方法

1）融化后，用預(yù)冷的槍頭混勻Ceturegel^TM 基質(zhì)膠,。

2）將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上,，按50 μL/cm²生長面積的濃度加入Ceturegel^TM基質(zhì)膠。

3）在37℃放置30min,，此時平板即可使用,。

B. 厚膠制備方法

1）融化后，用預(yù)冷的槍頭混勻Ceturegel^TM基質(zhì)膠,。

2）將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上,，將培養(yǎng)的細(xì)胞與Ceturegel^TM基質(zhì)膠混合，用遇冷的槍頭使細(xì)胞懸浮均勻,。按照150-200 μL/cm²生長面積的濃度加入Ceturegel^TM基質(zhì)膠,。

3）在37℃放置30min，此時即可加入細(xì)胞培養(yǎng)液,。細(xì)胞也可生長在此厚膠的上層,。

C．薄層包被方法

1）融化后,，用預(yù)冷的槍頭混勻Ceturegel^TM基質(zhì)膠。

2）采用無血清培養(yǎng)基稀釋Ceturegel^TM基質(zhì)膠到需要的濃度,。建議根據(jù)具體的實驗做個梯度實驗,，從而確定最佳的包被濃度。

3）將稀釋的Ceturegel^TM基質(zhì)膠加入需要包被的培養(yǎng)器皿中,，包被量至少覆蓋細(xì)胞的所有生長表面,。室溫下孵育1小時。

4）去除未凝固結(jié)合的Ceturegel^TM基質(zhì)膠,，用無血清培養(yǎng)基輕輕地沖洗,。此時平板即可使用。

【注】：Ceturegel^TM基底膜/基質(zhì)膠包被的平板最好當(dāng)天使用,，但也可根據(jù)具體應(yīng)用調(diào)整,。包被好的平板加入培養(yǎng)基后，在37℃最久可存放1周,。

產(chǎn)品特性

Ceturegel^TM基質(zhì)膠會有色差變化（淡黃色到深紅色）,，是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的，但是與5% CO2平衡后色差即會減少,。凍融后,，輕輕搖晃試劑瓶使Ceturegel^TM基質(zhì)膠分散均勻。所有操作均需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，試劑瓶瓶蓋可用70％乙醇擦拭,，并自然干燥。應(yīng)使用預(yù)冷的移液器以保證Ceturegel^TM基質(zhì)膠呈勻漿狀,。

細(xì)胞可在0.5 mm厚度的Ceturegel^TM基質(zhì)層表面生長,，也可在1 mm厚度的Ceturegel^TM基質(zhì)膠三維基質(zhì)內(nèi)生長。過度稀釋的Ceturegel^TM基質(zhì)膠會形成非膠質(zhì)的蛋白層,，可以用于細(xì)胞貼壁,，但不能用于細(xì)胞的分化研究。

【注】：可將融化后的Ceturegel^TM分裝在多個小管,，所有分裝均需用預(yù)冷的凍存管,，迅速冷凍并保存，避免多次凍融,。

Ceturegel^TM在22-35℃溫度環(huán)境下快速成膠,，因此融化時在4℃冰上過夜解凍（4℃時會隨著溫度的上升部分成膠）。所有用品在使用前需置于冰浴,，必須使用預(yù)冷的移液管,、吸頭及小管操作Ceturegel^TM基質(zhì)膠。成膠后的Ceturegel^TM基質(zhì)膠可以在4℃ 24－48小時后重新呈液態(tài),。

注意事項

1. 產(chǎn)品的分裝,、使用等操作需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，與產(chǎn)品接觸的實驗器材（如：槍頭、產(chǎn)品管等）使用前需預(yù)冷,。

2. 為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3. 本產(chǎn)品僅供科研使用,，禁止用于人體,。

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