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在生命科學(xué)的浩瀚星河中，生物科研工作者們不斷開拓技術(shù),，推動著生物領(lǐng)域的邊界向外拓展,，克隆技術(shù)如同一座璀璨的燈塔，照亮了基因探索的未知之旅,。而已經(jīng)10周歲的小翌,，也通過克隆技術(shù)陪伴在大家身邊多年~
用戶反饋一
問：傳統(tǒng)酶切酶連要花好久的時間,，光是載體、片段酶切都要花上1-2個小時,，還要純化片段,，T4 DNA連接酶的連接甚至需要過夜，能不能有一款試劑省去這些步驟呀,？
小翌：不用擔(dān)心,，小翌這里有一款產(chǎn)品，Hieff Clone®系列克隆試劑盒僅需一步就能幫您連接上載體和片段,，單片段的連接時間快至5分鐘,，大幅度節(jié)省您的科研時間！
用戶反饋二
問：現(xiàn)在實驗室都是送樣測序,，可是平板上的菌落數(shù)長得太少,，無法確定一次連接成功，而送一次平板測序價格又很高,，重新送測又好麻煩,，要怎么辦？
小翌：Hieff Clone®系列克隆試劑盒的載體,、片段連接陽性率可達(dá)95%以上,，克隆數(shù)多，一次送樣檢測成功率極大提升,！
圖1. 兩片段（3 kb）連接。結(jié)果顯示,，10923ES菌落數(shù)多,，陽性率100%。A：重組轉(zhuǎn)化平板,。載體（11.6 kb）和插入片段（3 kb）摩爾比為1:2,。B：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：Yeasen 10505ES,。
用戶反饋三
問：糟糕,！我的實驗樣本太珍貴，是老師去野外采集時好不容易取回的,，提取的DNA片段只有10 μL（5 ng）,，連接體系20 μL，至少需要添加60 ng才能連上載體,，可是DNA片段還想保留一些,，能減少片段投入量或者縮小連接體系嗎？
小翌：可以的,，新款克隆試劑盒（Cat#10923ES）連接總體系可低6 μL,，載體,、片段投入量低，可以充分滿足您的需求,，為您節(jié)省珍貴的樣本,！
6 μL小體系單片段連接
圖2. 在6 μL小體系非復(fù)蘇感受態(tài)下，連接10 ng低投入量單片段,。結(jié)果顯示,，10923ES性能好于競品，連接效率高,，菌落數(shù)多,，陽性率達(dá)100%。A-B：重組轉(zhuǎn)化平板,。載體（10 kb）和插入片段（1 kb）摩爾比為1:2,。C：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：Yeasen 10505ES,。
超小體系三片段連接
圖3. 10923ES超小體系連接三片段,，連接效率，陽性率達(dá)100%,。3 μL總體系連接,，10923ES的投入量可低至2 μL。A&C&E：25 ng載體（11.6 kb）+各10 ng片段（1 kb+1.6 kb+1.8 kb）,。B&D&F：插入片段PCR鑒定電泳圖,。
低濃度多片段高效重組
圖4. 分別連接低濃度的五片段和六片段。結(jié)果顯示,，10923ES在低濃度下連接性能穩(wěn)定,，菌落數(shù)多，陽性率100%,。A-B：重組轉(zhuǎn)化平板,。載體（11.6 kb）和插入片段（5片段共5.6 kb、六片段共7.6 kb）摩爾比為1:2,。C-D：插入片段PCR鑒定電泳圖,，M：Yeasen 10505ES，菌P長度2.6 kb,。
用戶反饋四
問：我要構(gòu)建一個新的載體,，載體上需要含有6個外源基因片段，可是一次最多連上1-2個片段,，每次都得重新設(shè)計同源臂,、連接、轉(zhuǎn)化、挑菌,、篩選,，這一些系列操作至少要一周，就不能一次連上6個片段嗎,？
小翌：收到,！小翌最新研發(fā)的克隆試劑盒可以一次性連接6個片段到載體上，連接時間縮短至50 min,，為您解決煩憂,！
圖5. 六片段（7.6 kb）連接。結(jié)果顯示,，10923ES產(chǎn)品性能好于競品,，菌落數(shù)多，陽性率100%,。A-B：重組轉(zhuǎn)化平板,。載體（11.6 kb）和插入片段（7.6 kb）摩爾比為1:2。C：插入片段PCR鑒定電泳圖,，M：Yeasen 10505ES,，菌P長度2.6 kb。
試劑盒穩(wěn)定性好
圖6. 在37℃條件下放置7天,，結(jié)果顯示,，10923ES在低濃度下依舊穩(wěn)定連接六片段。D-F：重組轉(zhuǎn)化平板,。載體（11.6 kb）和插入片段（六片段共7.6 kb）摩爾比為1:2,。H：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：Yeasen 10505ES,，菌P長度2.6 kb,。
客戶體驗反饋
圖7. 10 μL小體系單片段連接和點突變克隆，10923ES陽性率達(dá)100%,。A&C：重組轉(zhuǎn)化平板。B：插入片段PCR鑒定電泳圖,，泳道1-5分別為菌落1,，菌落2，陰性對照,，陽性對照（基因組作為模版）,，陽性對照（PCR純化片段作為模版）。D：插入片段PCR鑒定電泳圖,。
以上就是這么多年來,，小翌接收到的真實反饋，面對用戶的各種問題,，翌圣研發(fā)人員努力鉆研,，通過內(nèi)部的雙向分子酶理性設(shè)計與定向進(jìn)化平臺,，不斷設(shè)計、優(yōu)化克隆試劑盒中的核心重組酶,，并添加 的重組增強(qiáng)因子,，抑制非同源末端連接，在保證克隆陽性率達(dá)到95%以上的同時,，還能夠又快又好的完成實驗,，助力發(fā)表高分文章。
在此基礎(chǔ)上,，第三屆翌圣生物杯“克隆王"挑戰(zhàn)賽也即將拉開序幕,，它不僅是對過往成果的一次集中展示，更是面向未來,、促進(jìn)技術(shù)交流與創(chuàng)新的嶄新起點,。小翌誠邀每一位科研追夢人共同參與，通過克隆試劑盒,，展現(xiàn)你們的克隆藝術(shù),，希望通過這場比賽，為大家搭建起一座溝通的橋梁,，促進(jìn)克隆技術(shù)的深度交流與智慧碰撞,，攜手在這條基因奧秘的發(fā)現(xiàn)之旅上貢獻(xiàn)自身力量！
小翌溫馨提示：2024年5月9日前,，掃描下方二維碼填寫報名信息,，可獲得5分附加分，先報先得哦~
【克隆王挑戰(zhàn)賽預(yù)報名碼】
通用型-明星產(chǎn)品推薦
產(chǎn)品分類 | 產(chǎn)品定位 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 | 規(guī)格 |
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TOPO克隆試劑盒 | 兼容TA/平末端克隆 | Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit | 10906ES08/20 | 5 T/20 T |
