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——不將就,!快速PCR預混液
研發(fā)背景
擴增速度慢,,擴增得率低,,陽性克隆易出現(xiàn)突變,?
此時你需要找到具有多種能力的PCR Mix
目前市場上PCR Mix種類繁多,,不同實驗需要選擇不同PCR Mix,。使用時,經(jīng)常出現(xiàn)擴增速度慢,、PCR擴增產(chǎn)物得率低,、克隆基因有突變或者擴增效率低等等,給科研人員帶來了極大困擾,。為此,,翊圣生物研發(fā)團隊在多年的工具酶研發(fā)經(jīng)驗的基礎上,經(jīng)過多年研發(fā),配制出了一款新型的PCR Mix——HieffTM PCR Master Mix,,它集快速,、擴增得率高、長片段擴增能力強和穩(wěn)定性強等能力于一體,,滿足您對PCR Mix的多種需求,。
同時,翊圣生物具有的大規(guī)模的發(fā)酵系統(tǒng)和高通量的酶純化系統(tǒng),,保證了該PCR Mix具有zui小的批間差異,,保證為您提供大規(guī)模、高純度和批次穩(wěn)定的高品質(zhì)產(chǎn)品,。
產(chǎn)品描述
主動出擊,,從根源解決問題
堿基錯誤摻入是導致PCR意外延伸終止的罪魁禍首
HieffTM PCR Master Mix在傳統(tǒng)PCR Mix基礎上優(yōu)化配方,添加*的校正因子和延伸因子,,降低堿基錯誤摻入率,,幫助Taq DNA聚合酶有效識別錯誤插入堿基,并校正為正確堿基,;優(yōu)化鎂離子濃度,,dNTP濃度及添加PCR增強劑,實現(xiàn)擴增,。
產(chǎn)品圖片
快速,,長片段擴增,*穩(wěn)定性,,
HieffTM PCR Master Mix完成基因鑒定及協(xié)助克隆
快 速:延伸速度達到15-30sec/kb,;
長片段擴增:簡單模板10kb,復雜模板6kb,;
穩(wěn)定性強:4℃放置3個月,,性能有保證;
T載體克隆:PCR產(chǎn)物具有3’-dA突出端,;
高GC含量擴增:已驗證70% GC含量的DNA片段,。
競品對比
品牌 | 貨號 | 名稱 | 價格(50ul反應體系) | 擴增速度 | zui大擴增長度 | 穩(wěn)定性 | 克隆保真度 |
Yeasen | 10102 | 2×HieffTM PCR Master Mix | 0.75元/次 | 15-30sec/kb | 簡單模板10kb 復雜模板6kb | 4℃ 3個月 -20℃ 2年 | ★★ |
Tiangen | KT201 | 2×Taq Plus PCR Master Mix | 3.00元/次 | 60sec/kb | - | 4℃ 3個月 -20℃ 1年以上 | ★★ |
TAKARA | RR003A | Premix Taq™ DNA Polymerase (Ex Taq™ Version 2.0) | 1.91元/次 | 60sec/kb | 簡單模板20kb 復雜模板3kb | -20℃ | ★ |
Thermo | K0171 | PCR Master Mix (2×) | 3.205元/次 | 60sec/kb | 5kb | -20℃ | ★ |
NEB | M0270L | Taq 2× Master Mix | 5.098元/次 | 60sec/kb | 簡單模板5kb 復雜模板4kb | 4℃ 3個月 -20℃ | ★ |
Promega | M7502 | PCR Master Mix | 6.68元/次 | 60sec/kb | 2kb | 4℃ 3個月 -20℃ | ★ |
產(chǎn)品數(shù)據(jù)
① 行進性提升,擴增能力高 —— 簡單模板10kb,,復雜模板6kb
圖1. *的擴增能力
NC:模板陰性對照,;退火溫度:60℃;延伸時間:30sec/kb,。M:1kb ladder。
②. 緩沖體系優(yōu),,擴增速度快 ——zui快可達15-30s/kb
圖2. 擴增速度快
