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Recombinant Human Fibronectin

 重組人纖維連接蛋白

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

細(xì)胞纖連蛋白（fibronectin，F(xiàn)N）是一種細(xì)胞外糖蛋白,，分別以可溶形式存在于體液中,，或以不可溶形式存在于細(xì)胞外 基質(zhì)中。作為主要的細(xì)胞粘附分子之一,，F(xiàn)N在許多重要的生理過(guò)程中起著關(guān)鍵性作用,，如胚胎生成，傷口愈合,，止血和血 栓形成,。纖連蛋白表達(dá)的改變，降解以及組合與大量的病理發(fā)生密切相關(guān),，包括癌癥和纖維化,。

FN一般以二聚體形式分泌，各個(gè)單體的分子量為220-250 kDa,。主要由成纖維細(xì)胞,、內(nèi)皮細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和肌細(xì)胞等合成,，并分布在周?chē)?span id="7k3avqrfm" class="bjFfcClass" style="color:red">器///官移///植會(huì)激發(fā)一系列的免疫級(jí)聯(lián)反應(yīng),，F(xiàn)N在T細(xì)胞活化過(guò)程表現(xiàn)為激活因子。所有FN由同一個(gè)基因編碼產(chǎn)生,，因轉(zhuǎn)錄后的 mRNA 經(jīng)組織特異性的不同切割方式生成不同的翻譯產(chǎn)物,。FN上的多個(gè)結(jié)構(gòu)域能 與膠原、纖維蛋白,、肝素和特異性細(xì)胞膜受體結(jié)合,。其中廣為人知的結(jié)合域是Arg-Gly-Asp序列（RGD），為整合素識(shí)別后 調(diào)控細(xì)胞粘附,。FN參與體內(nèi)眾多生理作用和功能,，如各種細(xì)胞間的吸附和遷移，細(xì)胞骨架組裝,，酪氨酸磷酸化和腫瘤轉(zhuǎn)移等,。

纖連蛋白（FN）的應(yīng)用：1）作為細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)；功能在于促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng),，提高細(xì)胞貼壁率,，增強(qiáng)細(xì)胞代謝水平,，縮短

細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間,；雜交瘤技術(shù)中提高細(xì)胞融合率等。2）疾病診斷和治療,；功能在于傷口修復(fù)和愈合,，癌癥診斷和治療，治療

血管系統(tǒng)和心腦血管疾病等,。

目前Yeasen公司運(yùn)用基因重組技術(shù),，生產(chǎn)的重組人纖維連接蛋白(Recombinant Human Fibronectin ,rFN)，是以單體形式存在,，分子量約為210 KDa,。可作為一種細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)，替換Matrigel,、鼠尾膠原,、血源纖連蛋白等，提高細(xì)胞貼壁率,，增強(qiáng)細(xì)胞代謝水平,，縮短細(xì)胞生長(zhǎng)周期。另外也可直接添加到培養(yǎng)基中,，可替換或降低血清使用量,，促進(jìn)細(xì)胞貼壁、遷移、移動(dòng)生長(zhǎng),、維持細(xì)胞狀態(tài),。

本品以?xún)龈煞坌问焦┴洠堰_(dá)到細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別,，具有批次間差異小,、無(wú)任何病毒感染等特點(diǎn)。

產(chǎn)品性質(zhì)

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。凍干粉-20 ℃保存,，2年以上有效,。儲(chǔ)存液-20 ℃保存，3~6個(gè)月有效,。
【注】：建議用1×PBS溶解凍干粉,，開(kāi)封后盡快使用，避免反復(fù)凍融,。

注意事項(xiàng)

1）干粉在凍干前,，原液是過(guò)濾無(wú)菌的，建議用無(wú)菌的PBS溶解,，不需要再過(guò)濾處理,。
2）用1×PBS溶解凍干粉后，建議分裝保存,，避免反復(fù)凍融,。
3）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

母液配制

用1×PBS,，pH 7.2~7.4溶解重組人纖維連接蛋白(rFN)，建議配置1 mg/mL的儲(chǔ)存液,。母液按照單次使用劑量,，分裝凍存于-20 ℃，避免反復(fù)凍融,。
 

使用方法（以6孔板為例,，其他培養(yǎng)板加樣體積請(qǐng)參考表1）

1.包被/鋪板實(shí)驗(yàn)
1）取出適量的重組人纖維連接蛋白（rFN），用無(wú)菌1×PBS,，pH 7.2~7.4稀釋至工作液濃度,，終濃度參考范圍50~100 μg/mL?；靹蚝?，加入到6孔板中,，800 μL/孔，保證工作液*覆蓋6孔板底部,。

2）將加有rFN工作液的6孔板,，放置在4 ℃過(guò)夜或者37 ℃包被1 h。

3）收集6孔板中的工作液,，放置4 ℃保存,，一周內(nèi)可用于其他培養(yǎng)瓶/板包被。

4）取出rFN包被后的6孔板,，加入正常的細(xì)胞培養(yǎng)基后,，可直接接種細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞貼壁,、生長(zhǎng)等,。

5）若包被后的6孔板暫不使用，放置在4 ℃密封保存,，建議一周內(nèi)使用完,。

【注】：包被/鋪板實(shí)驗(yàn)中，重組人纖維連接蛋白（rFN）工作液的加入量，應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)皿/瓶的大小進(jìn)行調(diào)整，請(qǐng)參見(jiàn)下表1,。

表1不同培養(yǎng)瓶/板包被時(shí)推薦 rFN加入量

2.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，將rFN直接加入細(xì)胞培養(yǎng)基中,，可促進(jìn)細(xì)胞貼壁、遷移、維持細(xì)胞狀態(tài)等。終濃度參考范圍5~50 μg/mL,。

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