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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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60401ES06動態(tài)濁度法內(nèi)毒素檢測鱟試劑
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- 60401ES06 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：1214更新時間：2022-02-11 12:32:24
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- www.yeasen.com
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1.7ML |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 60401ES06 | 應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
Kinetic Turbidimetric LAL Assays
動態(tài)濁度法內(nèi)毒素檢測鱟試劑
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格（元） |
Kinetic Turbidimetric LAL Assays 動態(tài)濁度法內(nèi)毒素檢測鱟試劑 | 60401ES06 | 1.7 mL | 4℃ | 1486 |
產(chǎn)品描述
鱟試劑為鱟科動物東方鱟的血液變形細胞溶解物的冷凍干燥品,，鱟試劑中含有C因子,、B因子、凝固酶原,、凝固蛋白原等,。
動態(tài)濁度法內(nèi)毒素檢測鱟試劑（Kinetic Turbidimetric LAL Assays）是通過檢測反應混合物的濁度到達某一預先設定的吸光度所需要的反應時間,，或是檢測濁度增加速度來檢測內(nèi)毒素的方法。在適宜的條件下（溫度,，pH值及無干擾物質(zhì)）,，細菌內(nèi)毒素激活C因子，引起一系列酶促反應,，使鱟試劑產(chǎn)生凝集反應形成凝膠,。隨著凝膠的形成，反應液的吸光度(OD值,，濁度)增加,，OD值增加的速度與內(nèi)毒素濃度成正相關(guān)。換言之,，OD值上升某一預設限值(啟動OD)所需要的時間(定義為啟動時間)與內(nèi)毒素濃度成負相關(guān),，啟動時間的對數(shù)與內(nèi)毒素濃度的對數(shù)成線性關(guān)系，據(jù)此,，可以定量供試品的內(nèi)毒素濃度,。
運輸與保存方法
冰袋運輸。4ºC,，避光保存,，有效期兩年。
注意事項
1）該試劑盒用于體外細菌內(nèi)毒素的定量檢測,，嚴禁試劑以任何途徑進入機體,。
2）接觸試劑及供試品的所有器皿必須是除熱原的。試驗過程應防止微生物的污染,。
3）該說明書中的除熱原指內(nèi)毒素濃度小于0.005 EU/ml,。
4）供試品的pH 值應在6.0-8.0之間，若超出此范圍,，需用除熱原的緩沖液,、0.1 M氫氧化鈉或0.1M鹽酸調(diào)節(jié)。
5）當供試品中可能存在鱟試驗的干擾物質(zhì)時,，須進行干擾試驗,，參見【供試品的干擾試驗】。
所需材料和設備
1. 試劑：內(nèi)毒素工作標準品,、鱟試劑,、細菌內(nèi)毒素檢查用水。
2. 器材：
除熱原試管,、除熱原吸頭,、除熱原加樣槽、除熱原96孔微板,。
旋渦混合器,、移液器,、多道移液器、試管架,。
帶溫育系統(tǒng)的動態(tài)光度測定儀器及配套軟件,，例如，微板鱟試儀ELx808及軟件TALgent 或Gen5,。
操作方法
1. 動態(tài)光度測定儀器的設定,，以微板鱟試儀ELx808為例：
