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——不將就,！快速PCR預(yù)混液

 研發(fā)背景

擴(kuò)增速度慢,，擴(kuò)增得率低,，陽性克隆易出現(xiàn)突變,？

此時(shí)你需要找到具有多種能力的PCR Mix

目前市場上PCR Mix種類繁多,，不同實(shí)驗(yàn)需要選擇不同PCR Mix,。使用時(shí)，經(jīng)常出現(xiàn)擴(kuò)增速度慢,、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物得率低,、克隆基因有突變或者擴(kuò)增效率低等等，給科研人員帶來了極大困擾,。為此,，翊圣生物研發(fā)團(tuán)隊(duì)在多年的工具酶研發(fā)經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，經(jīng)過多年研發(fā),，配制出了一款新型的PCR Mix——Hieff^TM PCR Master Mix,，它集快速、擴(kuò)增得率高,、長片段擴(kuò)增能力強(qiáng)和穩(wěn)定性強(qiáng)等能力于一體,，滿足您對(duì)PCR Mix的多種需求。

同時(shí),，翊圣生物具有的大規(guī)模的發(fā)酵系統(tǒng)和高通量的酶純化系統(tǒng),，保證了該PCR Mix具有zui小的批間差異,，保證為您提供大規(guī)模、高純度和批次穩(wěn)定的高品質(zhì)產(chǎn)品,。

產(chǎn)品描述

主動(dòng)出擊,，從根源解決問題

堿基錯(cuò)誤摻入是導(dǎo)致PCR意外延伸終止的罪魁禍?zhǔn)?/span>

Hieff^TM PCR Master Mix在傳統(tǒng)PCR Mix基礎(chǔ)上優(yōu)化配方，添加*的校正因子和延伸因子,，降低堿基錯(cuò)誤摻入率,，幫助Taq DNA聚合酶有效識(shí)別錯(cuò)誤插入堿基，并校正為正確堿基,；優(yōu)化鎂離子濃度,，dNTP濃度及添加PCR增強(qiáng)劑，實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增,。

產(chǎn)品圖片

快速,，長片段擴(kuò)增，*穩(wěn)定性,，

Hieff^TM PCR Master Mix完成基因鑒定及協(xié)助克隆

快    速：延伸速度達(dá)到15-30sec/kb,；

長片段擴(kuò)增：簡單模板10kb，復(fù)雜模板6kb,；

穩(wěn)定性強(qiáng)：4℃放置3個(gè)月，性能有保證,；

T載體克隆：PCR產(chǎn)物具有3’-dA突出端,；

高GC含量擴(kuò)增：已驗(yàn)證70% GC含量的DNA片段。

競品對(duì)比

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

① 行進(jìn)性提升,，擴(kuò)增能力高 —— 簡單模板10kb,，復(fù)雜模板6kb

圖1. *的擴(kuò)增能力

NC：模板陰性對(duì)照；退火溫度：60℃,；延伸時(shí)間：30sec/kb,。M：1kb ladder。

②. 緩沖體系優(yōu),，擴(kuò)增速度快 ——zui快可達(dá)15-30s/kb

圖2. 擴(kuò)增速度快

延伸速度15s/kb,，仍然可以有效擴(kuò)增。模板：擬南芥基因組,；退火溫度：60℃,；M：1kb ladder。

③. 模板結(jié)構(gòu)易被打開,，適合高GC模板的擴(kuò)增 ——已驗(yàn)證70% GC含量的DNA片段

圖3. 高GC含量基因可輕松擴(kuò)增

基因GC含量：泳道1-4分別為40%,、50%、60%和70%,。

泳道5-8為泳道1-4的模板陰性對(duì)照,。

模板：人293T細(xì)胞基因組,。退火溫度：60℃。

延伸速度：30s/kb,。M：1kb ladder,。

④. 含酶穩(wěn)定劑，穩(wěn)定性*——4℃ 3個(gè)月,，擴(kuò)增性能穩(wěn)定

圖4. *的穩(wěn)定性

產(chǎn)品分別在-20℃放置1年,，4℃放置3個(gè)月，25℃放置1個(gè)月,，均可有效擴(kuò)增目的片段,。

模板：擬南芥基因組。退火溫度：60℃,；延伸時(shí)間：30s,。M：1kb ladder。

匠心品質(zhì),，快樂科研

① 清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院：小鼠基因型鑒定

圖1. 2×Hieff^TM PCR Master Mix判定基因敲除小鼠基因型,。與同類品牌T產(chǎn)品在相同體系下擴(kuò)增目的基因，Hieff^TM Mix擴(kuò)增效率明顯較高,，結(jié)果更明確,。單一條帶（825bp）：野生型純合子；單一條帶（603bp）：基因敲除純合子,；兩個(gè)條帶：基因敲除雜合子,。模板：泳道1：野生型；2/5/6：雜合子,；3：純合子,；4：空白對(duì)照。 M：100bp DNA ladder,。

