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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·13年您現(xiàn)在的位置： 首頁> 公司動(dòng)態(tài)> 無需純化DNA的多樣本直接PCR
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——無需基因組純化,，一步完成基因型鑒定
背景
動(dòng)物基因型鑒定或植物基因型分型等實(shí)驗(yàn),，經(jīng)常需要通過抽提純化基因組DNA,，以備后續(xù)進(jìn)行PCR擴(kuò)增目
的基因進(jìn)而判定基因型,。當(dāng)大規(guī)模批量化進(jìn)行多樣本基因型鑒定分析時(shí),，抽提基因組的步驟不但費(fèi)時(shí)費(fèi)力,，而
且大大增加實(shí)驗(yàn)成本,。
產(chǎn)品介紹
翊圣生物開發(fā)出*的蛋白酶裂解緩沖體系，可zui大程度地釋放不同來源類型樣品的基因組DNA,。通過改
造DNA聚合酶,，優(yōu)化PCR反應(yīng)體系，大大地提升了DNA聚合酶對(duì)PCR抑制物的抵抗力,?；诖耍词ド镩_發(fā)
出的直接PCR試劑盒系列產(chǎn)品,，可快速的進(jìn)行PCR反應(yīng),。
翊圣主要提供4類Direct PCR Kit，包括動(dòng)物直接PCR試劑盒,、小鼠直接PCR試劑盒,、植物直接PCR試劑盒
和血液直接PCR試劑盒。
工作原理
產(chǎn)品優(yōu)勢
★樣品需求量小 —— 少到5mg動(dòng)物組織,、1mg植物葉片即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。
★操作簡便 —— 使用*的蛋白酶裂解體系,，無需研磨、破碎等特殊處理,，操作簡便,。
★處理快速 —— 20min快速釋放質(zhì)量穩(wěn)定的基因組DNA。
★粗制樣品PCR —— 無需進(jìn)行費(fèi)時(shí)而昂貴的DNA純化,。
★擴(kuò)增性能強(qiáng) —— 優(yōu)化的PCR體系,，使PCR具有更高的特異性、更強(qiáng)的PCR反應(yīng)抑制物耐受性,。
產(chǎn)品應(yīng)用
植物基因型分型,、動(dòng)物基因型鑒定、血液中微生物鑒定等,。
產(chǎn)品選擇指南
產(chǎn)品特點(diǎn) | Animal Tissue Direct PCR Kit
動(dòng)物組織直接PCR試劑盒 | Mouse Tissue Direct PCR Kit
小鼠組織直接PCR試劑盒 | Plant Tissue Direct PCR kit
植物組織直接PCR試劑盒 | Animal Blood Dicrect PCR Kit
全血直接PCR試劑盒 |
適用生物類型 |
小鼠、兔子,、鳥類,、淡水魚 | 小鼠、大鼠 |
水稻,、玉米,、煙草、油菜,、小麥,、大豆等多糖多酚含量低的植物 |
人血、鼠血,、雞血,、鳥血、牛血,、狗血 |
適用組織類型/材料類型 |
腦,、心臟、肝臟,、胰臟,、腎臟、脾臟,、睪丸,、肌肉、羽毛末端 |
鼠尾,、鼠耳,、腳趾（帶肌肉）和其他臟器 |
葉片、幼苗 |
EDTA,、Heparin 抗凝全血,、血液的采集卡,、冷凍血和抗凝血等 |
使用量（范圍） |
5-10mg |
5-10mg |
3-5mg（5-7mm） |
人血2-45%；鼠血2-20%,；采集卡1-4mm |
裂解方式 |
蛋白酶裂解 |
無需裂解 | ||
裂解時(shí)間 |
65℃,，10-30min |
65℃，10-30min |
95℃,，10min | - |
裂解液保存時(shí)間 |
4℃,，2天；-20℃,，10-20天 | - | ||
PCR產(chǎn)物zui適長度 |
＜1kb |
＜1kb |
＜1kb |
＜1kb |
PCR產(chǎn)物是否加A |
裂解反應(yīng)體系加A效率不定 | |||
50µL PCR反應(yīng)體系中裂解產(chǎn)物使用量 |
0.5-5µL,，不可超過10µL |
0.5-5µL，不可超過10µL |
5-10µL,，不可超過15µL |
人血2-45%,；鼠血2-20%；采集卡1-4mm |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
