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翊圣生物提供高成功率糖尿病建模用STZ：純度≥98%（HPLC測定）,。
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | *（元） |
Streptozocin 鏈脲佐菌素 | 60256ES60 | 100mg | 156.00 |
Streptozocin 鏈脲佐菌素 | 60256ES76 | 500mg | 386.00 |
Streptozocin 鏈脲佐菌素 | 60256ES80 | 1g | 676.00 |
文章包含以下知識點
1. STZ誘導糖尿病模型的構(gòu)建標準SOP
2. STZ誘導糖尿病模型建模效果評估指標
3. STZ誘導糖尿病模型的失敗原因解析
4. STZ誘導小/大鼠死亡率高的原因解析
5. 糖尿病建模的影響因素
6. STZ建模方法思路梳理
7. 高建模成功率STZ使用指南
絕大多數(shù)由化學藥物誘導的動物疾病模型具備標準化思路，是用一定劑量的某種化學藥物借助某種手段抵達正常組織/器官,，并在處理一段時間后評估疾病指標,。下面就從幾個方面梳理建立鏈脲佐菌素（Streptozocin，STZ）誘導的糖尿病疾病模型的思路,。
1.STZ誘導糖尿病模型的構(gòu)建標準SOP
1.1 動物的準備
盡量選用雄性動物,，雌性含有激素影響建模效率。有研究顯示,，雌性動物成模率差,，而且可能會比雄性出現(xiàn)更高死亡率，尤其是I型,。
I型糖尿?。═ype I diabetes）一般按照體重選擇即可，推薦大鼠170-200g,，小鼠17-22g,，適應性喂養(yǎng)1~2周后空腹注射STZ，成模率相對理想,。
II型糖尿?。═ype II diabetes）對于大鼠（比如SD/Wistar），選取4-5周齡,，體重在90-100g,，高脂（高糖）飼料喂養(yǎng)4-6周體重約達240-280g。 對于小鼠（比如C57/ICR/昆明小鼠），選取4-5周齡,，體重在16-20g,，高脂（高糖）飼料喂養(yǎng)4-6周體重約達30-35g。 對于新購入動物或更換飼養(yǎng)環(huán)境需要先用普通飼料適應性喂養(yǎng)一周,，然后再選擇適合周齡/體重動物轉(zhuǎn)用高脂高糖飼料繼續(xù)喂養(yǎng),。從模型建立成功率來看，大鼠推薦用SD,，小鼠推薦C57,。
1.2 造模前的喂養(yǎng)
造膜前的喂養(yǎng)，Ⅰ型糖尿病模型成模比較快,，通常大鼠在普通飼料適應性喂養(yǎng)2周后即可開始造模,；Ⅱ型糖尿病模型：高脂飲食誘導加小劑量STZ。造模前喂以高脂(高糖)飼料,，誘發(fā)出胰島素抵抗,。
1.3 試劑的準備
①高脂(高糖)飼料
高脂(高糖)飼料成分：其中含10%蔗糖，10%豬油,，5%膽固醇
由基礎鼠飼料加蔗糖,、煉豬油和蛋黃按質(zhì)量比搭配制作高脂高糖飼料：其比例為豬油18 % ,蔗糖20 % ,蛋黃3 % ,基礎飼料59 %。
②STZ溶劑——檸檬酸鈉緩沖液的配制
A液和B液的配制：稱取檸檬酸(FW:210.14) 2.1g加入雙蒸水100mL中配成A液,；稱取檸檬酸鈉(FW:294.10) 2.94g加入雙蒸水100mL中配成B液,。
檸檬酸鈉緩沖液的配制：將A、B液按一定比例混合（1：1.32也有按1:1的）,，pH計測定pH值,，調(diào)節(jié)pH值到4.2-4.5，即是所需檸檬酸鈉緩沖液,。
1.4 注射前準備
配制STZ注射液前,，STZ凍干粉放置于干燥滅菌瓶內(nèi)，外用鋁箔紙或錫紙包好,，與檸檬酸鈉緩沖液一起置于冰浴預冷,，帶到動物房備用。
注意：STZ凍干粉從−20°C冰箱取出后,，于室溫干燥避光放置10min左右,，使其*解凍（很重要）。
1.5 配制注射液
大鼠過夜禁食（不禁水）后稱重并測血糖濃度,。對大鼠進行分組，以便按照動物數(shù)目和注射劑量來準備STZ注射液,。以1%濃度（w/V）溶解STZ,，過濾消毒，切記STZ*溶解。
注意：①STZ不穩(wěn)定,，易失活,，快速稱取后剩余試劑仍要求干燥避光，推薦用干燥鋁箔(或錫箔)紙包裹,。②注射時若操作不熟練,，切忌不可一次性溶解完STZ。建議根據(jù)操作熟練度,，分組溶解STZ,，比如10只或15只鼠/組。③亦可提前將STZ按動物分組的所需量稱重,，分裝,。
