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參考價(jià): | 面議 |
- 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):754更新時(shí)間:2025-02-07 13:55:26
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | 10730ES01 |
---|---|---|---|
應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
Hieff UNICON HotStart Taq DNA Polymerase, 50 U/μL
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase, 50 U/μL | 10730ES01 | 100 μL | 5152.00 |
Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase, 50 U/μL | 10730ES03 | 1 mL | 詢價(jià) |
Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase, 50 U/μL | 10730ES25 | 25 mL | 詢價(jià) |
產(chǎn)品描述
Hieff UNICON HotStart Taq DNA Polymerase是Hieff UNICON® Taq抗體(貨號:30301ES)和Hieff® Taq DNA Polymerase(貨號:10101ES)的混合產(chǎn)品,。Hieff UNICON® Taq抗體與Hieff® Taq DNA Polymerase具有很高的親和力,高溫50℃處理30 min,,依舊可以封閉Hieff® Taq DNA Polymerase的活性。本品在預(yù)變性溫度下加熱30 sec*失活,釋放出DNA聚合酶活性,。使用該熱啟動Taq酶可以有效抑制引物非特異性退火導(dǎo)致的擴(kuò)增。
Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase適用于熱啟動PCR和qPCR,。本品中的Hieff® Taq DNA Polymerase是熱穩(wěn)定重組型DNA聚合酶,,具有較高的模板親和力,非常適合低拷貝模板的擴(kuò)增,。擴(kuò)增產(chǎn)物具有3′-dA,,可輕松克隆T載體。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分 | 10730ES01 (100 μL) | 10730ES03 (1 mL) | 10730ES25 (25 mL) |
10730-A | HotStart Taq DNA Polymerase (50 U/μL) | 100 μL | 1 mL | 25 mL |
產(chǎn)品應(yīng)用
低拷貝基因擴(kuò)增,、基因型鑒定
活性定義
用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物,,74℃,30 min內(nèi),,攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個(gè)活性單位(U),。
質(zhì)量控制
DNA聚合酶活性封閉性檢測:在Hieff UNICON® HotStart Taq Buffer (Mg2+ Plus)中,65℃孵育30 min,,活性釋放低于5%,。
DNA聚合酶活性釋放檢測:在Hieff UNICON® HotStart Taq Buffer (Mg2+ Plus)中,95℃加熱30 sec,,活性釋放高于95%,。
核酸外切酶殘留檢測:20 μL反應(yīng)體系,10 U本品和0.6 μg λ-HindIII,,74℃孵育1 h,,DNA的電泳譜帶無變化。
核酸內(nèi)切酶殘留檢測:20 μL反應(yīng)體系,,10 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA,,74℃孵育1h,DNA電泳譜帶無變化,。
大腸桿菌殘留DNA檢測:50 μL體系中,,加入2 U本品,以無菌ddH2O為模板,,擴(kuò)增E.coil 16s rDNA基因,。35個(gè)循環(huán)后擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行1%瓊脂糖凝膠電泳,EB染色,,無擴(kuò)增條帶,。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存,,有效期2年,。
PCR反應(yīng)體系(50 μL)
組分 | 體積 (μL) | 終濃度 |
ddH2O | to 50 | - |
2×Taq Buffer(含Mg2+,、dNTP) | 25 | 1× |
模板DNA | 適量 | - |
Primer正向 (10 μM) | 2 | 0.4 μM |
Primer反向 (10 μM) | 2 | 0.4 μM |
Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase (50 U/μL) | 0.05 | 2.5 U/50 μL |
【注】:1)試劑使用:各組分使用前需充分融化混勻,。
2)聚合酶濃度:推薦使用2.5 U/50 μL,。可以在1.25-5 U/50 μL之間進(jìn)行優(yōu)化,。
3)Mg2+終濃度:體系終濃度為2 mM,。如有特殊需要,可用25 mM MgCl2,,以0.2-0.5 mM為間隔向上摸索,。
4)不同模板的推薦使用量(50 μL反應(yīng)體系):
模板種類 | 模板使用量 |
基因組DNA | 50 ng-200 ng |
質(zhì)粒DNA | 100 pg-20 ng |
cDNA | 1-5 μL (不超過反應(yīng)體系的1/10) |
PCR擴(kuò)增程序
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 95℃ | 1 min | 1 |
變性 | 95℃ | 10 sec | 35-40 |
退火 | 60℃ | 20 sec | |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | |
終延伸 | 72℃ | 10 min | 1 |
【注】:1)退火溫度和時(shí)間:溫度推薦使用50-60℃。退火溫度過低會導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增,。引物設(shè)計(jì)參考熒光定量引物標(biāo)準(zhǔn),。推薦退火時(shí)間設(shè)置為20 sec,可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié),。
2)延伸溫度和時(shí)間:溫度推薦使用72℃,。時(shí)間推薦使用30 sec/kb。
3)擴(kuò)增產(chǎn)物:請將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物放置于-20℃保存,,防止DNA發(fā)生降解,。
4)擴(kuò)增程序:本產(chǎn)品用于定量實(shí)驗(yàn),可使用2步法程序擴(kuò)增,,去掉延伸步驟,,退火和延伸合為一步,對應(yīng)的時(shí)間常用30 sec或根據(jù)儀器型號設(shè)置,,如Applied Biosystems 7300需用31 sec以上,。
注意事項(xiàng)
1)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作,。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) | *(元) |
Hieff Unicon® Hotstart Direct Taq DNA Polymerase, 5 U/μL | 10717ES72 | 250 U | 362.00 | |
Hieff Unicon® Hotstart Direct Taq DNA Polymerase, 5 U/μL | 10717ES76 | 500 U | 692.00 | |
Hieff Unicon® Hotstart Direct Taq DNA Polymerase, 5 U/μL | 10717ES80 | 1000 U | 1162.00 | |
Hieff Unicon® Hotstart Direct Taq DNA Polymerase, 5 U/μL | 10717ES92 | 10 KU | 9662.00 | |
Hieff Unicon® Hotstart Direct Taq DNA Polymerase, 5 U/μL(抗體法) | 10718ES96 | 100mL | 詢價(jià) | |
Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile 熱敏UDG | 10303ES76 | 500U | 3083.00 | |
Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix | 11211ES03 | 1mL | 1432.00 | |
Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix | 11211ES08 | 5mL | 5732.00 | |
Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix | 11211ES60 | 20×5mL | 詢價(jià) | |
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit | 11213ES60 | 100T | 2782.00 | 780.00 |
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit | 11213ES80 | 1000T | 21832.00 | 6800.00 |
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit | 11213ES92 | 10000T | 詢價(jià) | 詢價(jià) |
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus) | 11214ES60 | 100T | 3062.00 | 880.00 |
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus) | 11214ES80 | 1000T | 24062.00 | 7800.00 |
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus) | 11214ES92 | 10000T | 詢價(jià) | 詢價(jià) |
HB200522