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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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生物酶是在生物體內(nèi)發(fā)揮催化作用的生物分子,，能促使生化反應(yīng)更迅速進(jìn)行,，而自身不被消耗或改變。因其?效專?,、反應(yīng)條件溫和,、對(duì)環(huán)境友好等優(yōu)勢(shì)，在生物醫(yī)藥,、體外診斷,、合成生物、綠色生物催化,、醫(yī)美,、食品、能源等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用,。
隨著人們對(duì)生物酶應(yīng)用研究的深入和拓展,，對(duì)酶的種類和性能提出了更高的要求。然而,，自然界或市售的生物酶有時(shí)難以滿足研究需求,，酶應(yīng)用研究領(lǐng)域面臨著“無酶可用"、酶性能“不足"等問題亟待解決,。
小翌為大家準(zhǔn)備好了性價(jià)比的幾款無動(dòng)物源性蛋白酶，為胰島素生產(chǎn)等生物制藥領(lǐng)域提供助力：
重組胰蛋白酶
胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶,，可特異切割賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵,。重組胰蛋白酶多用大腸桿菌或酵母系統(tǒng)重組表達(dá)并經(jīng)過多步層析純化獲得，無糜蛋白酶等雜酶污染,。重組胰蛋白酶與天然提取的胰蛋白酶相比具有相同的特性,，其氨基酸序列與豬源胰蛋白酶序列同源,。因其無動(dòng)物源污染性和純度高，在醫(yī)藥開發(fā),、生化研究,、蛋白組學(xué)等領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用。
翌圣目前可提供2款重組胰蛋白酶,，分別為藥典級(jí)（Cat#40512ES）,、質(zhì)譜級(jí)（Cat#20416ES）
藥典級(jí)：大腸桿菌表達(dá)的重組胰蛋白酶，氨基酸序列與豬胰腺來源的胰蛋白酶一致,，生產(chǎn)過程不使用任何動(dòng)物源原料,，無外源性的病毒污染，可替代豬胰腺來源胰蛋白酶應(yīng)用于各種生物技術(shù)過程中,，如：細(xì)胞培養(yǎng),、細(xì)胞發(fā)酵、蛋白質(zhì)的酶解或各種組織的細(xì)胞分離等,。本產(chǎn)品純度高,、不含雜酶、宿主蛋白和 DNA 殘留量符合藥典標(biāo)準(zhǔn),，避免了雜質(zhì)對(duì)細(xì)胞生長的影響,，最適pH為7.0-9.0，pH為2±0.5,。
質(zhì)譜級(jí)：畢赤酵母表達(dá)的重組豬胰蛋白酶,，在GMP法規(guī)下生產(chǎn)，不含任何動(dòng)物源成分,，無動(dòng)物源性的病毒污染,，天然缺乏糜蛋白酶活性，并已過濾除菌,。胰蛋白酶活性以國際通用活性（USP）為準(zhǔn),，優(yōu)于進(jìn)口同類產(chǎn)品，其中β-Trypsin的HPLC含量可達(dá)80%以上,，儲(chǔ)存穩(wěn)定性高,，蛋白質(zhì)組學(xué)酶解漏切率比進(jìn)口產(chǎn)品低50%?？商娲鹊鞍酌甘褂?，且有很多優(yōu)勢(shì)，如無雜酶活性,，高穩(wěn)定性,，高活性；胰蛋白酶容易自切產(chǎn)生自身自切片段影響質(zhì)譜分析結(jié)果,，而重組胰蛋白酶（質(zhì)譜級(jí)）通過甲基化修飾和突變保證其不自切,，尤其適用于蛋白組學(xué)領(lǐng)域,，如蛋白質(zhì)質(zhì)譜、測(cè)序,、肽圖譜分析,。
羧肽酶B又稱肽酰-L-賴氨酸（L-賴氨酸）水解酶、精蛋白酶,，專一水解蛋白質(zhì)C-末端堿性氨基酸（賴氨酸,、精氨酸、組氨酸）的氨基端,；分子量為33.8 kD,，等電點(diǎn)為6.0，最適pH為7.5-9.0,。羧肽酶B的活性受精氨酸,、賴氨酸的競(jìng)爭(zhēng)性抑制，金屬離子螯合劑如EDTA等抑制酶活,。
翌圣重組羧肽酶B采用大腸桿菌表達(dá),，在GMP法規(guī)下生產(chǎn)，不含任何動(dòng)物源成分,，無動(dòng)物源性的病毒污染,，氨基酸序列與大鼠胰腺羧肽酶B一致，具有與動(dòng)物源性羧肽酶B相同的酶學(xué)性質(zhì),，可替代動(dòng)物源性羧肽酶 B用于各種生物技術(shù)過程中, 如重組胰島素及其類似物的生產(chǎn),、蛋白質(zhì)C-末端氨基酸的測(cè)定、蛋白質(zhì)C-末端組氨酸標(biāo)簽的去除,、其他重組多肽類物質(zhì)的生產(chǎn),、某些特殊化合物的酶促合成。