FAQ
常見問題 |
可能原因 |
解決方法 |
陽性對(duì)照,、待測樣本均無條帶,。 |
PCR反應(yīng)體系或反應(yīng)條件不合適。 |
使用梯度PCR摸索PCR*反應(yīng)條件,。 |
PCR試劑保存不當(dāng)失去活性,。 |
2× PCR Mix應(yīng)保存于-20℃，使用時(shí)避免反復(fù)凍融,。若使用頻繁,，可在4℃短時(shí)間存放。 | |
引物設(shè)計(jì)問題,。 |
嘗試重新設(shè)計(jì)引物進(jìn)行檢查,。 | |
陽性對(duì)照有目的條帶，待測樣本無條帶或條帶弱,。 |
不當(dāng)儲(chǔ)存或長期儲(chǔ)存引起試劑活性喪失,。 |
使用新鮮的試劑。 |
加入組織裂解液過量,。 |
增大反應(yīng)體系,，或減少裂解液的用量。 | |
樣本裂解混合液保存不當(dāng)或保存時(shí)間過久,，DNA基因組已經(jīng)降解,。 |
裂解混合液液可在4℃保存2-3天，盡量使用新制備的裂解液混合液進(jìn)行PCR,。 | |
模板加入量不適合,。 |
在反應(yīng)體系10-20%范圍內(nèi)優(yōu)化模板加入量。反應(yīng)效性能較差時(shí)，可以降模板濃度調(diào)節(jié)到低于10%的范圍,。 | |
PCR循環(huán)數(shù)不足,。 |
增加PCR的循環(huán)數(shù)，推薦在35-40循環(huán)為佳,。因?yàn)槟０鍙?fù)雜,，PCR反應(yīng)要比用純化的DNA模板多5-10個(gè)循環(huán)為佳。 | |
非特異性擴(kuò)增 |
PCR退火溫度太低,，循環(huán)數(shù),、引物濃度或模板濃度太高。 |
增加PCR退火溫度,，降低PCR循環(huán)數(shù),、引物濃度或模板濃度。 |
PCR引物錯(cuò)配,。 |
重新設(shè)計(jì)PCR引物,。 | |
配制PCR反應(yīng)體系時(shí)溫度太高或配制完成后放置時(shí)間太久。 |
PCR反應(yīng)體系的配制在低溫下進(jìn)行,，配制完成后盡快進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng),。 | |
陰性對(duì)照出現(xiàn)目的條帶 |
操作工具或試劑污染。 |
實(shí)驗(yàn)所有試劑或器材均應(yīng)高壓滅菌,。操作時(shí)應(yīng)小心輕柔，防止將靶序列吸入加樣槍內(nèi)或?yàn)R出離心管外,。 |
樣本間交叉污染,。 |
每個(gè)取樣器只對(duì)一個(gè)樣本使用；或取完一個(gè)樣本后,，將取樣器刃口浸入2%的次氯酸鈉溶液中,，反復(fù)涮洗，然后用干凈的紙巾擦干殘液,。 |
訂購信息
產(chǎn)品貨號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
價(jià)格（元） |
10180ES50 | Animal Tissue Direct PCR Kit 動(dòng)物組織直接PCR試劑盒 |
50T |
326.00 |
10180ES70 |
200T |
1236.00 | |
10181ES50 |
Mouse Tissue Direct PCR Kit 小鼠組織直接PCR試劑盒 |
50T |
326.00 |
10181ES70 |
200T |
1236.00 | |
10182ES50 |
Animal Blood Direct PCR Kit 全血直接PCR試劑盒 |
50T |
326.00 |
10182ES70 |
200T |
1236.00 | |
10183ES50 |
Plant Tissue PCR Kit 植物組織直接PCR試劑盒 |
50T |
326.00 |
10183ES70 |
200T |
1236.00 |
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產(chǎn)品貨號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
價(jià)格（元） |
10102ES03 |
2×HieffTM PCR Master Mix (With Dye) |
1mL |
40.00 |
10102ES08 |
5×1mL |
150.00 |
