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Carrier RNA常見類型,、作用原理及優(yōu)缺點(diǎn)介紹

2020-9-29  閱讀(1529)

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Carrier RNA常見類型,、作用原理及優(yōu)缺點(diǎn)介紹

 

1. Carrier RNA概念及作用

熒光定量PCR是分子診斷主流技術(shù),,包括核酸提取和PCR擴(kuò)增兩個(gè)環(huán)節(jié),兩者共同決定了該檢測(cè)方法的評(píng)測(cè)參數(shù),。以直觀關(guān)鍵的檢測(cè)靈敏度指標(biāo)來看,,只有實(shí)現(xiàn)了提取環(huán)節(jié)///優(yōu)化和PCR擴(kuò)增環(huán)節(jié)///優(yōu)化的情況下,檢測(cè)靈敏度的結(jié)果才更可信,。檢測(cè)靈敏度顯示了檢測(cè)試劑的檢測(cè)下限,,對(duì)于熒光定量PCR而言,即一定樣本濃度下的病毒核酸檢出率,。

 

Carrier RNA,,中文名載體RNA,又叫核酸助沉劑,。在核酸提取環(huán)節(jié),,提取使用到的離心管壁多是聚丙烯的材料,,管壁上有靜電,,會(huì)吸附核酸。在提取純化過程中采用Carrier RNA 可幫助核酸去除靜電效應(yīng),,保證核酸能很好被吸附到純化柱上,提高洗脫效率,,從而達(dá)到盡可能多的回收樣本中核酸,!

 

2. Carrier RNA常見類型

作為核酸沉淀的輔助物質(zhì),,Carrier RNA有多種類型,。

類型

代表物質(zhì)

作用原理

多聚糖

糖原

RNA在高鹽、無水乙醇環(huán)境中溶解度很低,,通過高速離心可發(fā)生沉淀,。當(dāng)RNA濃度很低時(shí),微量RNA不足以形成沉淀,。在上述環(huán)境條件下,,糖原也不可溶并可與RNA共沉淀,,形成可視化沉淀。

核酸混合物

PolyA鉀鹽,、大腸桿菌總RNA、酵母總RNA,、tRNA等

減少吸附損失,降低核酸酶攻擊待提取核酸的概率,。

其他

線性化丙烯酰胺

減少吸附損失

 

3. 優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品介紹——上海翊圣生物生產(chǎn)的Carrier RNA

翊圣生物Carrier RNA是酵母來源的RNA,,無DNase、RNase酶殘留,,蛋白和DNA殘留含量極低,。可用于病毒核酸提取,、微量DNA提取等實(shí)驗(yàn),,提取的核酸可用于后續(xù)RT-PCR,,RT-qPCR等實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品分為液體和凍干型粉末制劑,,便于直接使用和長(zhǎng)距離運(yùn)輸,、保存,。

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

保存條件

Carrier RNA, 6 μg/μL

19701ES03

1 mL

-20℃保存,可保存2年

Carrier RNA Powder, 216 μg/tube

19703ES01

1 tube

室溫保存,,可保存1年

Carrier RNA Powder, 310 μg/tube

19704ES01

1 tube

室溫保存,,可保存1年

 

本品為核酸混合物,,產(chǎn)品使用非常簡(jiǎn)單,,在純化核酸過程中通過添加微克量(μg)的Carrier RNA,,即可實(shí)現(xiàn)提升低至皮克級(jí)別(pg)微量核酸的沉淀效率,,達(dá)到提升試劑檢測(cè)靈敏度的目的,。

其作用原理主要是通過混入大量核酸(Carrier RNA),,減少了目標(biāo)核酸物質(zhì)的管壁吸附損失,,進(jìn)而提高微量的核酸純化柱上的結(jié)合和洗脫效率,,同時(shí)降低了提取環(huán)境中的RNase降解微量RNA的概率,。

 

4. 應(yīng)用案例

Carrier RNA的加入有助于低豐度SARS-CoV-2假病毒核酸檢測(cè)

使用磁珠法拭子樣本病毒DNA/RNA提取試劑盒(產(chǎn)品貨號(hào):19387ES),,提取不同濃度的SARS-CoV-2假病毒樣本核酸,,后續(xù)使用新//冠檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)N基因,。結(jié)果顯示,添加Carrier RNA后,具有更高的提取效率,,使下游檢測(cè)更靈敏,。

Ct值

0 copies/mL

125 copies/mL

250 copies/mL

500 copies/mL

1000 copies/mL

NTC

不加carrier RNA

N/A; N/A; N/A

N/A; N/A; N/A

N/A; 40.4; N/A

N/A; 40.16; 40.88

38.05; 38.02

N/A; N/A; N/A

加carrier RNA

N/A; N/A; N/A

N/A; 40.54; N/A

40.2; 40.29; 38.95

38.61; 39.03; 38.59

37.53; 36.34

 

 

 

 

5、相關(guān)產(chǎn)品

Carrier RNA提供成管凍干粉及液體類型,,可直接用于各類應(yīng)用場(chǎng)景,。

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格(元)

Carrier RNA, 6 μg/μL

19701ES03

1 mL

635.00

Carrier RNA, 6 μg/μL

19701ES08

5 mL

詢價(jià)

Carrier RNA Powder, 216 μg/tube

19703ES01

1 tube

75.00

Carrier RNA Powder, 216 μg/tube

19703ES80

100 tube

詢價(jià)

Carrier RNA Powder, 216 μg/tube

19703ES92

1000 tube

詢價(jià)

Carrier RNA Powder, 310 μg/tube

19704ES01

1 tube

95.00

Carrier RNA Powder, 310 μg/tube

19704ES80

100 tube

詢價(jià)

Carrier RNA Powder, 310 μg/tube

19704ES92

1000 tube

詢價(jià)

HB200927

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