預熱儀器，設置溫育溫度為37℃,。
設置模板及程序,。
設定讀板波長為340nm、630nm,，設定動力學參數(shù)：讀板90-120分鐘,， 每讀板間隔30-150s。
2. 內(nèi)毒素標準溶液配制
1）標準曲線所采用的內(nèi)毒素濃度可以為2至10倍稀釋的系列(如0.5,，0.25,，0.125，0.0625EU/ml 或10,，1,，0.1,，0.01EU/ml)),。
2）取內(nèi)毒素工作標準品1支，用砂輪沿安瓿頸部劃痕,，開啟,，加入適量（建議在0.5 ml-1.2 ml之間）細菌內(nèi)毒素檢查用水，置旋渦混合器上劇烈振搖5分鐘,。
3）將上述內(nèi)毒素溶液進一步用細菌內(nèi)毒素檢查用水稀釋成所需濃度,，每稀釋一步均應在旋渦混合器上劇烈振搖1分鐘。
稀釋的內(nèi)毒素溶液靜置時間超過10分鐘,，用前在旋渦混合器上劇烈振搖1分鐘,，配置時間超過4小時的內(nèi)毒素溶液應丟棄。(參見《內(nèi)毒素工作標準品使用說明書》),。
3. 陰性對照為細菌內(nèi)毒素檢查用水,。
4. 鱟試劑的溶解：按標示量加細菌內(nèi)毒素檢查用水于鱟試劑中，輕輕振搖使鱟試劑*溶解,。注意不要用旋渦混合器劇烈振搖,。溶解的鱟試劑應在10分鐘內(nèi)使用。
若采用多道移液器,，將溶解的鱟試劑轉(zhuǎn)移到除熱原加樣槽,，并輕輕搖勻,。
5. 實驗操作（微板鱟試儀ELx808）：
1）取除熱原微板，在各孔中分別加入100μl細菌內(nèi)毒素檢查用水,、內(nèi)毒素標準溶液,，或供試品。
2）將微板放置于鱟試儀中,，37℃溫育10分鐘,。
3）溫育結(jié)束，用移液器或多道移液器加入100μl 鱟試劑（避免產(chǎn)生氣泡!),，中速振搖10 秒混勻,，在340nm波長處，每30秒（到60秒）讀一次,，讀板120分鐘,。
數(shù)據(jù)處理
設定啟動OD(可以設為0.02, 一般可以在0.02到0.04之間)，軟件自動給出其啟動時間(T),。
建立標準曲線：lgT = b lgC + a,，其中T為啟動時間，C為內(nèi)毒素的濃度,，b為直線斜率,，a為Y軸截距。
當實驗數(shù)據(jù)同時滿足如下三個條件時實驗才有效：
① 標準曲線的濃度點≥ 3,，標準曲線的相關(guān)系數(shù)r ≤ -0.980,，
② 標準曲線低點的T值小于陰性對照的T值，
③ 供試品平行管的平均值在標準曲線的區(qū)間內(nèi),。
【供試品的干擾試驗】
① 當對新藥或無內(nèi)毒素檢查項的品種建立內(nèi)毒素檢查法時,，必須進行干擾試驗；
② 當鱟試劑,、供試品的來源,、配方、生產(chǎn)工藝改變,，或試驗環(huán)境中發(fā)生了任何有可能影響試驗結(jié)果的變化時,，必須重新進行干擾試驗；
③ 當供試品中可能存在鱟試驗的干擾物質(zhì)時,，須進行干擾試驗,。
步驟如下：、
1）選擇標準曲線中點或一個靠近中點的內(nèi)毒素濃度（設為λm）,，作為供試品干擾試驗中添加的內(nèi)毒素濃度,，如采用標準曲線為10，1，0.1,，0.01EU/ml 系列時, 可以用供試品配制0.1EU/ml 內(nèi)毒素濃度作為實驗的供試品陽性對照,。
2）用供試品溶液配制濃度為λm 的內(nèi)毒素溶液（即含λm 內(nèi)毒素的供試品陽性對照），測量出該溶液的內(nèi)毒素濃度,，稱為Cs,；
3）測量出未添加外源內(nèi)毒素的供試品溶液內(nèi)毒素濃度，稱為Ct,；
4）計算該試驗條件下的回收率R＝（Cs–Ct）/λm × 100%
5）當R在50%～200%之間,，則認為在此試驗條件下供試品溶液不存在明顯干擾作用。
6）當R在50%～200%之外,，需對供試品進行系列稀釋或進行其它處理消除干擾, 每一稀釋溶液都重復步驟2-4, 直到內(nèi)毒素的回收率R在50%～200%之間,。選擇回收率Rjie近100%的稀釋倍數(shù)進行內(nèi)毒素檢測。
(參見《中華人民共和國藥典》2010版中《細菌內(nèi)毒素檢查法》)
HB191220
