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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

初級(jí)會(huì)員·13年

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10149ES012×Hieff Canace® 高保真酶預(yù)混液
參考價(jià): 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 10149ES01 產(chǎn)品型號(hào)
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):1180更新時(shí)間:2025-02-07 13:15:45

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初級(jí)會(huì)員·13年
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曹女士
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400-6111-883
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后:
4006-111-883
真:
86-21-34615995
址:
上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號(hào)3樓
網(wǎng)址:
www.yeasen.com

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100UL
貨號(hào) 10149ES01 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
2×Hieff Canace® 高保真酶預(yù)混液具有快速簡便,、靈敏度高,、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),,反應(yīng)體系只需加入引物和模板即可,并可以通過兩步法的程序進(jìn)行擴(kuò)增,,簡化了實(shí)驗(yàn)步驟,,節(jié)省了時(shí)間。本產(chǎn)品中不含染料,,PCR產(chǎn)物需加入Loading buffer后進(jìn)行電泳,。另外,該產(chǎn)品還含有特異保護(hù)劑,,使得預(yù)混液反復(fù)凍融后仍可維持穩(wěn)定活性,。
產(chǎn)品介紹

2×Hieff Canace® 高保真酶預(yù)混液信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格(元)

2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix 高保真酶預(yù)混液

10149ES01

100 μL

93.00

2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix 高保真酶預(yù)混液

10149ES03

1 mL

553.00

2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix 高保真酶預(yù)混液

10149ES08

5×1 mL

1453.00

2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix 高保真酶預(yù)混液10149ES5050×1ml11655.00
2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix 高保真酶預(yù)混液10149ES60100×1ml21655.00

2×Hieff Canace® 高保真酶預(yù)混液描述

2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix高保真酶預(yù)混液是即用型2×預(yù)混合溶液,包含Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase,,dNTP以及優(yōu)化的緩沖體系,。預(yù)混液中添加了Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase的熱啟動(dòng)因子,極大提高了擴(kuò)增的檢出率和產(chǎn)物的特異性,。預(yù)混液中添加了延伸因子使得該酶具有長片段擴(kuò)增能力,,擴(kuò)增目的片段的長度可長達(dá)10 kb,該酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性,,其保真性是Taq DNA聚合酶的52倍,,是普通Pfu DNA聚合酶的6倍。擴(kuò)增速度可達(dá)15 sec/kb,。適用于復(fù)雜模板的擴(kuò)增,,擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端。

2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix具有快速簡便、靈敏度高,、特異性強(qiáng),、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),反應(yīng)體系只需加入引物和模板即可,,并可以通過兩步法的程序進(jìn)行擴(kuò)增,,簡化了實(shí)驗(yàn)步驟,節(jié)省了時(shí)間,。本產(chǎn)品中不含染料,,PCR產(chǎn)物需加入Loading buffer后進(jìn)行電泳。另外,,該產(chǎn)品還含有特異保護(hù)劑,,使得預(yù)混液反復(fù)凍融后仍可維持穩(wěn)定活性。


產(chǎn)品應(yīng)用

基因克??;復(fù)雜DNA模板擴(kuò)增;高通量建庫,。


運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸,。-20℃保存。有效期2年,。


注意事項(xiàng)

1)解凍后Master Mix可能出現(xiàn)晶體沉淀,,使用前務(wù)必渦旋振蕩混勻至沉淀消失,不影響試劑性能,。

2)為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

3)本產(chǎn)品僅作科研用途,!


推薦PCR反應(yīng)體系(冰上配制)

組分

體積

終濃度

ddH2O

to 50 μL

-

DNA模板

適量

-

Primer正向 (10 μM)

2.5 μL

0.5 μM

Primer反向 (10 μM)

2.5 μL

0.5 μM

2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix

25 μL

【注】:

1)聚合酶終濃度:在1×預(yù)混液含有1 U/50 μL的聚合酶,。
2)引物:PCR反應(yīng)體系中引物終濃度的范圍為0.2-1 μM,推薦0.5 μM,。
3)Mg2+,、dNTP終濃度:在1×預(yù)混液含有1.5 mM Mg2+和200 μM的dNTP。
4)不同模板的推薦使用量(50 μL反應(yīng)體系):

模板種類

擴(kuò)增片段1 kb-10 kb

基因組DNA

50 ng-200 ng

質(zhì)?;虿《綝NA

10 pg-20 ng

cDNA

1-5 μL (不超過PCR反應(yīng)總體積的1/10)

PCR擴(kuò)增程序:有以下三種程序可選擇,,優(yōu)先選擇兩步法程序。

兩步法程序(優(yōu)先推薦):                          

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

98℃

3 min

1

變性

98℃

10 sec

30-35

延伸

68℃

30 sec/kb

終延伸

72℃

5 min

1

三步法程序(常規(guī)程序):

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

98℃

3 min

1

變性

98℃

10 sec

30-35

退火

60℃

20 sec

延伸

72℃

30 sec/kb

終延伸

72℃

5 min

1

梯度溫度退火程序(難擴(kuò)增基因推薦程序):        

步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

98℃

3 min

1

變性

98℃

10 sec

15,,每個(gè)循環(huán)降低1℃

梯度退火

70-55℃

20 sec

延伸

72℃

30 sec/kb

變性

98℃

10 sec

20

正常退火

55℃

20 sec

延伸

72℃

30 sec/kb

終延伸

72℃

5 min

1

【注】:

1)預(yù)變性溫度和時(shí)間:推薦溫度:98℃,,時(shí)間:3 min,,高GC含量模板5-10 min,。
2)退火溫度和時(shí)間:推薦溫度:60℃,也可根據(jù)需要,設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度,。推薦退火時(shí)間設(shè)置為20 sec,,可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié)。退火時(shí)間太長可能導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀,。
3)延伸溫度和時(shí)間:推薦溫度:72℃,。時(shí)間:30 sec/kb,復(fù)雜模板根據(jù)實(shí)際情況可延長至60 sec/kb,。
4)擴(kuò)增產(chǎn)物:請(qǐng)將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物放置于-20℃保存,,防止該酶降解擴(kuò)增產(chǎn)物。擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端,。
5)不同擴(kuò)增程序下的特點(diǎn):
     

程序類型

兩步法

三步法

梯度退火

速度

最快

中等

特異性

中等

PCR產(chǎn)量

中等

最高

中等

檢出率

中等

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

規(guī)格

Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase高保真DNA聚合酶

10148ES60/76/80

100/500/1000 U

零背景TOPO-Blunt平末端克隆試劑盒HOT

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零背景TOPO-Blunt平末端克隆試劑盒(不含MCS多克隆酶切位點(diǎn))

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多片段一步法快速克隆試劑盒HOT

10912ES10

10 T

定點(diǎn)突變?cè)噭┖蠬OT

11003ES10

10 T

多點(diǎn)突變?cè)噭┖蠬OT

11004ES10

10 T







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