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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100 T |
---|---|---|---|
貨號 | 50108ES60 | 應用領域 | 生物產業(yè),制藥 |
過氧化氫酶(CAT)檢測試劑盒
產品描述
過氧化氫酶(CAT)檢測試劑盒Catalase Assay Kit是一種簡單快速,、可通過測試吸光度來檢測動物血清、血漿,、組織以及全血,、紅細胞、培養(yǎng)細胞,、培養(yǎng)液中的過氧化氫酶(CAT)的活力,。過氧化氫酶(CAT)催化H2O2分解為水和氧氣,當加入鉬酸銨后,,反應迅速終止,,剩余的H2O2與試劑盒中的鉬酸銨發(fā)生絡合反應,得到淡黃色的產物,。這個黃色產物的最大吸收波長是405 nm ,。所以,可以通過檢測405 nm處的吸光度,,來測定樣品中的過氧化氫酶(CAT)的活力,。
羥基自由基(OH-)是很活潑的活性氧,它能與細胞內的許多有機物,、核酸,、有機酸等等發(fā)生氧化反應,,破壞性強。過氧化氫酶(CAT)廣泛分布在血清,、血漿,、紅細胞等中,能分解活性氧,,保護細胞免受破壞,,因而測定過氧化氫酶(CAT)的活力至關重要。
產品組分
產品編號 | 產品組分 | 產品規(guī)格 |
50108-A | 試劑一 | 100 mL |
50108-B | 試劑二 | 10 mL |
50108-C | 試劑三 | 7 g |
50108-D | 試劑四 | 10 mL |
運輸與保存
冰袋運輸,;2℃~8℃避光保存即可,;保質期6個月。
注意事項
1)加入試劑一和試劑二之前,,要進行37 ℃預熱,;
2)試劑三溶解、保存后,,使用前有沉淀,,直接取上清即可,,不影響實驗結果,;
3)當天冷時試劑四會凝固,使用前37 ℃水浴加熱至透明即可,;
4)為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5)本產品僅作科研用途,!
使用說明
1.溶解試劑三:向試劑三(顯色粉劑)中加入100 mL的雙蒸水溶解,;放入2℃~8℃冰箱避光保存(如果底部有不溶的粉末沉淀,直接取上清即可,,不影響實驗結果)
2.預熱:實驗之前,,先將試劑盒中的試劑一和試劑二放在37 ℃水浴鍋中預熱10~20 min,以備后用,;
3.加樣品,,檢測吸光度:
A.血清、血漿樣本吸光度檢測:
血清,、血漿樣本 | ||
實驗組 | 對照組 | |
試劑一(37 ℃預熱) | 1.0 mL | 1.0 mL |
試劑二(37 ℃預熱) | 0.1 mL | 0.1 mL |
血清/血漿 | 0.1 mL | |
混勻后,,在37 ℃中準確加熱1min(注意:一定要準確加熱反應1min),然后加試劑三和試劑四,; |
試劑三 | 1.0 mL | 1.0 mL |
試劑四 | 0.1 mL | 0.1 mL |
血清/血漿 | 0.1 mL | |
混勻,,在光徑為0.5 cm,波長為405 nm處,,雙蒸水調零,,檢測吸光度,。 |
B.全血、紅細胞樣本吸光度檢測:
1) 1:99溶血液配置:向50 μL全血或紅細胞樣本中加雙蒸水至5mL,,混勻,,放置10 min,待測,;
2) 檢測吸光度:
全血,、紅細胞樣本 | |||
實驗組 | 空白對照組 | 自身對照組 | |
蒸餾水 | 0.05 mL | 2.1 mL | |
1:99溶血液 | 0.05 mL | 0.05 mL | |
試劑一(37 ℃預熱) | 1.0 mL | 1.0 mL | |
試劑二(37 ℃預熱) | 0.1 mL | 0.1 mL | |
混勻后,在37 ℃中準確加熱1min(注意:一定要準確加熱反應1min),,然后加試劑三,; | |||
試劑三 | 1.0 mL | 1.0 mL | |
混勻,在光徑為0.5 cm,,波長為405 nm處,,雙蒸水調零,檢測吸光度,。 |
C.組織樣本吸光度檢測:
1) 組織勻漿液制備:按組織重量(g):生理鹽水體積(mL)=1:9的比例,,在冰水浴條件下,制備成10%的組織勻漿,,2500r/min離心10 min,,取上清;再用生理鹽水稀釋到最佳取樣濃度,,一般稀釋成:5%,、2%、1%,、0.5%,、0.25%、0.1%等不同的取樣濃度,,其中小鼠肝臟勻漿取樣濃度為0.25%~1%,。
2) 檢測吸光度:
組織樣本 | ||
實驗組 | 對照組 | |
試劑一(37 ℃預熱) | 1.0 mL | 1.0 mL |
試劑二(37 ℃預熱) | 0.1 mL | 0.1 mL |
組織勻漿 | 0.05 mL | |
混勻后,在37 ℃中準確加熱1min(注意:一定要準確加熱反應1min),,然后加試劑三和試劑四,; | ||
試劑三 | 1.0 mL | 1.0 mL |
試劑四 | 0.1 mL | 0.1 mL |
組織勻漿 | 0.05 mL | |
混勻,在光徑為0.5 cm,,波長為405 nm處,,雙蒸水調零,檢測吸光度,。 |
4.過氧化氫酶活力計算
A.血清,、血漿中過氧化氫酶(CAT)活力計算(每毫升血清或血漿每秒鐘分解1μmol H2O2的量為一個活力單位)
血清中過氧化氫酶活力(U/mL)=(對照組OD值-實驗組OD值)××樣本測試前稀釋倍數
B.血紅蛋白中過氧化氫酶(CAT)活力計算(每毫克血紅蛋白每秒鐘分解1μmol H2O2的量為一個活力單位)溶血液中過氧化氫酶活力(U/mgHb)=(空白對照組OD值+自身對照組OD值-實驗組OD值)×÷血紅蛋白含量(mgHb/mL)
C.組織勻漿中過氧化氫酶(CAT)活力計算(每毫克組織蛋白每秒鐘分解1μmol H2O2的量為一個活力單位)
組織勻漿中過氧化氫酶活力(U/mgprot)=(對照組OD值—實驗組OD值)×÷待測樣本蛋白濃度(mgprot/mL)
HB20190802