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基質(zhì)膠——3D類器官培養(yǎng)成功的關(guān)鍵

2022-9-22  閱讀(803)

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基質(zhì)膠——3D類器官培養(yǎng)成功的關(guān)鍵

隨著疫情的持續(xù)影響,,多國都開啟了保護(hù)主義模式,,全球化進(jìn)程戛然而止,作為21世紀(jì)前景的生命科學(xué)也受到了相關(guān)沖擊,。在今年4~6月份,,基質(zhì)膠在全國大面積缺貨,導(dǎo)致很多企業(yè)無法按時完成產(chǎn)品和服務(wù)交付,、科研工作者科研成果不能及時發(fā)表以及即將畢業(yè)的莘莘學(xué)子們的畢業(yè)論文無法按時完成實驗導(dǎo)致畢業(yè)進(jìn)程受到很大的影響,。在中美脫鉤的影響下,如果出現(xiàn)關(guān)鍵性生物原料出現(xiàn)如芯片一樣的卡脖子問題,,將會對中國的生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)和研究造成嚴(yán)重沖擊,,這是我們不想看到的,因此加速國產(chǎn)替代是個必然趨勢和過程,。


基質(zhì)膠(Basement membrane matrix)是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取出的可溶性基底膜制備物,,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等組成,,還包含生長因子如TGF-beta、EGF,、IGF,、FGF、組織纖溶酶原激活物和EHS腫瘤自身含有的其他生長因子,。在1980年代中期由丹麥的 J. Engelbreth-Holm和Richard Swarm二者分別發(fā)現(xiàn)并具體描述基質(zhì)膠[1],,其主要生產(chǎn)過程是用鹽水提取/洗滌腫瘤勻漿后可溶性蛋白質(zhì),再用溶劑萃取產(chǎn)物中不溶性復(fù)合物,,在低溫下使用緩沖液進(jìn)行透析后獲得無色到淡黃色溶液,。



1.png

表:基質(zhì)膠組分【1】



基質(zhì)膠為組織和細(xì)胞提供支撐、抗拉強度和支架支撐,也可以作為細(xì)胞粘附和運動的三維亞結(jié)構(gòu)以及生長因子,、趨化因子和細(xì)胞因子的儲存庫,,同時可作為細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和分化的信號等。翌圣生物開發(fā)生產(chǎn)的Ceturegel™基質(zhì)膠不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒),,超低內(nèi)毒素含量,,并全部經(jīng)過支原體檢測保證無支原體污染,包括基本濃度,、高濃度,、低生長因子等不同類型基質(zhì)膠。 


基質(zhì)膠應(yīng)用方向



2.png



產(chǎn)品特點




3.png


產(chǎn)品種類


  • 基本濃度(8-12mg/mL)

  • 低生長因子

  •  高濃度(≥18 mg/mL)

  • 干細(xì)胞專用

  • 類器官專用


應(yīng)用驗證



4.png


圖:細(xì)胞侵襲后經(jīng)結(jié)晶紫染色的結(jié)果


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圖.血管生成明場和熒光結(jié)果



6.png


圖.細(xì)胞3D培養(yǎng)4d后結(jié)果




Q&A

拿到的基質(zhì)膠有色差的變化(淡黃色到深紅色)是什么原因,?

對于含酚紅的基質(zhì)膠主要原因是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,,但是與5%CO2平衡后色差即會減少。凍融后,,輕輕搖晃試劑瓶使基質(zhì)膠分散均勻,。

圖片
基質(zhì)膠的操作要注意哪些事項?

所有操作需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,,應(yīng)使用預(yù)冷的器材以保證基質(zhì)膠正常操作,。

圖片
基質(zhì)膠如何分裝凍存使用?

可將凍融后的Ceturegel™基質(zhì)膠分裝在多個凍存管,,凍存管需預(yù)冷,,分裝后迅速冷凍并保存,避免多次凍融,。

圖片




相關(guān)產(chǎn)品




[1] Kleinman H K , Martin G R . Matrigel: basement membrane matrix with biological activity.[C]// Seminars in Cancer Biology. 2005.





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