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Hieff Taq DNA Polymerase DNA聚合酶
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):1046更新時間:2025-02-07 13:35:06

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1000U
貨號 10101ES80 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
Hieff Taq DNA Polymerase DNA聚合酶是嗜熱性Thermus aquaticus表達的熱穩(wěn)定重組型DNA聚合酶,,分子量為94 KD,。具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性,無3’→5’外切酶活性,。擴增產(chǎn)物具有3′-dA,,可直接用于TA克隆。
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱        

產(chǎn)品編號

規(guī)格

價格(元)

Hieff Taq DNA Polymerase DNA聚合酶

10101ES80

1000 U

155.00

10101ES90

5×1000 U

735.00


產(chǎn)品描述

Hieff Taq DNA Polymerase DNA聚合酶是嗜熱性Thermus aquaticus表達的熱穩(wěn)定重組型DNA聚合酶,,分子量為94 KD,。具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性,無3’→5’外切酶活性,。擴增產(chǎn)物具有3′-dA,,可直接用于TA克隆。


產(chǎn)品組分

編號

組分

產(chǎn)品編號/規(guī)格

10101ES80(1000 U)

10101ES90(5×1000 U)

10101-A

10×Taq Buffer (Mg2+ Free)

4×1 mL

20×1 mL

10101-B

25 mM MgCl2

2×1 mL

10×1 mL

10101-C

Hieff® Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

200 μL

5×200 μL


產(chǎn)品應(yīng)用

基因型鑒定,、菌落PCR等常規(guī)PCR,。


活性定義

用活性化的大馬哈魚精DNA作為模板/引物,,74℃30 min內(nèi),,攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個活性單位(U),。


質(zhì)量控制

核酸外切酶殘留檢測:10 U本品和0.5 μg λDNA-Hind Ⅲ,37下孵育4 h,,DNA的電泳譜帶無變化,。

切口酶殘留檢測:10 U本品和0.5 μg IL23R質(zhì)粒,37下孵育4 h,,DNA的電泳譜帶無變化,。

RNase殘留檢測:10 U本品和0.5 μg 293T細胞總RNA,37下孵育1 h,,RNA的電泳譜帶無變化,。


運輸與保存方法

冰袋運輸,。-20℃保存,,有效期2年。


注意事項

1)為了您的安全和健康,,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作,。
2)本產(chǎn)品僅作科研用途!


PCR反應(yīng)體系(冰上配制)

組分

體積(μL)                  

終濃度

ddH2O

to 50  

-

10×Taq Buffer(Mg2+ Free)

5

25 mM MgCl2

3

1.5 mM

dNTP   Mix (10 mM each)

1 μL

0.2 mM

模板DNA

optional

-

引物1(10 μM)

2 μL

0.4 μM

引物2(10 μM)

2 μL

0.4 μM

Hieff® Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.4 μL

0.04 U/μL



1
Mg2+ 終濃度Mg2+最佳濃度為1.5-2 mM,,如有需要,,可0.2-0.5 mM為間隔向上摸索Mg2+最佳使用濃度。      
2
)聚合酶添加:室溫下聚合酶有一定程度的5’-3’聚合酶活性,,為了防止非特異性擴增,,建議將聚合酶在最后一步加到反應(yīng)體系中。
3)聚合酶濃度:推薦使用0.04 U/μL,??梢栽?/span>0.025-0.04 U/ μL之間進行優(yōu)化。  
4
)不同模板的推薦使用量(50 μL反應(yīng)體系):

模板種類

擴增片段

基因組DNA

50 ng~100 ng

質(zhì)粒DNA

10 pg~20 ng

cDNA

1~5 μL(不超過反應(yīng)體系的1/10)


PCR
擴增程序

循環(huán)步驟

溫度(oC)

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94

30 sec-5 min

1

變性

94

30 sec

35

退火

50-60

30 sec

延伸

72

60 sec/kb

終延伸

72

10 min

1


【注】:
1)預(yù)變性溫度和時間:推薦使用94℃,。預(yù)變性推薦時間:質(zhì)粒DNA等簡單模板為30 sec,;cDNA、基因組DNA等復(fù)雜模板為3 min,;高GC含量模板為5-10 min,。
2)退火溫度和時間:推薦使用60℃,也可根據(jù)需要,,設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度,。推薦退火時間設(shè)置為20 sec,可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié),。退火時間太長可能導(dǎo)致擴增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀,。

3)擴增產(chǎn)物:請將PCR擴增產(chǎn)物放置于-20℃保存,,防止DNA發(fā)生降解。


相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

2×Hieff® PCR Master Mix (With Dye) HOT

10102ES03/08

1/5×1 mL

2×Hieff® PCR Master Mix (No Dye)

10103ES03/08

1/5×1 mL

2×Hieff® Robust PCR Master Mix (With Dye) HOT

10106ES03/08

1/5×1 mL

Hieff® HotStart PCR Genotyping Master Mix(With Dye)

10108ES03/08

1/5×1 mL

2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix 高保真酶預(yù)混液

10149ES03/08

1/5×1 mL


HB210923




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