延伸速度15s/kb,,仍然可以有效擴增。模板:擬南芥基因組;退火溫度:60℃,;M:1kb ladder,。
③. 模板結構易被打開,適合高GC模板的擴增 ——已驗證70% GC含量的DNA片段
圖3. 高GC含量基因可輕松擴增
基因GC含量:泳道1-4分別為40%,、50%,、60%和70%。
泳道5-8為泳道1-4的模板陰性對照,。
模板:人293T細胞基因組,。退火溫度:60℃。
延伸速度:30s/kb,。M:1kb ladder,。
④. 含酶穩(wěn)定劑,穩(wěn)定性*——4℃ 3個月,,擴增性能穩(wěn)定
圖4. *的穩(wěn)定性
產(chǎn)品分別在-20℃放置1年,,4℃放置3個月,25℃放置1個月,,均可有效擴增目的片段,。
模板:擬南芥基因組。退火溫度:60℃,;延伸時間:30s,。M:1kb ladder。
匠心品質(zhì),,快樂科研
① 清華大學醫(yī)學院:小鼠基因型鑒定
圖1. 2×HieffTM PCR Master Mix判定基因敲除小鼠基因型,。與同類品牌T產(chǎn)品在相同體系下擴增目的基因,HieffTM Mix擴增效率明顯較高,,結果更明確,。單一條帶(825bp):野生型純合子;單一條帶(603bp):基因敲除純合子,;兩個條帶:基因敲除雜合子,。模板:泳道1:野生型;2/5/6:雜合子,;3:純合子,;4:空白對照。 M:100bp DNA ladder,。
② 中國科學院植物研究所:菌落PCR鑒定
圖2. 2×HieffTM PCR Master Mix進行菌落PCR,。在相同體系下擴增目的基因(1500bp),與國外品牌Q同類產(chǎn)品相比,,HieffTM Mix表現(xiàn),,結果可靠,。M:D2000 plus。
③ 吉林大學:瘧原蟲轉基因株鑒定
圖3. 2×HieffTM PCR Master Mix進行轉基因鑒定,。HieffTM Mix能較好地鑒定出轉基因蟲株(目的片段:550bp),,結果可靠。泳道1-8:同源重組后的瘧原蟲蟲株,;以瘧原蟲基因組為模板,,NC:野生型瘧原蟲蟲株。M:DL1000 DNA marker,。
④ 中國農(nóng)業(yè)大學玉米中心:玉米SSR分型分析
圖4. 2×HieffTM PCR Master Mix進行玉米SSR分型分析,。HieffTM Mix可有效擴增出100bp-800bp不同基因片段。擴增效果好,,成功率高,。模板:玉米基因組DNA(100ng)。M:DNA markerⅠ,。
HieffTM PCR Master Mix已得到廣大用戶認可——使用課題組超過500個
主要有:中國科學院上海生命科學研究院植生生態(tài)研究所,,國家蛋白質(zhì)科學中心,清華大學生命科學學院,,中國科學院生物物理研究所生物大分子國家重點實驗室,,華南農(nóng)業(yè)大學,中國農(nóng)業(yè)科學院中國水稻研究所,,中國科學院微生物所植物基因組學國家重點實驗室,,上海植物逆境生物學研究中心,中國農(nóng)業(yè)科學院上海獸醫(yī)研究所,,復旦大學附屬華山醫(yī)院,,昆明理工大學,中國科學院上海生命科學研究院生物化學與細胞生物學研究所,,浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院,,武漢大學基礎醫(yī)學院,南京農(nóng)業(yè)大學生命科學學院,,中國科學院植物研究所,,中國科學院南京土壤研究所,中山大學生命科學學院,,武漢大學病毒學國家重點實驗室等超過五百個課題組
引用文獻舉例
【1】Zhou Z, He H, Ma L. Overexpression of a GmCnx1 gene enhanced activity of nitrate reductase and aldehyde oxidase, and boosted mosaic virus resistance in soybean. PLoS One. 2015 Apr 17;10(4):e0124273. doi: 10.1371/journal.pone.0124273. eCollection 2015.
