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淋巴細(xì)胞分離液
LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM
LSM的優(yōu)勢(shì):
傳統(tǒng)的組合是Ficoll+泛影酸葡甲胺(甲泛影鈉),。Yeasen公司的LSM主要成分是Ficoll (聚蔗糖)和sodium diatrizoate (泛影酸鈉,密度1.200±0.002g/ml),每100ml包含6.2g聚蔗糖和9.4g泛影酸鈉,。目前為止,,這個(gè)組合是淋巴細(xì)胞分離液成分使用zui廣泛,、分離效果的組合,。
與LSM競(jìng)爭(zhēng)zui大的產(chǎn)品主要是:GE公司的Ficoll-Paque PREMIUM,,其特點(diǎn)如下:
LSM與Ficoll-Paque的比較
參數(shù) | Yeasen LSM | GE Ficoll-Paque |
主要成分 | Ficoll+sodium diatrizoate | Ficoll+sodium diatrizoate |
密度 | 20℃ ,,1.07700.1-1.0800 g/ml | 4-30℃,,1.077±0.001g/ml |
內(nèi)毒素 | ~0.060 EU/ml | <0.12EU/ml |
應(yīng)用 | 人外周血單個(gè)核細(xì)胞分離,,也適用于其他物種或其他組織如骨髓、臍帶血細(xì)胞的分離* | 人外周血單個(gè)核細(xì)胞分離,,也適用于從其他來(lái)源如骨髓,、臍帶血分離。 |
單個(gè)核細(xì)胞的回收率及活力 | 分離/ 回收率:>90%,,>95%(通常) 活力:>90%(通常),,超過(guò)3-5天后檢測(cè)>75% | 分離/ 回收率:>90% 活力:>90%有活力的細(xì)胞 |
其他細(xì)胞 | 多形核細(xì)胞≤3% 紅細(xì)胞≤7% | 粒細(xì)胞≤5% 紅細(xì)胞≤10% |
即用型 | 是,無(wú)菌 | 是,,無(wú)菌 |
保存 | 室溫(18-25℃),,避光 | 4-30℃,避光 |
“*”:據(jù)資料顯示該公司的淋巴細(xì)胞分離液(LSM)已經(jīng)用于除人以外的其他物種如大小鼠,、恒河猴等,。
據(jù)我公司的客戶(hù)反饋顯示LSM也成功用于以下物種:豬、小鼠外周血淋巴細(xì)胞的分離,。
“*”:可參考以下文獻(xiàn)
1)Boumsell,I. Differntial response of monocytes and macrophages". J. Immunol. 115, 1746, 1975.
2)Dvorak, H.F., " Fibrinogen/fibrin on the surface of macrophages : detection distribution, binding requirements and possible role in macrophage of adherence phenomena" J. Experimental Medicine 142, 1377, 1975.
3)J.S.m McCoy, J.L., Leonard, C.M., Cannon, G.B. and Herberman, R.B., " Functional activities of rosette separated human peripheral blood leukocytes". J. Immunol. 115, 1449, 1975.
4)Immunodiagnosis, 2nd Edition ed. N.Rose and P. Bigazzi, John Wiley & Sons, Inc., New York, pp. 15-25, 1980.
5)D.A., and Leonard, E.J., " Chemotactic responses of normal human basophils to C and to lymphocyte-derived chemotactic factor." J. Immunol. 117, 246, 1976.
6)spontaneous migration of human polymorphonuclear leukocytes and monocytes". J.Immunol. 115, 1650, 1975.
7)W.C. and Rabin, H., " Inhibition of mitogenic response of normal peripheral lymphocytes by extracts or supernatant fluids of a herpesvirus saimiri lymphoid tumor cell line". Infection & Immunity 12(5), 1021, 1975.
8)J.S. and Hanna, Jr., M.G., " Separation of guinea pig peripheral blood lymphocytes by discontinuous density, gradient centrifugation using Ficoll-Metrizoate." J. Immunol. Meth. 41, 29, 1981.
9)R.C., Kaattari, S., Leung, C. and Benjamini, E., " Immune plasma-dependent cytotoxicity of immune and non-immune peripheral lymphoid cells for target cells coated with bacterial outer unit membrane". Immunology 29, 1093, 1975.
10)Henney, C.S., " Antibody dependent cytolytically active human leukoctyes : an analysis of inactivation following in vitro interaction with antibody-coated target cells". J. Immuno. 115, 1500, 1975.
使用說(shuō)明(用于去纖維蛋白或抗凝血?jiǎng)┨幚磉^(guò)的人體血液,;對(duì)于其他物種或者其他組織的血液,需要對(duì)此程序做出一定的改進(jìn))
1. 輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合
2. 無(wú)菌轉(zhuǎn)移3 mlLSM到15 ml離心管中,。
3. 混合2 ml除纖維蛋白血液或肝素處理血液 和2 ml 生理鹽水
4. 仔細(xì)的將稀釋血液加入3 mlLSM(室溫)于15ml離心管中,,在血液和LSM中形成一個(gè)明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中,。
5. 室溫下400g離心15-30分鐘,,離心可以沉淀紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞同時(shí)可以再LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞,如下圖所示,。
6. 吸出淋巴細(xì)胞上方2-3mm的血漿,。
7. 吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM和轉(zhuǎn)移到另外的一個(gè)離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至淋巴細(xì)胞離心管中,,室溫離心10分鐘,,離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞即刻,例如160 - 260 x g(去除LSM和降低血小板的百分比),。
8. 用平衡鹽緩沖液清洗細(xì)胞,,用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細(xì)胞。
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相關(guān)產(chǎn)品
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
40504ES60 | Lymphocyte Separation Medium 1.084 淋巴細(xì)胞分離液1.084 | 100ml | 450.00 |