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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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Hieff CloneTM技術(shù)是一種簡(jiǎn)單,、快速并且的DNA定向克隆技術(shù),，可將插入片段PCR產(chǎn)物定向克隆至任意載體的任意位點(diǎn)，是一種非連接依賴型的快速克隆技術(shù),，可以實(shí)現(xiàn)1-5個(gè)插入片段的順序拼接,。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
克隆效率高：可有效克隆50 bp-10 kbp DNA ,，陽性率高達(dá)95%以上。
操作簡(jiǎn)單,、快速：只需加樣孵育30min即可實(shí)現(xiàn)重組,，轉(zhuǎn)化完成克隆,；
適用范圍廣：適用于任何載體,，適用于多種感受態(tài)細(xì)胞；
非連接酶依賴性：無需考慮插入片段自身攜帶的酶切位點(diǎn),；PCR產(chǎn)物無需酶切,，不依賴于連接酶等繁瑣操作；線性載體和PCR產(chǎn)物可不進(jìn)行純化直接進(jìn)行克隆,。
可用于DNA定點(diǎn)突變,。
實(shí)驗(yàn)原理及流程
圖1 Hieff CloneTM One Step Cloning Kit流程示意圖：插入片段PCR擴(kuò)增時(shí)，引物5’端引入線性化克隆載體末端同源序列 (圖中以藍(lán)色和橙色標(biāo)記),，使得擴(kuò)增產(chǎn)物5’和3’zui末端序列分別和線性化克隆載體兩末端序列*一致,。
圖2 Hieff CloneTM Multi One Step Cloning Kit流程示意圖：插入片段PCR擴(kuò)增時(shí)，引物5’端添加同源重組序列 (圖中以藍(lán)色,、紫色,、茶色和橙色標(biāo)記)，使得擴(kuò)增產(chǎn)物之間以及擴(kuò)增產(chǎn)物與線性化克隆載體之間都具有能夠相互同源重組的一致序,。
訂購信息：
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 插入片段數(shù) | *（元） |
Hieff CloneTM One Step Cloning Kit一步法克隆試劑盒
| 10905ES25 | 25T | 1 | 432 |
10905ES62 | 5×25T | 1944 | ||
Hieff CloneTM Multi Step Cloning Kit多片段一步法克隆試劑盒 | 10906ES10 | 10T | 1-5 | 400 |
10906ES50 | 5×10T | 1800 |
