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參考價: | 面議 |
- 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):1046更新時間:2025-02-07 13:35:06
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- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1000U |
---|---|---|---|
貨號 | 10101ES80 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Hieff Taq DNA Polymerase DNA聚合酶 | 10101ES80 | 1000 U | 155.00 |
10101ES90 | 5×1000 U | 735.00 |
產(chǎn)品描述
Hieff Taq DNA Polymerase DNA聚合酶是嗜熱性Thermus aquaticus表達的熱穩(wěn)定重組型DNA聚合酶,,分子量為94 KD,。具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性,無3’→5’外切酶活性,。擴增產(chǎn)物具有3′-dA,,可直接用于TA克隆。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | |
10101ES80(1000 U) | 10101ES90(5×1000 U) | ||
10101-A | 10×Taq Buffer (Mg2+ Free) | 4×1 mL | 20×1 mL |
10101-B | 25 mM MgCl2 | 2×1 mL | 10×1 mL |
10101-C | Hieff® Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 200 μL | 5×200 μL |
產(chǎn)品應(yīng)用
基因型鑒定,、菌落PCR等常規(guī)PCR,。
活性定義
用活性化的大馬哈魚精DNA作為模板/引物,,74℃,30 min內(nèi),,攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個活性單位(U),。
質(zhì)量控制
核酸外切酶殘留檢測:10 U本品和0.5 μg λDNA-Hind Ⅲ,37℃下孵育4 h,,DNA的電泳譜帶無變化,。
切口酶殘留檢測:10 U本品和0.5 μg IL23R質(zhì)粒,37℃下孵育4 h,,DNA的電泳譜帶無變化,。
RNase殘留檢測:10 U本品和0.5 μg 293T細胞總RNA,37℃下孵育1 h,,RNA的電泳譜帶無變化,。
運輸與保存方法
冰袋運輸,。-20℃保存,,有效期2年。
注意事項
1)為了您的安全和健康,,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作,。
2)本產(chǎn)品僅作科研用途!
PCR反應(yīng)體系(冰上配制)
組分 | 體積(μL) | 終濃度 |
ddH2O | to 50 | - |
10×Taq Buffer(Mg2+ Free) | 5 | 1× |
25 mM MgCl2 | 3 | 1.5 mM |
dNTP Mix (10 mM each) | 1 μL | 0.2 mM |
模板DNA | optional | - |
引物1(10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
引物2(10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
Hieff® Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 0.4 μL | 0.04 U/μL |
【注】:
1)Mg2+ 終濃度:Mg2+最佳濃度為1.5-2 mM,,如有需要,,可0.2-0.5 mM為間隔向上摸索Mg2+最佳使用濃度。
2)聚合酶添加:室溫下聚合酶有一定程度的5’-3’聚合酶活性,,為了防止非特異性擴增,,建議將聚合酶在最后一步加到反應(yīng)體系中。
3)聚合酶濃度:推薦使用0.04 U/μL,??梢栽?/span>0.025-0.04 U/ μL之間進行優(yōu)化。
4)不同模板的推薦使用量(50 μL反應(yīng)體系):
模板種類 | 擴增片段 |
基因組DNA | 50 ng~100 ng |
質(zhì)粒DNA | 10 pg~20 ng |
cDNA | 1~5 μL(不超過反應(yīng)體系的1/10) |
PCR擴增程序
循環(huán)步驟 | 溫度(oC) | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94 | 30 sec-5 min | 1 |
變性 | 94 | 30 sec | 35 |
退火 | 50-60 | 30 sec | |
延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
終延伸 | 72 | 10 min | 1 |
【注】:
1)預(yù)變性溫度和時間:推薦使用94℃,。預(yù)變性推薦時間:質(zhì)粒DNA等簡單模板為30 sec,;cDNA、基因組DNA等復(fù)雜模板為3 min,;高GC含量模板為5-10 min,。
2)退火溫度和時間:推薦使用60℃,也可根據(jù)需要,,設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度,。推薦退火時間設(shè)置為20 sec,可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié),。退火時間太長可能導(dǎo)致擴增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀,。
3)擴增產(chǎn)物:請將PCR擴增產(chǎn)物放置于-20℃保存,,防止DNA發(fā)生降解。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
2×Hieff® PCR Master Mix (With Dye) HOT | 10102ES03/08 | 1/5×1 mL |
2×Hieff® PCR Master Mix (No Dye) | 10103ES03/08 | 1/5×1 mL |
2×Hieff® Robust PCR Master Mix (With Dye) HOT | 10106ES03/08 | 1/5×1 mL |
Hieff® HotStart PCR Genotyping Master Mix(With Dye) | 10108ES03/08 | 1/5×1 mL |
2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix 高保真酶預(yù)混液 | 10149ES03/08 | 1/5×1 mL |
HB210923