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elisa試劑盒檢測法比色測定
閱讀:1210 發(fā)布時間:2016-9-20時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素,。在一定時間內(nèi),,陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強(qiáng),。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行,。在定量測定中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確,。ELISA試劑盒時間一般不需要嚴(yán)格控制,,有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯況適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時間,及時判斷,。
比色
比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,,ELISA試劑盒然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗,,需先將板置于標(biāo)準(zhǔn)96孔的座架中,才可進(jìn)行比色,。在加底物液顯色前,,先將軟板邊緣剪凈,這樣,,此板就可*平妥坐入座架中,。
性測定
定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,分別用"陽性",、"陰性"表示,。"陽性"表示該標(biāo)本在該測定系統(tǒng)中有反應(yīng),。"陰性"則為無反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,,即用滴度來表示反應(yīng)的強(qiáng)度,,其實(shí)質(zhì)仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中,,將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗,,呈陽性反應(yīng)的高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,,這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽性、弱陽性更具定量意義,。
在間接法和夾心法ELISA中,,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,,陰性孔呈色深于陽性孔,。