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參考價(jià): | 面議 |
- 40912ES02 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
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Coelenterazine e 腔腸素e
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 | 價(jià)格(元) |
Coelenterazine e 腔腸素e | 40912ES02 | 1×500μg | -20℃避光 | 1329.00 |
40912ES03 | 2×500μg | -20℃避光 | 2359.00 |
背景描述
腔腸素(Coelenterazine)是自然界中資源zui豐富的天然熒光素,是絕大多數(shù)海洋發(fā)光生物(超過(guò)75%)的光能貯存分子,。腔腸素可作為許多熒光素酶的底物,,比如海腎熒光素酶(Rluc),Gaussia分泌型熒光素酶(Gluc),,以及包括水母發(fā)光蛋白(aequorin)和藪枝螅發(fā)光蛋白(Obelia)在內(nèi)的光蛋白(Photoproteins),。其發(fā)光原理是:以腔腸素為底物的熒光素酶在有分子氧的條件下,氧化腔腸素,,產(chǎn)生高能量的中間產(chǎn)物,,并在此過(guò)程中發(fā)射藍(lán)色光,峰值發(fā)射波長(zhǎng)約為450~480nm,。
腔腸素作為水母發(fā)光蛋白復(fù)合物(Aequorin)的組成成分,,只有與鈣離子(Ca2+)結(jié)合后,才能被氧化生成高能量產(chǎn)物Coelenteramide,,同時(shí)釋放出CO2和藍(lán)色熒光(~466nm),。其具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn):1)能檢測(cè)較大范圍的Ca2+濃度(0.1-100μM),;2)樣品無(wú)自體熒光,背景熒光較低,,盡管信號(hào)較熒光鈣離子指示劑弱,,但信噪比更高,因此具有較高靈敏度,;3)Aequorin能夠穩(wěn)定維持在細(xì)胞內(nèi),,能夠進(jìn)行數(shù)小時(shí)至數(shù)天Ca2+的監(jiān)測(cè)。
圖1. 腔腸素作為水母發(fā)光蛋白輔助因子的Ca2+依賴反應(yīng)流程
腔腸素具有能量轉(zhuǎn)移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,,BRET)的特性:在底物腔腸素存在的情況下,,熒光素酶(如Rluc)催化底物發(fā)生藍(lán)光,能量轉(zhuǎn)移到EYFP(增強(qiáng)的黃色熒光蛋白),,發(fā)出綠光(~530nm),。通過(guò)Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白兩者間的相互關(guān)系研究蛋白-蛋白之間的相互作用。BRET的信號(hào)可通過(guò)比較綠光和藍(lán)光的量來(lái)進(jìn)行測(cè)定,,消減了因細(xì)胞數(shù),、細(xì)胞類型和其他實(shí)驗(yàn)變量而引起的數(shù)據(jù)變量。
主要應(yīng)用
1. 活體成像,。
2. 報(bào)告基因檢測(cè),。
3. 檢測(cè)細(xì)胞/組織內(nèi)活性氧(ROS)水平:細(xì)胞和組織內(nèi)的超氧陰離子和過(guò)氧化亞硝基陰離子能夠增強(qiáng)腔腸素在酶非依賴性的氧化體系中自發(fā)熒光。
4. 高通量篩選,。
5. 監(jiān)測(cè)活細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平,。
產(chǎn)品描述
腔腸素e系天然腔腸素衍生物,結(jié)構(gòu)上比天然腔腸素多一個(gè)乙基,。作為海腎熒光素酶的底物,,其熒光強(qiáng)度是天然腔腸素的137%。腔腸素e具有zui高的體外水母發(fā)光蛋白反應(yīng)性,,且具有雙發(fā)射峰(405nm,、465nm),從而可在pCa 5-7范圍內(nèi)通過(guò)雙波長(zhǎng)的比例測(cè)定Ca2+濃度,。該法不依賴于腔腸素濃度,,可提高檢測(cè)精確性。
產(chǎn)品性質(zhì)
英文別名(English synonym) | e-CTZ; e Coelenterazine |
CAS號(hào)(CAS NO.) | 114496-02-5 |
分子式(Formula) | C28H23N2O3 |
分子量(Molecular weight) | 449.5g/mol |
溶解性(Solubility) | 溶于甲醇或者乙醇,,不溶于DMSO |
外觀(Apperance) | 黃色至橘色固體 |
純度(Purity)(TLC) | ≥95% |
結(jié)構(gòu)(Structure) |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸,。粉末-20℃避光干燥保存,保存在惰性氣體環(huán)境下,,避免接觸空氣,。
使用方法
- e工作液的配制
- e-CTZ水溶液中不穩(wěn)定,建議使用前配制新鮮工作液
1. 溶解e-CTZ粉末于酸化乙醇,,配制成1mg/ml儲(chǔ)存液,;
2. 利用配好的儲(chǔ)存液稀釋到合適濃度的水溶液,,如用于光度計(jì)分析的濃度為100μM;
3. 將儲(chǔ)存液于-80℃凍存,。切忌凍存水溶性工作液,工作液會(huì)被氧化而明顯降低e-CTZ活性,。
注意事項(xiàng)
1. 腔腸素e粉末使用惰性氣體(如氮?dú)饣驓鍤猓?,在密封良好的塑料管中避光保存?20℃,長(zhǎng)期保存于-70℃,。管內(nèi)即使有少量空氣進(jìn)入,,也可能造成腔腸素e氧化失活,使量化分析的結(jié)果難以在不同試驗(yàn)間進(jìn)行比較,。
