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翌圣全能型逆轉(zhuǎn)錄酶重磅上市,！
逆轉(zhuǎn)錄酶是逆轉(zhuǎn)錄的核心酶原料，被廣泛應(yīng)用于RT-PCR/qPCR,、RNA-seq,、單細(xì)胞測序等場景，但不同應(yīng)用場景對逆轉(zhuǎn)錄酶有不同的性能要求，如RT-qPCR,，需要逆轉(zhuǎn)錄酶具有高靈敏度,、高cDNA產(chǎn)量、可兼容復(fù)雜結(jié)構(gòu)模板等,；在主流單細(xì)胞測序技術(shù)中,，還需要具有末端轉(zhuǎn)移酶活性；用于cDNA克隆則需要可以合成全長的cDNA,。目前市售的逆轉(zhuǎn)錄酶很難實現(xiàn)一酶兼具多種應(yīng)用場景,，不同的應(yīng)用場景往往需要篩選不同的逆轉(zhuǎn)錄酶。
為實現(xiàn)一個逆轉(zhuǎn)錄酶可兼具多個應(yīng)用,，翌圣ZymeEditor™酶改造平臺通過對M-MLV進(jìn)行定向改造獲得了性能全方面提升的全能型逆轉(zhuǎn)錄酶：Hifair® Ultra Reverse Transcriptase（Cat#14604ES）,，可兼具RT-PCR/qPCR、RNA-seq,、單細(xì)胞測序,、cDNA克隆和文庫構(gòu)建等多個應(yīng)用場景。
超高靈敏度：可對1pg Total RNA有效逆轉(zhuǎn)錄
快速逆轉(zhuǎn)錄：5 min即可完成cDNA合成
持續(xù)合成能力強(qiáng)：無RNase H活性,，最大合成長度可達(dá)20 kb
高熱穩(wěn)定性：最高反應(yīng)溫度可達(dá)65℃,，提升復(fù)雜結(jié)構(gòu)模板兼容性
TdT活性：可向合成的DNA 3′ 末端非模板特異性地添加核苷酸
RT-qPCR：優(yōu)異的靈敏度及批次間穩(wěn)定性
圖1. RT-qPCR檢測數(shù)據(jù)，紅,，藍(lán),，綠分別表示14604ES的3個不同批次
分別投入5、50,、500 ng的293T RNA,，使用3個批次的14604ES在55℃逆轉(zhuǎn)錄5 min，逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行qPCR檢測,，結(jié)果顯示14604ES的3個批次在各個投入量下,，△Ct值均< 0.5，表明14604ES具有優(yōu)異的靈敏度及批次間穩(wěn)定性,。
RNA-seq：高建庫產(chǎn)量,，低低宿主DNA 殘留
圖2. 14604ES應(yīng)用于RNA-seq建庫產(chǎn)量
圖3.14604ES應(yīng)用于 RNA-seq測序質(zhì)量
應(yīng)用于RNA建庫，14604ES的建庫產(chǎn)量高于進(jìn)口品牌,，測序數(shù)據(jù)質(zhì)量相當(dāng)且宿主DNA殘留更低,。
逆轉(zhuǎn)錄酶選擇指南
定位 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 |
應(yīng)用于RT-LAMP | Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase | 11111ES |
應(yīng)用于RNA-seq | Hifair® IV Reverse Transcriptase | 11112ES |
應(yīng)用于RT-PCR/qPCR | Hifair® V Reverse Transcriptase | 11300ES |
應(yīng)用通用型：RNA-seq、RT-PCR,、單細(xì)胞測序等 | Hifair® Ultra Reverse Transcriptase | 14604ES |
適用于10x Genomics及國產(chǎn)單細(xì)胞儀器平臺 | YeaCell™ 1st Strand Synthesis kit for Single Cell 3?RNA-seq | 13594ES |
注：翌圣逆轉(zhuǎn)酶系列均可提供高低濃度,、無甘油等不同產(chǎn)品形式。
