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- 40911ES72 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
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Coelenterazine n 腔腸素n
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格(元) |
Coelenterazine n 腔腸素n | 40911ES72 | 1×250μg | -20℃避光保存 | 2359.00 |
背景描述
腔腸素(Coelenterazine)是自然界中資源zui豐富的天然熒光素,,是絕大多數(shù)海洋發(fā)光生物(超過75%)的光能貯存分子,。腔腸素可作為許多熒光素酶的底物,比如海腎熒光素酶(Rluc),,Gaussia分泌型熒光素酶(Gluc),,以及包括水母發(fā)光蛋白(aequorin)和藪枝螅發(fā)光蛋白(Obelia)在內(nèi)的光蛋白(Photoproteins)。其發(fā)光原理是:以腔腸素為底物的熒光素酶在有分子氧的條件下,,氧化腔腸素,,產(chǎn)生高能量的中間產(chǎn)物,并在此過程中發(fā)射藍(lán)色光,,峰值發(fā)射波長約為450~480nm。
腔腸素作為水母發(fā)光蛋白復(fù)合物(Aequorin)的組成成分,,只有與鈣離子(Ca2+)結(jié)合后,,才能被氧化生成高能量產(chǎn)物Coelenteramide,,同時釋放出CO2和藍(lán)色熒光(~466nm)。其具有以下幾個優(yōu)點(diǎn):1)能檢測較大范圍的Ca2+濃度(0.1-100μM),;2)樣品無自體熒光,,背景熒光較低,盡管信號較熒光鈣離子指示劑弱,,但信噪比更高,,因此具有較高靈敏度;3)Aequorin能夠穩(wěn)定維持在細(xì)胞內(nèi),,能夠進(jìn)行數(shù)小時至數(shù)天Ca2+的監(jiān)測,。
圖1. 腔腸素作為水母發(fā)光蛋白輔助因子的Ca2+依賴反應(yīng)流程
腔腸素具有能量轉(zhuǎn)移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET)的特性:在底物腔腸素存在的情況下,,熒光素酶(如Rluc)催化底物發(fā)生藍(lán)光,,能量轉(zhuǎn)移到EYFP(增強(qiáng)的黃色熒光蛋白),發(fā)出綠光(~530nm),。通過Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白兩者間的相互關(guān)系研究蛋白-蛋白之間的相互作用,。BRET的信號可通過比較綠光和藍(lán)光的量來進(jìn)行測定,消減了因細(xì)胞數(shù),、細(xì)胞類型和其他實驗變量而引起的數(shù)據(jù)變量,。
主要應(yīng)用
1. 活體成像。
2. 報告基因檢測,。
3. 檢測細(xì)胞/組織內(nèi)活性氧(ROS)水平:細(xì)胞和組織內(nèi)的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子能夠增強(qiáng)腔腸素在酶非依賴性的氧化體系中自發(fā)熒光,。
4. 高通量篩選。
5. 監(jiān)測活細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平,。
產(chǎn)品描述
腔腸素n(Coelenterazine n)是粉末形式的腔腸素衍生物,,它的熒光強(qiáng)度在所有的腔腸素衍生物中是zui弱的,且對Ca2+反應(yīng)速率也明顯低于天然腔腸素,。是非常有用的Ca2+低靈敏檢測底物,。
產(chǎn)品性質(zhì)
英文別名(English synonym) | CLZN-n |
分子式(Formula) | C30H23N3O2 |
分子量(Molecular weight) | 457.52g/mol |
溶解性(Solubility) | 可溶于甲醇和乙醇,不溶于DMSO |
外觀(Apperance) | 黃色至棕色粉末 |
純度(Purity)(TLC) | ≥95% |
結(jié)構(gòu)(Structure) |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸,。粉末-20℃避光干燥保存,,保存在惰性氣體環(huán)境下,避免接觸空氣,。
腔腸素n溶液的配制
腔腸素n溶解特性:不溶于水,。目前毒性zui低的溶劑是100%乙醇,可配制濃度為0.1-1mg/ml,。加入pH低于7.0的酸性緩沖液(堿性pH會快速降解底物)稀釋成低濃度工作液,。切忌溶于DMSO。
腔腸素n保存特性:建議溶液現(xiàn)配現(xiàn)用,!體外實驗,,需將稀釋后的工作液室溫放置20-30min,,方可穩(wěn)定工作。該工作液可室溫穩(wěn)定放置3-4h,,有非常微弱的信號衰減發(fā)生,。不建議儲存液-20℃或更低溫度保存,因為其高能量的二氧環(huán)丁酮結(jié)構(gòu)即使在低溫的情況下也會發(fā)生降解,,導(dǎo)致熒光強(qiáng)度明顯變?nèi)?。短時間保存條件:-70℃避光保存于塑料管內(nèi)(溶液中不含有Ca2+),且有惰性氣體保護(hù),。
