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Carrier RNA常見類型,、作用原理及優(yōu)缺點(diǎn)介紹
1. Carrier RNA概念及作用
熒光定量PCR是分子診斷主流技術(shù),,包括核酸提取和PCR擴(kuò)增兩個(gè)環(huán)節(jié),兩者共同決定了該檢測(cè)方法的評(píng)測(cè)參數(shù),。以直觀關(guān)鍵的檢測(cè)靈敏度指標(biāo)來看,,只有實(shí)現(xiàn)了提取環(huán)節(jié)///優(yōu)化和PCR擴(kuò)增環(huán)節(jié)///優(yōu)化的情況下,檢測(cè)靈敏度的結(jié)果才更可信,。檢測(cè)靈敏度顯示了檢測(cè)試劑的檢測(cè)下限,,對(duì)于熒光定量PCR而言,即一定樣本濃度下的病毒核酸檢出率,。
Carrier RNA,,中文名載體RNA,又叫核酸助沉劑,。在核酸提取環(huán)節(jié),,提取使用到的離心管壁多是聚丙烯的材料,,管壁上有靜電,,會(huì)吸附核酸。在提取純化過程中采用Carrier RNA 可幫助核酸去除靜電效應(yīng),,保證核酸能很好被吸附到純化柱上,提高洗脫效率,,從而達(dá)到盡可能多的回收樣本中核酸,!
2. Carrier RNA常見類型
作為核酸沉淀的輔助物質(zhì),,Carrier RNA有多種類型,。
類型 | 代表物質(zhì) | 作用原理 |
多聚糖 | 糖原 | RNA在高鹽、無水乙醇環(huán)境中溶解度很低,,通過高速離心可發(fā)生沉淀,。當(dāng)RNA濃度很低時(shí),微量RNA不足以形成沉淀,。在上述環(huán)境條件下,,糖原也不可溶并可與RNA共沉淀,,形成可視化沉淀。 |
核酸混合物 | PolyA鉀鹽,、大腸桿菌總RNA、酵母總RNA,、tRNA等 | 減少吸附損失,降低核酸酶攻擊待提取核酸的概率,。 |
其他 | 線性化丙烯酰胺 | 減少吸附損失 |
3. 優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品介紹——上海翊圣生物生產(chǎn)的Carrier RNA
翊圣生物Carrier RNA是酵母來源的RNA,,無DNase、RNase酶殘留,,蛋白和DNA殘留含量極低,。可用于病毒核酸提取,、微量DNA提取等實(shí)驗(yàn),,提取的核酸可用于后續(xù)RT-PCR,,RT-qPCR等實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品分為液體和凍干型粉末制劑,,便于直接使用和長(zhǎng)距離運(yùn)輸,、保存,。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 保存條件 |
Carrier RNA, 6 μg/μL | 19701ES03 | 1 mL | -20℃保存,可保存2年 |
Carrier RNA Powder, 216 μg/tube | 19703ES01 | 1 tube | 室溫保存,,可保存1年 |
Carrier RNA Powder, 310 μg/tube | 19704ES01 | 1 tube | 室溫保存,,可保存1年 |
本品為核酸混合物,,產(chǎn)品使用非常簡(jiǎn)單,,在純化核酸過程中通過添加微克量(μg)的Carrier RNA,,即可實(shí)現(xiàn)提升低至皮克級(jí)別(pg)微量核酸的沉淀效率,,達(dá)到提升試劑檢測(cè)靈敏度的目的,。
其作用原理主要是通過混入大量核酸(Carrier RNA),,減少了目標(biāo)核酸物質(zhì)的管壁吸附損失,,進(jìn)而提高微量的核酸純化柱上的結(jié)合和洗脫效率,,同時(shí)降低了提取環(huán)境中的RNase降解微量RNA的概率,。
4. 應(yīng)用案例
Carrier RNA的加入有助于低豐度SARS-CoV-2假病毒核酸檢測(cè)
使用磁珠法拭子樣本病毒DNA/RNA提取試劑盒(產(chǎn)品貨號(hào):19387ES),,提取不同濃度的SARS-CoV-2假病毒樣本核酸,,后續(xù)使用新//冠檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)N基因,。結(jié)果顯示,添加Carrier RNA后,具有更高的提取效率,,使下游檢測(cè)更靈敏,。
Ct值 | 0 copies/mL | 125 copies/mL | 250 copies/mL | 500 copies/mL | 1000 copies/mL | NTC |
不加carrier RNA | N/A; N/A; N/A | N/A; N/A; N/A | N/A; 40.4; N/A | N/A; 40.16; 40.88 | 38.05; 38.02 | N/A; N/A; N/A |
加carrier RNA | N/A; N/A; N/A | N/A; 40.54; N/A | 40.2; 40.29; 38.95 | 38.61; 39.03; 38.59 | 37.53; 36.34 |
|
5、相關(guān)產(chǎn)品
Carrier RNA提供成管凍干粉及液體類型,,可直接用于各類應(yīng)用場(chǎng)景,。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Carrier RNA, 6 μg/μL | 19701ES03 | 1 mL | 635.00 |
Carrier RNA, 6 μg/μL | 19701ES08 | 5 mL | 詢價(jià) |
Carrier RNA Powder, 216 μg/tube | 19703ES01 | 1 tube | 75.00 |
Carrier RNA Powder, 216 μg/tube | 19703ES80 | 100 tube | 詢價(jià) |
Carrier RNA Powder, 216 μg/tube | 19703ES92 | 1000 tube | 詢價(jià) |
Carrier RNA Powder, 310 μg/tube | 19704ES01 | 1 tube | 95.00 |
Carrier RNA Powder, 310 μg/tube | 19704ES80 | 100 tube | 詢價(jià) |
Carrier RNA Powder, 310 μg/tube | 19704ES92 | 1000 tube | 詢價(jià) |
HB200927