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上新 | 抽提效率突破90%,!升級版血漿游離DNA提取試劑盒,,實力登場!
cfDNA(Circulating free DNA)簡稱循環(huán)游離DNA,,是指循環(huán)血中游離于細胞外的部分降解了的機體內(nèi)源性DNA。正常生理情況下,,cfDNA主要來源于衰老凋亡細胞基因組DNA的降解,,當機體發(fā)生疾病時,如惡性腫瘤,、外傷,、排異、組織器官衰竭和感染重大疾病等,,異常壞死細胞會釋放大量DNA進入血液循環(huán),。
圖1.cfDNA的來源
游離核酸(cfDNA)是一類高度片段化的 DNA分子,片段分析則呈現(xiàn) 170bp 左右的一個主峰,、340bp 左右的一個伴峰,、510bp 左右的一個次伴峰以及其他伴峰。
圖2.cfDNA的特點
目前已經(jīng)在血漿,、血清,、尿液、前列腺液,、支氣管灌洗液,、唾液、腦脊液,、胃液,、膽汁、淋巴液,、腹腔液及類便中檢測到了游離循環(huán)核酸,。隨著精準醫(yī)療時代技術(shù)的發(fā)展,越來越多的研究者和醫(yī)生將基于cfDNA檢測的"液態(tài)活檢"技術(shù)應用于產(chǎn)前診斷,,腫瘤的篩查,,早期診斷,治療監(jiān)測和預后評估等多個方面,。
為了克服cfDNA在血漿樣本中微量,、片段短的痛點和難點,翌圣全新推出MolPure® Magnetic Circulating Cell-Free DNA Kit(18382ES),該產(chǎn)品適用于從0.3-4 mL的血漿,、血清樣本中的提取游離DNA,。
提取得率高:相同樣本提取的核酸濃度高,尤其對短片段的回收效率高,;
提取樣本質(zhì)量好:提取的核酸建庫,,文庫質(zhì)量高;
樣本適用性強:能夠適用于0.3-4mL體積的血漿樣本游離DNA提取,,兼容游離DNA保存用采血管或普通EDTA采血管采集樣本,。
采用cfDNA保存管采集健康人全血,通過離心分離血漿和去除細胞碎片等雜質(zhì),。提取4個2mL健康人血漿樣本,,50 µl的洗脫體積,,并采用Qubit定量,樣本濃度(ng/ µL),,結(jié)果顯示,,18382相對競品A有更高的提取效率。
試劑 | 樣本1 | 樣本2 | 樣本3 | 樣本4 |
競品A | 0.296 | 0.262 | 0.378 | 0.525 |
18382 | 0.437 | 0.308 | 0.41 | 0.6 |
圖3.18382對血漿cfDNA的提取能力
采用400 ng梯狀條帶 DNA Lader 分別添加入1 mL模擬血漿和1 mL TE buffer中,,并以模擬血漿未加DNA Lader作為陰性對照,,如圖4所示,18382ES在不同模擬基質(zhì)樣本中,,回收率均在90%以上,。
圖4.18382對不同片段長度DNA的提取能力
3個EDTA抗凝的健康人血漿樣本采用18382ES和競品A提取cfDNA,采用Hieff NGSTM DNA Library Prep Kit(13577ES)對cfDNA進行建庫,不同樣本不同提取試劑的文庫濃度和數(shù)據(jù)質(zhì)量如圖5所示,,18382提取cfDNA在文庫濃度,、數(shù)據(jù)質(zhì)量和插入片段與競品A相當。
圖5.18382提取cfDNA的文庫構(gòu)建數(shù)據(jù)質(zhì)量
將5%突變頻率Kars12D標準品梯度稀釋為1 ng/uL,,制備成模擬cfDNA 。取 10μL 并用 1 mL 血漿稀釋成模擬樣本,,采用18382ES和競品A提取模擬cfDNA,,取2µL cfDNA進行qPCR定量檢測(11211ES),如圖6所示,,低至6 copies/mL的突變片段,,18382ES提取之后未出現(xiàn)漏檢的情況。
圖6.18382提取含低頻突變的模擬cfDNA樣本,,低頻突變檢出率分析
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 | 產(chǎn)品規(guī)格 |
MolPure® Magnetic Circulating Cell-Free DNA Kit血漿,、血清游離DNA提取試劑盒 | 18382ES20 | 20 T |
18382ES50 | 50 T | |
18382ES70 | 200T |
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品應用 |
MolPure® Magnetic FFPE DNA Kit | 18371ES | 磁珠法石蠟包埋組織DNA提取 |
MolPure® Magnetic M4P1 Blood DNA Kit | 18504ES | 磁珠法血液DNA提取 |
MolPure® Mag32 M6P2 Soil DNA Kit FA | 18511ES | 磁珠法32孔土壤DNA提取試劑盒FA |
MolPure® Magnetic Tissue/Cell Total RNA Kit | 18600ES | 磁珠法組織/細胞總RNA提取 |