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20118ES免疫印跡及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 20118ES 產(chǎn)品型號(hào)
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 一周 | 貨號(hào) | 20118ES |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品介紹
Lysis Buffer for WB/IP Assays 免疫印跡及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 | 價(jià)格（元） |
Lysis Buffer for WB/IP Assays 免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液 | 20118ES60 | 100ml | -20℃ | 228.00 |
產(chǎn)品描述
本品細(xì)胞/組織裂解液,，WB/IP裂解液，是一種非變性條件下的裂解液,，含有sodium pyrophosphate,、β-glycerophosphate,、EDTA,、sodium orthovanadate和leupeptin等多種抑制劑，可以有效抑制蛋白降解,，并能維持原有的蛋白間的相互作用,。裂解得到的蛋白樣品可用于常規(guī)的Western、IP和Co-IP等實(shí)驗(yàn),。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋（wet ice）運(yùn)輸,。
-20℃保存，一年有效,。盡量避免反復(fù)凍融,，建議分裝后使用,。
注意事項(xiàng)
1）需自備PMSF。
2）裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行,。
3） 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白樣品，可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定其蛋白濃度（YEASEN CAT NO.20201ES76）,。由于含有較高濃度的去垢劑，不能用Bradford法測(cè)定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度,。
4）為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說(shuō)明：
(一) 細(xì)胞樣品
1）融解WB/IP裂解液,，混勻,。取適當(dāng)量的裂解液,，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,，使PMSF的zui終濃度為1mM。
2）貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液,，用PBS,、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液清洗細(xì)胞一遍(如果血清中的蛋白沒(méi)有干擾，可以不洗),。按照6孔板每孔加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后,，細(xì)胞就會(huì)被裂解。
懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞,，用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成5×105～1×106個(gè)細(xì)胞/管,，然后再裂解,。因?yàn)榇髨F(tuán)的細(xì)胞較難裂解充分，而少量的細(xì)胞由于裂解液容易和細(xì)胞充分接觸,，相對(duì)比較容易裂解充分,。
3）充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘,，取上清,，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western,、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作,。
裂解液用量說(shuō)明：通常6孔板每孔細(xì)胞加入100μl裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到150μl或200μl。
（二）組織樣品：
1）把組織|剪切成細(xì)小的碎片,。
2）融解WB/IP裂解液,，混勻。取適當(dāng)量的裂解液,，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF，使PMSF的zui終濃度為1mM,。
3）按照每20mg組織加入100-200μl裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當(dāng)減少裂解液的用量,。)
4）用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解,。
5）充分裂解后,，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清,，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE,、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作,。
6）如果組織樣品本身非常細(xì)小,，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過(guò)強(qiáng)烈vortex使樣品裂解充分,。然后同樣離心取上清,，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便,，不必使用勻漿器,，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得充分。
相關(guān)產(chǎn)品
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20120ES60 | 10× RIPA裂解液（中）（不含蛋白酶/磷酸酶抑制劑） | 100ml | 228.00 |
20121ES60 | 1× RIPA裂解液（強(qiáng)）（不含蛋白酶/磷酸酶抑制劑） | 100ml | 148.00 |