實驗應用
普通基因克隆,、菌落PCR鑒定、基因型鑒定,、TA克隆等,。
常見問題(Q&A)
Q1. 使用PCR Master Mix擴增目的基因,瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物時,,為什么會出現(xiàn)涂抹帶,?
A1:造成涂抹帶的原因有很多,,因PCR Master Mix預混有濃度優(yōu)化的Mg2+濃度(3mM)和Taq DNA聚合酶,可著重從以下幾個方面考慮:污染,、模板量過多、引物特異性不高或退火溫度過低,、循環(huán)數(shù)過多,、甚至模板GC含量過高等??梢酝ㄟ^以下方法嘗試解決:設置陰性對照(NTC)確認是否污染,;建立模板濃度梯度;提高退火溫度或進行touch down PCR,;減少循環(huán)數(shù),。
Q2. 使用PCR Master Mix擴增目的基因,瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物時,,為什么無條帶,?
A2:PCR反應成敗很大程度上依賴于高質(zhì)量的DNA模板,我們建議進行陽性對照(引物已驗證具備擴增能力),,排除模板對PCR反應的抑制,。另外,建議優(yōu)化引物Tm溫度和增加延伸時間,。對于低豐度基因,,建議增加循環(huán)數(shù)。
Q3. 產(chǎn)品特異性如何,?
A3:大多數(shù)引物可直接使用55-60℃擴增,,特異性良好。若出現(xiàn)非特異性擴增,,建議優(yōu)化引物退火溫度,。
擁有高品質(zhì)的同時保持低價位
關于我們
我們秉承“Good Science,Good Products”理念,用心做產(chǎn)品,。我們擁有來自*科創(chuàng)新研院所的研發(fā)人員,,組建有*的技術顧問團隊,在豐富的經(jīng)驗基礎上不斷創(chuàng)新,。翊圣生物具有健全的工具酶平臺,,可大規(guī)模的進行生產(chǎn)。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
2×HieffTM PCR Master Mix (With Dye) | 10102ES08 | 5ml | 150.00 |
2×HieffTM PCR Master Mix (No Dye) | 10103ES08 | 5ml | 150.00 |
我們的回報——有買有送,,zui低至10元/支
買/支 | 送/支 |
50 | 30 |
100 | 150 |
300 | 600 |
HieffTM PCR Master Mix (貨號:10102ES03/10103ES03),,單價30元/支,zui低至10元/支,。
活動條款:
1. 活動時間:2017.4.1-2017.6.30
2. 本活動不與“整裝待發(fā) 翊起GO”活動疊加參與,;
3. 本活動zui終解釋權歸上海翊圣生物所有,。
相關產(chǎn)品
進行PCR相關實驗,除了PCR Mix外,,你還可能用到這些產(chǎn)品,。
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
HieffTM Taq DNA Polymerase 常規(guī)DNA聚合酶 | 10101ES80 | 1000U | 109.00 |
10101ES90 | 5×1000U | 459.00 | |
HieffTM HotStart Taq DNA Polymerase 抗體法熱啟動Taq酶 | 10113ES60 | 100U | 216.00 |
10113ES76 | 500U | 656.00 | |
HieffTM Hot Start DNA Polymerase配體法熱啟動DNA聚合酶 | 10110ES72 | 250U | 186.00 |
10110ES80 | 4×250U | 636.00 | |
Hieff CloneTM Zero TOPO-TA Cloning Kit零背景TOPO-TA克隆試劑盒 | 10907ES20 | 20T | 528.00 |
10907ES60 | 5×20T | 2378.00 | |
Hieff CloneTM Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted 零背景TOPO-TA克隆試劑盒(不含MCS多克隆酶切位點) | 10908ES20 | 20T | 528.00 |
10908ES60 | 5×20T | 2378.00 |