2. 腔腸素e細(xì)胞通透性較差,,因此對(duì)于細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度測(cè)定的相關(guān)實(shí)驗(yàn),精確度無(wú)法保證,。
3. 為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
附錄1. 腔腸素及其衍生物的特性
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 基本描述 | Em (nm) | RLC* | Relative Intensity | Half-rise time (ms)** |
40904 | 天然腔腸素 Coelenterazine native | 水母發(fā)光蛋白的輔助因子,,高靈敏度化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)Ca2+濃度(0.1~100µM),。常用作Rluc和Gluc等熒光素酶的報(bào)告基因檢測(cè)底物。BRET分析,,以及細(xì)胞/組織樣本中的超氧陰離子和過(guò)氧化亞硝基陰離子的化學(xué)發(fā)光檢測(cè),。快速再生能力比較重要的實(shí)驗(yàn)推薦使用本底物,。 | 466 | 1.00 | 1 | 6-30 |
40906 | 腔腸素h Coelenterazine h | 一種水母發(fā)光蛋白復(fù)合物,,其發(fā)光強(qiáng)度比天然腔腸素高10倍以上。適用于報(bào)告基因分析,。 | 466 | 0.75 | 16 | 6-30 |
40910 | 腔腸素hcp Coelenterazine hcp | 腔腸素hcp-水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的熒光強(qiáng)度比天然腔腸素復(fù)合物高190倍,,且量子產(chǎn)量高和Ca2+反應(yīng)速度快。 | 445 | 0.65 | 500 | 2-5 |
40909 | 腔腸素cp Coelenterazine cp | Coelenterazine cp 光蛋白復(fù)合物的發(fā)光強(qiáng)度是天然腔腸素的15倍,,且具有更快的Ca2+反應(yīng)性,。 | 442 | 0.63 | 28 | 2-5 |
40908 | 腔腸素f Coelenterazine f | 腔腸素f-光蛋白復(fù)合物的發(fā)光強(qiáng)度是天然腔腸素的20倍。其具有的細(xì)胞滲透性,。當(dāng)需要*的檢測(cè)Ca2+靈敏度研究水母蛋白再生實(shí)驗(yàn)研究中,,推薦使用本底物。 | 472 | 0.80 | 20 | 6-30 |
40911 | 腔腸素n Coelenterazine n | 所有的腔腸素衍生物中熒光強(qiáng)度是zui弱的,,且對(duì)Ca2+反應(yīng)速率也明顯低于天然腔腸素,。非常有用的Ca2+低靈敏檢測(cè)底物。 | 468 | 0.25 | 0.15 | 6-30 |
40912 | 腔腸素e Coelenterazine e | 具有zui高的體外水母發(fā)光蛋白反應(yīng)性,,且具有雙發(fā)射峰,,可在pCa5-7范圍內(nèi)通過(guò)雙波長(zhǎng)的比例測(cè)定Ca2+濃度,,從而提高檢測(cè)精確性。腔腸素e的熒光強(qiáng)度是天然腔腸素的137%,。 | 405 & 465 | 0.5 | 4 | 0.15-0.3 |
40913 | 2-methyl Coelenterazine 二甲基腔腸素 | 可高效作用于ROS(如單態(tài)氧,、超氧陰離子),是一種已報(bào)道的強(qiáng)抗氧化劑,。 | / | / | / | / |
40905 | 腔腸素 400a Coelenterazine 400a | BRET研究中Rluc的*底物,。在390nm和400nm之間發(fā)藍(lán)色光,對(duì)GFP受體蛋白的光發(fā)射干擾zui小,。不可作為Gluc底物,。 | 400 | / | / | / |
*RLC = relative luminescence capacity : Total time-integrated emission of aequorin in saturating Ca2+ relative to native aequorin = 1.0 **Half-Rise Time : The half-rise time is the time for the luminescence signal to reach 50% of the maximum after addition of 1mM Ca2+ to a standard of aequorin reconstituted with the coelenterazine analog of interest. All data are from O. Shimomura in Cell Calcium 14, 373 (1993). |
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40908ES03 | 2×500μg | 2359.00 | |
Coelenterazine cp 腔腸素cp | 40909ES72 | 1×250μg | 2359.00 |
Coelenterazine hcp 腔腸素hcp | 40910ES72 | 1×250μg | 2359.00 |
Coelenterazine n 腔腸素n | 40911ES72 | 1×250μg | 2359.00 |
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