注意事項
1. 粉末使用惰性氣體(氮?dú)饣驓鍤猓?,在密封良好的塑料管中避光保存?20℃,長期保存于-70℃,。管內(nèi)即使存在少量空氣,,可能造成腔腸素n氧化失活,造成在不同試驗間的量化分析結(jié)果無法比較,。
2. 本品接觸空氣,,水或者任何氧化試劑會不穩(wěn)定。
3. 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
附錄1. 腔腸素及其衍生物的特性
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 基本描述 | Em (nm) | RLC* | Relative Intensity | Half-rise time (ms)** |
40904 | 天然腔腸素 Coelenterazine native | 水母發(fā)光蛋白的輔助因子,高靈敏度化學(xué)發(fā)光法檢測Ca2+濃度(0.1~100µM),。常用作Rluc和Gluc等熒光素酶的報告基因檢測底物,。BRET分析,以及細(xì)胞/組織樣本中的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子的化學(xué)發(fā)光檢測,??焖僭偕芰Ρ容^重要的實驗推薦使用本底物。 | 466 | 1.00 | 1 | 6-30 |
40906 | 腔腸素h Coelenterazine h | 一種水母發(fā)光蛋白復(fù)合物,,其發(fā)光強(qiáng)度比天然腔腸素高10倍以上,。適用于報告基因分析。 | 466 | 0.75 | 16 | 6-30 |
40910 | 腔腸素hcp Coelenterazine hcp | 腔腸素hcp-水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的熒光強(qiáng)度比天然腔腸素復(fù)合物高190倍,,且量子產(chǎn)量高和Ca2+反應(yīng)速度快,。 | 445 | 0.65 | 500 | 2-5 |
40909 | 腔腸素cp Coelenterazine cp | Coelenterazine cp 光蛋白復(fù)合物的發(fā)光強(qiáng)度是天然腔腸素的15倍,且具有更快的Ca2+反應(yīng)性,。 | 442 | 0.63 | 28 | 2-5 |
40908 | 腔腸素f Coelenterazine f | 腔腸素f-光蛋白復(fù)合物的發(fā)光強(qiáng)度是天然腔腸素的20倍,。其具有的細(xì)胞滲透性。當(dāng)需要*的檢測Ca2+靈敏度研究水母蛋白再生實驗研究中,,推薦使用本底物,。 | 472 | 0.80 | 20 | 6-30 |
40911 | 腔腸素n Coelenterazine n | 所有的腔腸素衍生物中熒光強(qiáng)度是zui弱的,且對Ca2+反應(yīng)速率也明顯低于天然腔腸素,。非常有用的Ca2+低靈敏檢測底物,。 | 468 | 0.25 | 0.15 | 6-30 |
40912 | 腔腸素e Coelenterazine e | 具有zui高的體外水母發(fā)光蛋白反應(yīng)性,,且具有雙發(fā)射峰,可在pCa5-7范圍內(nèi)通過雙波長的比例測定Ca2+濃度,,從而提高檢測精確性。腔腸素e的熒光強(qiáng)度是天然腔腸素的137%,。 | 405 & 465 | 0.5 | 4 | 0.15-0.3 |
40913 | 2-methyl Coelenterazine 二甲基腔腸素 | 可高效作用于ROS(如單態(tài)氧,、超氧陰離子),是一種已報道的強(qiáng)抗氧化劑,。 | / | / | / | / |
40905 | 腔腸素 400a Coelenterazine 400a | BRET研究中Rluc的*底物,。在390nm和400nm之間發(fā)藍(lán)色光,對GFP受體蛋白的光發(fā)射干擾zui小,。不可作為Gluc底物,。 | 400 | / | / | / |
*RLC = relative luminescence capacity : Total time-integrated emission of aequorin in saturating Ca2+ relative to native aequorin = 1.0 **Half-Rise Time : The half-rise time is the time for the luminescence signal to reach 50% of the maximum after addition of 1mM Ca2+ to a standard of aequorin reconstituted with the coelenterazine analog of interest. All data are from O. Shimomura in Cell Calcium 14, 373 (1993). |
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40912ES03 | 2×500μg | 2359.00 |