1.6 注射
按動物空腹體重腹腔或尾靜脈注射。如果注射操作技術(shù)不熟練,，應兩組交替注射,，注射應在30分鐘內(nèi)完畢。注意：注射大多要求快速注射,。
注意：①Ⅰ型糖尿病模型：大鼠劑量為70～65mg/kg
Ⅱ型糖尿病模型：高糖高脂喂養(yǎng)1～2 個月的大鼠,STZ 劑量在25～40mg/kg,。
1.7 注射后
注射完STZ后要給予動物足夠的水、食物（糖尿病鼠的基本生活特征）,，需每日換墊料,，保持鼠籠干燥。飼養(yǎng)時,，注意避免強日光照射,。盡可能勤消毒。
注意：STZ造模后,，明顯血糖水平波動呈現(xiàn)3個時相,，一時性高血糖（1-2h）、短暫低血糖（6-10h）,、持續(xù)高血糖（>72h）,。必須適當補給胰島素和葡萄糖。
2. STZ誘導糖尿病模型建模效果評估指標
與對照組對比,，統(tǒng)計以下指標：
2.1 一般性指標：出現(xiàn)多飲,、多食、多尿現(xiàn)象,，體重下降,；
2.2 其他指標：空腹血糖、空腹血清胰島素水平,、血清胰島素水平,、胰島素敏感性,、糖耐量等；
2.3 血清生化指標：T-Cho,、TG,、HDL-C、LDL-C,、CR,、BUN、Alt等,。
2.4 病理切片：胰腺組織病理切片
3.STZ誘導糖尿病模型的失敗原因解析
3.1 STZ的品質(zhì)是關(guān)鍵,，建模用STZ純度應不低于98%（HPLC檢測）。
3.2 STZ失效：應干燥保存,，避免受潮,。粉末避免長時間室溫放置，溶解的STZ是非常不穩(wěn)定的,，在中性pH值的半衰期為15分鐘,。注意用酸性pH值溶解STZ，*放在冰浴里,。（了解更多STZ的使用,，可查看：h/t/t/ps://w/w/w.yeasen.c/o/m/products/detail/1002 ）
3.3 腹腔注射是否注射到腸子等臟器。
模型不*,，建議,，再觀察3天，還是不成模型的話,，重新注射一次,。
4.STZ誘導小/大鼠死亡率高的原因解析
4.1 鼠的體重過低；
4.2 一定要保證足夠的飲水量(飲水量不足容易導致死鼠);
4.3 高血糖和低血糖都會造成死鼠,，避免死鼠可以通過注射胰島素或暫時補糖,，兩種途徑： ①常見為血糖過高。補胰島素法,，補一些中效胰島素,。例如給諾和靈n或NPH(中性魚精蛋白鋅胰島素),每次2-3個單位，過了3-5天,，大鼠一般死亡率就低了,；②補糖法，禁食后的鼠,，注射的時候已經(jīng)處于低血糖狀態(tài),，造模4小時后腹腔注射20%的葡萄糖，可避免因注射時血糖過低死鼠,；
4.4 防止動物自相殘殺,。食物缺乏和供水不足的情況下,，會互相撕殺、啃食同類,，所以食物和飲水要供應充足，*是兩路供應;
4.5 防止感染,。糖尿病大鼠尿量多,，墊料潮濕，需要勤換墊料,，所以糖尿病大鼠較其他大鼠容易出現(xiàn)感染,，特別是泌尿道感染和腹腔感染。腹腔注射,、皮下注射及采血測血糖等侵入性操作前后,，要注意消毒工作。如每次采血測血糖后可用四環(huán)素(或金霉素眼藥膏)局部涂抹處理傷口預防感染,。
5.糖尿病建模的影響因素
糖尿病疾病模型的影響因素包括STZ建模試劑的質(zhì)量,、動物狀況及給藥方式等。其中,，試劑主要性能為純度,、穩(wěn)定性、溶解特性等,，動物狀況主要包括遺傳背景,，雌雄，性別,，體重,，飼養(yǎng)環(huán)境，飲食結(jié)構(gòu)等,，給藥方式包括給藥時間,、給藥間隔和給藥途徑。差異化的因素帶來差異化的建模效果,。
6.STZ建模方法思路梳理
影響因素標準化是實現(xiàn)建模目的及建模穩(wěn)定性的保證,。理論上，所有的動物建模實驗均要求預實驗,。
以STZ誘導糖尿病模型而言,，實驗時STZ的給藥量應參照預實驗的結(jié)果，盡量不要盲目按照文獻上或他人的給藥量來直接使用,，鼠均重和空腹(低糖狀態(tài))抗藥力,、禁食時長、注射選時,、以及之前飼養(yǎng)過程,、測糖選時等都不相同,，通過預實驗來確定符合自己實驗鼠的給藥計量，才是蕞科學的,。
7.高建模成功率STZ使用指南
STZ保存,、溶解、分裝等使用注意事項,，詳見h/t/t/ps://w/w/w.yeasen.c/o/m/products/detail/1002
