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過氧化氫酶(CAT)檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品描述

過氧化氫酶(CAT)檢測(cè)試劑盒Catalase Assay Kit是一種簡(jiǎn)單快速,、可通過測(cè)試吸光度來檢測(cè)動(dòng)物血清,、血漿、組織以及全血,、紅細(xì)胞,、培養(yǎng)細(xì)胞、培養(yǎng)液中的過氧化氫酶（CAT）的活力,。過氧化氫酶（CAT）催化H2O2分解為水和氧氣,，當(dāng)加入鉬酸銨后，反應(yīng)迅速終止,，剩余的H2O2與試劑盒中的鉬酸銨發(fā)生絡(luò)合反應(yīng),，得到淡黃色的產(chǎn)物。這個(gè)黃色產(chǎn)物的最大吸收波長(zhǎng)是405 nm ,。所以,，可以通過檢測(cè)405 nm處的吸光度，來測(cè)定樣品中的過氧化氫酶（CAT）的活力,。

羥基自由基（OH-）是很活潑的活性氧,，它能與細(xì)胞內(nèi)的許多有機(jī)物、核酸,、有機(jī)酸等等發(fā)生氧化反應(yīng),，破壞性強(qiáng)。過氧化氫酶（CAT）廣泛分布在血清,、血漿,、紅細(xì)胞等中，能分解活性氧,，保護(hù)細(xì)胞免受破壞,，因而測(cè)定過氧化氫酶（CAT）的活力至關(guān)重要。

產(chǎn)品組分
 

運(yùn)輸與保存
 

冰袋運(yùn)輸,；2℃～8℃避光保存即可,；保質(zhì)期6個(gè)月。

注意事項(xiàng)
 

1）加入試劑一和試劑二之前，要進(jìn)行37 ℃預(yù)熱,；

2）試劑三溶解,、保存后，使用前有沉淀,，直接取上清即可,，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；

3）當(dāng)天冷時(shí)試劑四會(huì)凝固,，使用前37 ℃水浴加熱至透明即可,；

4）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。
5）本產(chǎn)品僅作科研用途,！

使用說明
 

1.溶解試劑三：向試劑三（顯色粉劑）中加入100 mL的雙蒸水溶解；放入2℃～8℃冰箱避光保存（如果底部有不溶的粉末沉淀,，直接取上清即可,，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果）

2.預(yù)熱：實(shí)驗(yàn)之前，先將試劑盒中的試劑一和試劑二放在37 ℃水浴鍋中預(yù)熱10～20 min,，以備后用,；

3.加樣品，檢測(cè)吸光度：

A.血清,、血漿樣本吸光度檢測(cè)：

B.全血,、紅細(xì)胞樣本吸光度檢測(cè)：

1) 1：99溶血液配置：向50 μL全血或紅細(xì)胞樣本中加雙蒸水至5mL，混勻,，放置10 min,，待測(cè)；

2) 檢測(cè)吸光度：

C.組織樣本吸光度檢測(cè)：

1) 組織勻漿液制備：按組織重量（g）：生理鹽水體積（mL）=1:9的比例，在冰水浴條件下,，制備成10%的組織勻漿,，2500r/min離心10 min，取上清,；再用生理鹽水稀釋到最佳取樣濃度,，一般稀釋成：5%、2%,、1%,、0.5%、0.25%,、0.1%等不同的取樣濃度,，其中小鼠肝臟勻漿取樣濃度為0.25%～1%,。

2) 檢測(cè)吸光度：

4.過氧化氫酶活力計(jì)算

A.血清,、血漿中過氧化氫酶（CAT）活力計(jì)算（每毫升血清或血漿每秒鐘分解1μmol H2O2的量為一個(gè)活力單位）

血清中過氧化氫酶活力（U/mL）=（對(duì)照組OD值－實(shí)驗(yàn)組OD值）××樣本測(cè)試前稀釋倍數(shù)

B.血紅蛋白中過氧化氫酶（CAT）活力計(jì)算（每毫克血紅蛋白每秒鐘分解1μmol H2O2的量為一個(gè)活力單位）溶血液中過氧化氫酶活力（U/mgHb）=（空白對(duì)照組OD值＋自身對(duì)照組OD值－實(shí)驗(yàn)組OD值）×÷血紅蛋白含量（mgHb/mL）

C.組織勻漿中過氧化氫酶（CAT）活力計(jì)算（每毫克組織蛋白每秒鐘分解1μmol H2O2的量為一個(gè)活力單位）

組織勻漿中過氧化氫酶活力（U/mgprot）=（對(duì)照組OD值—實(shí)驗(yàn)組OD值）×÷待測(cè)樣本蛋白濃度（mgprot/mL）

HB20190802