雙堿性內(nèi)切酶又稱為Kex2蛋白酶,、YSCF蛋白酶,，在酵母體內(nèi)Kex2蛋白酶負(fù)責(zé)加工killer toxin和α-factor的前體，是一種鈣離子依賴型的絲氨酸蛋白酶,，能特異性識(shí)別和切割A(yù)rg-Arg,、Lys-Arg等雙堿性氨基酸羧基端肽鍵。與胰蛋白酶（識(shí)別一個(gè)氨基酸殘基,，對(duì)于目的蛋白序列的限制性較強(qiáng),，且可能產(chǎn)生錯(cuò)切等問題）不同，Kex2不能識(shí)別和切割單一堿性氨基酸即精氨酸或賴氨酸的羧基端肽鍵,，所以Kex2這類識(shí)別數(shù)個(gè)氨基酸殘基,、特異性較高的酶的生產(chǎn)制備對(duì)酶切的正確性尤為重要。并且Kex2蛋白酶活性不受常規(guī)的絲氨酸蛋白酶抑制劑如抑肽酶,、PMSF,、TPCK所抑制。
翌圣重組Kex2蛋白酶是由畢赤酵母表達(dá),，在GMP法規(guī)下生產(chǎn),，不含任何動(dòng)物源成分，無動(dòng)物源性的病毒污染,，與天然的釀酒酵母Kex2酶具有相同的酶特異性,。最適作用pH為pH9.0，穩(wěn)定儲(chǔ)存的pH為5.0-6.0,。生物制藥領(lǐng)域常用Kex2蛋白酶聯(lián)合羧肽酶B用于重組胰島素及其類似物,、GLP-1、重組多肽的生產(chǎn)制備,，還可用于蛋白質(zhì)的酶解和肽圖分析,、測(cè)序及融合標(biāo)簽的切割等。
選購指南
貨號(hào) | 40512ES | 20416ES | 20417ES | 20418ES |
產(chǎn)品名稱 | 重組胰蛋白酶 （粉末）
| 重組胰蛋白酶 （質(zhì)譜級(jí)）
| 重組羧肽酶B | 重組雙堿性內(nèi)切酶 |
來源 | 大腸桿菌 | 畢赤酵母 | 大腸桿菌 | 畢赤酵母 |
性狀 | 白色或類白色結(jié)晶性粉末 | 無色至淡黃色,，澄清液體 | 白色,、類白色、類黃色粉末 | 白色,、類白色粉末 |
純度 | β-trypsin≥70% α-trypsin≤20% | β-trypsin＞80% α-trypsin＜20%
| 單一主條帶 | 單一主條帶 |
比活性 | ≥3800 USP units/mg 蛋白 | >6800 USP Unit/mg 蛋白
| ≥170 USP units/mg 蛋白 | ≥10.0 units/mg 蛋白 |
切割位點(diǎn) | 特異切割賴氨酸或者精氨酸殘基中的羧基端肽鍵 | 特異切割賴氨酸或者精氨酸殘基中的羧基端肽鍵 | 專一水解蛋白質(zhì)C-末端堿性氨基酸（賴氨酸,、精氨酸）的氨基端 | 特異性識(shí)別和切割A(yù)rg-Arg、Lys-Arg等雙堿性氨基酸羧基端肽鍵 |
應(yīng)用 | 可替代豬胰腺來源胰蛋白酶應(yīng)用于各種生物技術(shù)過程中,，如：細(xì)胞培養(yǎng),、細(xì)胞發(fā)酵、蛋白質(zhì)的酶解或各種組織的細(xì)胞分離等,。 重組蛋白方面： 1. 重組胰島素生產(chǎn),；
| 可替代重組胰蛋白酶使用，且純度更高,、活性更好,。其不自切的特性，尤其適用于蛋白質(zhì)分析,，如蛋白質(zhì)質(zhì)譜,、測(cè)序、肽圖譜分析,。 | 1. 重組胰島素及其類似物的生產(chǎn),。 2. 蛋白質(zhì)C-末端氨基酸的測(cè)定。 3. 蛋白質(zhì)C-末端組氨酸標(biāo)簽的去除,。 4. 其他重組多肽類物質(zhì)的生產(chǎn),。 5. 某些特殊化合物的酶促合成
| 1. 重組胰島素及其類似物的前體加工 2. 多肽藥物生產(chǎn)中的的工藝酶切 3. 生物研究：蛋白質(zhì)的酶解和肽圖分析、測(cè)序等,。 4. 可用于融合標(biāo)簽的切割 |
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
質(zhì)量高：純度高,，比活高,，宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求；
無動(dòng)物源性：重組生產(chǎn),，生產(chǎn)過程不使用任何動(dòng)物源原料,，無外源性病毒污染；
GMP生產(chǎn)：可提供GMP級(jí)別產(chǎn)品,；
供應(yīng)穩(wěn)定：批量生產(chǎn),，可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn)；產(chǎn)品批次間無差異,，質(zhì)量穩(wěn)定,；
多形式供貨：可供應(yīng)液體和凍干粉2種形式，液體裝方便使用,，凍干粉方便運(yùn)輸和儲(chǔ)存,。
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 目錄價(jià)/元 |
PerfCell™ Recombinant Trypsin（powder） 重組胰蛋白酶（粉末） | 40512ES10/60/80 | 10 mg/100 mg /1 g | 328/2298/16188 |
Recombinant Trypsin（MS-SAFE） 重組胰蛋白酶（質(zhì)譜級(jí)） | 20416ES60 | 100 µg | 595 |
Carboxypeptidase B, Recombinant, Expressed in E.coli 大腸桿菌表達(dá)重組羧肽酶B | 20417ES03/10 | 1 mg/10 mg | 735/2285 |
Paired-basic endopeptidase, Recombinant, Expressed in Yeast 酵母表達(dá)重組雙堿性內(nèi)切酶 | 20418ES60 | 100 µg | 1945 |
