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產(chǎn)品詳細(xì)描述
LSM淋巴細(xì)胞分離液
LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM
用途：
用于體外分離外周血淋巴細(xì)胞，也可以從其他來(lái)源中分離單核細(xì)胞，包括臍帶血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞。
方法概述：
早期分離白細(xì)胞的方法,，會(huì)用一種化合物混合血液,。此化合物能夠聚集紅細(xì)胞,，只輕微影響白細(xì)胞,。通過(guò)離心,，紅細(xì)胞由于密度增加而聚集沉淀，同時(shí)從離心管內(nèi)上層收集白細(xì)胞,。
Böyum提出了一種更方便快速的分離方法,，即以Ficoll®-甲泛影鈉溶液為介質(zhì)進(jìn)行離心。稀釋的血液在Ficoll-甲泛影鈉溶液中分層,，之后低速短時(shí)離心,。紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞沉降到管底，單個(gè)核細(xì)胞（淋巴細(xì)胞）和血小板可以從兩個(gè)分層間的分界面處收集,。
許多研究者不斷改進(jìn)了Böyum方法,，對(duì)于MP生物醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的LSM，其方法的*之處在于成功運(yùn)用泛影酸鈉代替了甲泛影鈉,。
程序原理：
去纖維蛋白或肝素化人血以1：1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋,，在分離溶液中分層，低速離心30min,。離心過(guò)程中,，由于差速遷移終形成不同的細(xì)胞層。
聚集在管底的顆粒主要是紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞,，它們通過(guò)梯度遷移至管底,。由于其密度不同，淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞（單核細(xì)胞和血小板）分布在血漿和LSM兩層之間,。淋巴細(xì)胞可以通過(guò)吸取分界層溶液回收，后進(jìn)一步清洗去除血小板,，LSM和血漿,。
試劑：
LSM® 是一種濾膜過(guò)濾除菌的溶液，每100ml包含6.2g聚蔗糖和9.4g泛影酸鈉,。20℃下密度是1.0770-1.0800g/ml,。
使用說(shuō)明：
以下的操作步驟是初由Böyum.設(shè)計(jì)的程序中眾多改良版本的一種。此程序經(jīng)改良用于去纖維蛋白或抗凝血?jiǎng)┨幚磉^(guò)的人體血液,；對(duì)于其他物種或者其他組織的血液,，改變此程序也許是有必要的。
1. 輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合
2. 無(wú)菌轉(zhuǎn)移3 ml LSM到15 ml離心管中,。
3. 混合2 ml去纖維蛋白血液或肝素化血液 和2 ml 生理鹽水
4. 仔細(xì)的將稀釋血液加入含有3 ml LSM（室溫）的15ml離心管中,，在血液和LSM中形成一個(gè)明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中,。
5. 室溫下400xg離心15-30min,，離心可以沉淀紅細(xì)胞和多形核白細(xì)胞，同時(shí)可以在LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞,，如上圖所示（具體分層情況為血漿層-單個(gè)核細(xì)胞層-LSM層-RBC顆粒）,。
6. 吸出淋巴細(xì)胞上方2-3mm的血漿。
7. 吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM，并轉(zhuǎn)移到另外一個(gè)離心管,。加入等體積的平衡鹽緩沖液至離心管內(nèi)的淋巴細(xì)胞層中,，室溫（18-25°C）離心10分鐘，離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞即刻,，例如160 – 260 xg（清洗去除LSM,，并降低血小板的百分比）。
8. 再用平衡鹽緩沖液清洗細(xì)胞,，后用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細(xì)胞,。
訂購(gòu)信息：相當(dāng)于sigma公司的Histopaque®-1077產(chǎn)品
名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 單價(jià) | * |
淋巴細(xì)胞分離液（MPbio公司產(chǎn)品） | 0850494X | 100ML | 362元 | 280元 |
0850494 | 100ML*5 | 1587元 | 1400元 | |
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廠家說(shuō)明
MP Biomedicals生物醫(yī)學(xué)公司是位于美國(guó)加利福尼亞州的生命科學(xué)和生物技術(shù)廠商。2004年底成功收購(gòu)Qbiogene,、ICN,，現(xiàn)在有5個(gè)大型倉(cāng)庫(kù)，能夠及時(shí)供應(yīng)各行業(yè)需求,，亞洲倉(cāng)庫(kù)位于新加坡,。它致力于生命科學(xué)領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究和探索。目前它提供55000多種產(chǎn)品,，是世界上能全面提供生命科學(xué)產(chǎn)品和臨床診斷產(chǎn)品的幾家廠商之一,。
