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36602ES60TMB One Solution （HRP-based ELISA）
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 36602ES60 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：1275更新時間：2025-02-07 13:37:33
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品描述
TMB，即3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine,，中文全稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺,，是辣根過氧化物酶（HRP）的常用顯色底物之一,。在HRP的催化下,，TMB被過氧化氫（H2O2）氧化生成藍色產(chǎn)物。主要吸收峰在370nm和652nm,。在加入硫酸或者磷酸終止上述反應(yīng)后,，產(chǎn)物轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色，最大吸收峰為450 m,。傳統(tǒng)的TMB顯色試劑通常以AB液形式提供（TMB和H2O2溶液分到兩管,，僅在使用前才可混合使用），并且容易產(chǎn)生沉淀,，使用起來相對不方便,，且容易導(dǎo)致操作誤差。為克服以上缺點,，我司采用新的TMB顯色技術(shù),，將所有相關(guān)試劑全部混合配成單一溶液。具有以下優(yōu)點：
1）即開即用,，操作簡單,，使用前無需做AB液混合的準(zhǔn)備；檢測靈敏度不低于AB液體系,；
2）僅由單一溶液組成,，簡化了操作步驟，也降低了操作誤差,，結(jié)果更加穩(wěn)定,；
3）含有 的穩(wěn)定劑，保證溶液4℃下長期保存,；
4）相比于其他HRP酶顯色底物（如ABTS和OPD）相比,，檢測靈敏度更高，而且本TMB溶液不含有DMF或DMSO等有機溶劑,，安全無毒,；
5）另外，TMB溶液可分為沉淀可溶型和沉淀不可溶型,，前者適用于ELISA及其他通過液體反應(yīng)檢測HRP的應(yīng)用,，后者適用于WB或其他通過沉淀反應(yīng)檢測HRP的應(yīng)用。
本品為單一溶液形式且沉淀可溶型的TMB顯色液,，適用于ELISA檢測,，操作時只需加入200μl即用型的顯色液，做簡單孵育，加入2M H2SO4終止反應(yīng)后,，即可用分光光度計在450nm處測定吸光度,。本品可供完成約500個樣品的檢測。另外,，本品也可用于血液或血紅蛋白等樣品中過氧化物酶量的檢測,。
運輸和保存方法
冰袋運輸。4℃避光保存,，一年有效,。
注意事項
1）TMB對人體有刺激性，請注意適當(dāng)防護,。
2）正常情況,，本顯色液呈現(xiàn)無色或者淡藍色（OD650nm＜0.04）。若是出現(xiàn)渾濁,，或者顏色明顯很藍,，應(yīng)停止使用。
3）為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
4）本產(chǎn)品僅作科研用途！
使用方法
1） 使用之前,，取出適量單組份TMB顯色液,，使其回到室溫再開始使用；
2） 對于ELISA檢測：參考ELISA 檢測試劑盒的實驗步驟,，當(dāng)加入HRP標(biāo)記的抗體并孵育一段時間后,，用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5次，每次3-5min,。洗滌完畢后,，去除洗滌液,，加入200μl TMB顯色液,。
對于在96孔板內(nèi)進行的其他適當(dāng)檢測（如檢測組織或細胞樣品內(nèi)源性過氧化物水平）：直接在96孔板內(nèi)加入10-20μl 樣品，之后加入200μl TMB顯色液,；
3） 室溫避光孵育3-30min或更長時間（可長達24h）,，直至顯色至預(yù)期深淺（此時反應(yīng)液為藍色）。
4） 加入50μl 2M H2SO4終止反應(yīng),，溶液由藍色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色,，隨后在450nm測定吸光度。或直接在370nm或652nm測定吸光度,。
常見問題
1. 背景顯色太深
1）如果背景（沒有樣品的對照）顯色太深,，一方面需考慮使用適當(dāng)?shù)姆忾]液進行封閉,，如商業(yè)化的封閉液或者商業(yè)化的和一抗相同來源的血清（5-10%）進行封閉。另一方面,，直接使用經(jīng)過適當(dāng)親和吸附的二抗,，以減小二抗的非特異性交叉吸附。
2）可以考慮縮短顯色時間,，或降低二抗?jié)舛?。另外，選擇適當(dāng)強度的洗滌液,，或延長洗滌時間也會有所幫助,。
3）可考慮TMB底物本身反應(yīng)過于強烈,。為了避免沉淀的產(chǎn)生,，可在終止反應(yīng)后馬上讀數(shù)，或者進一步稀釋一抗和/或HRP結(jié)合物,。
2. 沒有顯色或顯色太弱
1）適當(dāng)提高一抗或二抗的濃度,。檢測二抗效果，滴一滴稀釋二抗在離心管內(nèi),，檢測二抗是否被正常顯色,。
2）可以考慮使用更加靈敏的放大檢測體系，例如使用 素檢測體系,。
3）可以適當(dāng)延長顯色時間,。
4）如果上述改進不能獲得預(yù)期效果，可以考慮更換效果更好的一抗或ELISA試劑盒,。
