聯(lián)系電話
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會員·13年
- 聯(lián)系人：
- 曹女士
- 電話：
- 400-6111-883
- 手機(jī)：
- 售后：
- 4006-111-883
- 傳真：
- 86-21-34615995
- 地址：
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
- 網(wǎng)址：
- www.yeasen.com
掃一掃訪問手機(jī)商鋪
精品推薦 | 從RNA到cDNA-翌圣5分鐘反轉(zhuǎn)錄系列產(chǎn)品快速出圈,！
反轉(zhuǎn)錄是將RNA轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)DNA (cDNA) 的過程，該反應(yīng)由反轉(zhuǎn)錄酶介導(dǎo)完成,。在有退火引物的情況下,，反轉(zhuǎn)錄酶首先與 RNA 模板結(jié)合,。反轉(zhuǎn)酶的RNA依賴性 DNA 聚合酶活性通過摻入反應(yīng)混合物中的dNTP來合成cDNA，反應(yīng)生成得到 cDNA:RNA 雜合鏈,，此過程被稱為第一鏈 cDNA 合成。
莫洛尼鼠白血病病毒 (M-MLV) 反轉(zhuǎn)錄酶是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)流程中常見的反轉(zhuǎn)錄酶之一。為了獲得更高的反轉(zhuǎn)錄效率,、更好的熱穩(wěn)定性和更高的 cDNA 合成率,，通常會對原始的反轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行基因工程改造,。目前市面上的反轉(zhuǎn)錄試劑所需要的反轉(zhuǎn)錄時(shí)間普遍從15分鐘到30分鐘不等,，時(shí)間相對較長，當(dāng)反應(yīng)樣本量較大時(shí),，整體花費(fèi)時(shí)間量也會急劇上升,。翌圣生物現(xiàn)有的5分鐘反轉(zhuǎn)錄系列產(chǎn)品，在5分鐘內(nèi)即可完成反轉(zhuǎn)錄,，省時(shí)高效,。
5分鐘一步消化&反轉(zhuǎn)錄預(yù)混液(Cat #11151ES)
產(chǎn)品特點(diǎn)
一步完成：一步完成gDNA去除和反轉(zhuǎn)錄；
快速反應(yīng)：消化&反轉(zhuǎn)僅需5分鐘,；
高效合成：可保證100 pg RNA反轉(zhuǎn)錄,；
產(chǎn)物穩(wěn)定：cDNA產(chǎn)物可長久穩(wěn)定保存,；
性能展示
圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板，分別檢測三種基因,。品牌A、品牌B,、品牌C均為一步gDNA去除&反轉(zhuǎn)錄試劑,。測試結(jié)果顯示,，在1 μg和10 ng Total RNA 投入下,，11151ES反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量均優(yōu)于其他品牌,，Ct值更小。
圖. 以擬南芥RNA為模板,，品牌A,、品牌B,、品牌C均為一步gDNA去除&反轉(zhuǎn)錄試劑,。測試結(jié)果顯示，在1 μg和10 ng Total RNA 投入下,，11151ES反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量均優(yōu)于其他品牌,，Ct值更小,。
圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板，擴(kuò)增30%GC,、50%GC,、60%GC和70%GC的基因,。分別投入100 pg,、1 ng,、10 ng,、100 ng,、1 μg的Total RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄并進(jìn)行熒光定量檢測。結(jié)果顯示,，11151ES可滿足100 pg-1 μg RNA的反轉(zhuǎn)錄,。
圖.以人293T細(xì)胞RNA為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，將獲得的cDNA產(chǎn)物進(jìn)行反復(fù)凍融,，分別凍融10次,、20次,、30次,。測試結(jié)果顯示11151ES反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA產(chǎn)物在30次反復(fù)凍融處理后，仍保持高度的穩(wěn)定性,，Ct值差異不大,。
圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,，將獲得的cDNA產(chǎn)物在-20℃,、4℃,、25℃和37℃的溫度條件下放置7天。測試結(jié)果顯示11151ES反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA產(chǎn)物在不同溫度下存儲7天,，仍保持高度的穩(wěn)定性，Ct值差異不大,。
客戶用戶體驗(yàn)
樣本來源：人肝臟組織總RNA
樣本來源：胃黏膜細(xì)胞RNA
樣本來源：小鼠胰島素瘤細(xì)胞RNA
5分鐘快速反轉(zhuǎn)錄試劑盒(11149/11150ES)
產(chǎn)品特點(diǎn)
快速反轉(zhuǎn)：最快5分鐘左右即可完成第一鏈cDNA合成；
檢出率高：10 pg-1 ug的RNA檢出率,；
高效合成：合成效率媲美進(jìn)口,，最長可合成14kb大小的片段；
適用廣泛：可用于下游PCR或qPCR,；
示蹤便利：示蹤版包含無干擾,、可視化藍(lán)色示蹤染料，提醒加樣進(jìn)度,。
性能展示
反轉(zhuǎn)錄時(shí)間 | 平均Ct值 |
5 min | 21.693 |
10 min | 21.589 |
15 min | 21.604 |
20 min | 21.746 |
25 min | 21.756 |
30 min | 21.691 |
圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,，得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示,，不同反轉(zhuǎn)錄時(shí)間處理的Ct值差值在0.2之內(nèi),。說明產(chǎn)品可在5分鐘內(nèi)完成反轉(zhuǎn)錄，反轉(zhuǎn)效果和長時(shí)間反轉(zhuǎn)效果持平,。
靈敏度高,，可至10 pg
圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,，得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示,，RNA 投入量為10 pg-1 μg時(shí),，11149ES均可反轉(zhuǎn)成功,，保證定量結(jié)果,。
圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板,，使用11149ES進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,，將得到的cDNA進(jìn)行PCR檢測,。結(jié)果顯示,，11149ES能夠滿足合成1 kb-14 kb長度的cDNA, 后續(xù)PCR有一定的適用場景。若需要直接反轉(zhuǎn)出10kb以上的片段,，建議延長反轉(zhuǎn)錄時(shí)間至20-30分鐘，以保證最終片段的獲取,。
RNA投入量 | Ct值 | |
11149ES | 進(jìn)口A品牌 | |
1 μg | 15.2 | 15.5 |
100 ng | 18.0 | 18.5 |
10 ng | 21 | 21.7 |
1 ng | 24.5 | 25.1 |
100 pg | 29.1 | 29.7 |
10 pg | 32.7 | 34.3 |
圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES,、進(jìn)口A品牌進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,，其中11149ES不進(jìn)行g(shù)DNA去除步驟，將得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析,。結(jié)果顯示，進(jìn)口A品牌反轉(zhuǎn)時(shí)間為13分鐘,， 11149ES反轉(zhuǎn)時(shí)間為5分鐘，不同產(chǎn)物定量顯示,，11149ES的Ct更小或者接近進(jìn)口競品,，說明11149ES 5分鐘反轉(zhuǎn)效率優(yōu)于或近似進(jìn)口A品牌的反轉(zhuǎn)錄效率,。
RNA投入量 | Ct值 | |
11149ES | 進(jìn)口B品牌 | |
1 μg | 16.2 | 17.4 |
100 ng | 19.0 | 20.5 |
10 ng | 22 | 23.8 |
1 ng | 26 | 27.9 |
100 pg | 31.4 | 33.2 |
10 pg | 32.9 | 35.6 |
圖. 以293T細(xì)胞總RNA為模板，使用11149ES,、進(jìn)口B品牌進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，其中11149ES不進(jìn)行g(shù)DNA去除步驟,，得到的cDNA 進(jìn)行qPCR 定量分析。結(jié)果顯示,，進(jìn)口B品牌反轉(zhuǎn)時(shí)間為20分鐘，11149ES反轉(zhuǎn)時(shí)間為5分鐘,，不同量底物定量顯示，11149ES的Ct更小或者接近進(jìn)口B品牌,，說明11149ES 5分鐘反轉(zhuǎn)效率優(yōu)于或近似進(jìn)口B品牌的反轉(zhuǎn)錄效率。
客戶體驗(yàn)反饋
樣本來源：菊花葉片
客戶評價(jià)：與某進(jìn)口品牌效果相似,，擴(kuò)增常規(guī)大小的片段效果不錯(cuò),。
樣本來源：果*葉片
客戶評價(jià)：藍(lán)色很好看,。
樣本來源：水稻
客戶評價(jià)：與其他反轉(zhuǎn)錄試劑盒相比，節(jié)省加樣時(shí)間,，節(jié)省反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)時(shí)間（其他試劑盒需要15+2 min，本試劑盒只需5 min）,，后續(xù)基因克隆DNA電泳結(jié)果證明,，本試劑盒反轉(zhuǎn)效率更高,，條帶更亮，所以會更節(jié)省PCR使用試劑,，節(jié)省成本。
方法 | 分類 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號 |
RNA提取 | 同Trizol提取 | TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent | 10606ES |
免氯仿升級版 | TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent(Tcm Free) | 19202ES | |
動(dòng)物組織/細(xì)胞總RNA提取，避開有毒試劑,，最快15 min完成 | MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit細(xì)胞/組織總RNA提取試劑盒 | 19221ES | |
qPCR染料法 | 高靈敏通用型定量預(yù)混液(染料法) | Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Master Mix | 11184ES |
定量預(yù)混液 (染料法)，已發(fā)文章累計(jì)IF達(dá)到5000+ | Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) | 11201ES | |
Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) | 11202ES | ||
Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) | 11203ES | ||
反轉(zhuǎn)錄試劑 | 5 分鐘一步消化&反轉(zhuǎn)錄預(yù)混液 | Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR | 11151ES |
5 分鐘快速反轉(zhuǎn)，最長可滿足14 kb cDNA合成,，含gDNA去除(下游應(yīng)用PCR/qPCR)-示蹤版 | Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit | 11149ES | |
5 分鐘快速反轉(zhuǎn),，最長可滿足14 kb cDNA合成，含gDNA去除(下游應(yīng)用PCR/qPCR)-常規(guī)版 | Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit（No Dye） | 11150ES | |
鏈cDNA合成預(yù)混液，含gDNA去除(下游應(yīng)用qPCR) | Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) | 11141ES |