 ② 中國科學(xué)院植物研究所：菌落PCR鑒定

圖2. 2×Hieff^TM PCR Master Mix進(jìn)行菌落PCR,。在相同體系下擴(kuò)增目的基因（1500bp），與國外品牌Q同類產(chǎn)品相比,，Hieff^TM Mix表現(xiàn),，結(jié)果可靠。M：D2000 plus,。

 ③ 吉林大學(xué)：瘧原蟲轉(zhuǎn)基因株鑒定

圖3. 2×Hieff^TM PCR Master Mix進(jìn)行轉(zhuǎn)基因鑒定,。Hieff^TM Mix能較好地鑒定出轉(zhuǎn)基因蟲株（目的片段：550bp），結(jié)果可靠,。泳道1-8：同源重組后的瘧原蟲蟲株,；以瘧原蟲基因組為模板，NC：野生型瘧原蟲蟲株。M：DL1000 DNA marker,。

④ 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)玉米中心：玉米SSR分型分析

圖4. 2×Hieff^TM PCR Master Mix進(jìn)行玉米SSR分型分析,。Hieff^TM Mix可有效擴(kuò)增出100bp-800bp不同基因片段。擴(kuò)增效果好,，成功率高,。模板：玉米基因組DNA（100ng）。M：DNA markerⅠ,。

Hieff^TM PCR Master Mix已得到廣大用戶認(rèn)可——使用課題組超過500個(gè)

主要有：中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院植生生態(tài)研究所,，國家蛋白質(zhì)科學(xué)中心，清華大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,，中國科學(xué)院生物物理研究所生物大分子國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,，華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院中國水稻研究所,，中國科學(xué)院微生物所植物基因組學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,，上海植物逆境生物學(xué)研究中心，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所,，復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院,，昆明理工大學(xué)，中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所,，浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院,，武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,，中國科學(xué)院植物研究所,，中國科學(xué)院南京土壤研究所，中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,，武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室等超過五百個(gè)課題組

引用文獻(xiàn)舉例

【1】Zhou Z, He H, Ma L. Overexpression of a GmCnx1 gene enhanced activity of nitrate reductase and aldehyde oxidase, and boosted mosaic virus resistance in soybean. PLoS One. 2015 Apr 17;10(4):e0124273. doi: 10.1371/journal.pone.0124273. eCollection 2015.

實(shí)驗(yàn)應(yīng)用

普通基因克隆、菌落PCR鑒定,、基因型鑒定,、TA克隆等。

常見問題（Q&A）

Q1. 使用PCR Master Mix擴(kuò)增目的基因,，瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物時(shí),，為什么會(huì)出現(xiàn)涂抹帶？

A1：造成涂抹帶的原因有很多,，因PCR Master Mix預(yù)混有濃度優(yōu)化的Mg²⁺濃度（3mM）和Taq DNA聚合酶,，可著重從以下幾個(gè)方面考慮：污染、模板量過多,、引物特異性不高或退火溫度過低,、循環(huán)數(shù)過多、甚至模板GC含量過高等?？梢酝ㄟ^以下方法嘗試解決：設(shè)置陰性對(duì)照（NTC）確認(rèn)是否污染,；建立模板濃度梯度；提高退火溫度或進(jìn)行touch down PCR,；減少循環(huán)數(shù),。

Q2. 使用PCR Master Mix擴(kuò)增目的基因，瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物時(shí),，為什么無條帶,？

A2：PCR反應(yīng)成敗很大程度上依賴于高質(zhì)量的DNA模板，我們建議進(jìn)行陽性對(duì)照（引物已驗(yàn)證具備擴(kuò)增能力）,，排除模板對(duì)PCR反應(yīng)的抑制,。另外，建議優(yōu)化引物Tm溫度和增加延伸時(shí)間,。對(duì)于低豐度基因,，建議增加循環(huán)數(shù)。

Q3. 產(chǎn)品特異性如何,？

A3：大多數(shù)引物可直接使用55-60℃擴(kuò)增,，特異性良好。若出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增,，建議優(yōu)化引物退火溫度,。

擁有高品質(zhì)的同時(shí)保持低價(jià)位

關(guān)于我們

我們秉承“Good Science,Good Products”理念，用心做產(chǎn)品,。我們擁有來自*科創(chuàng)新研院所的研發(fā)人員,，組建有*的技術(shù)顧問團(tuán)隊(duì)，在豐富的經(jīng)驗(yàn)基礎(chǔ)上不斷創(chuàng)新,。翊圣生物具有健全的工具酶平臺(tái),，可大規(guī)模的進(jìn)行生產(chǎn)。

訂購信息

我們的回報(bào)——有買有送,，zui低至10元/支

 Hieff^TM PCR Master Mix (貨號(hào)：10102ES03/10103ES03),，單價(jià)30元/支，zui低至10元/支,。

活動(dòng)條款：

1. 活動(dòng)時(shí)間：2017.4.1-2017.6.30

2. 本活動(dòng)不與“整裝待發(fā) 翊起GO”活動(dòng)疊加參與,；

3. 本活動(dòng)zui終解釋權(quán)歸上海翊圣生物所有。

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