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對ELISA試劑盒生產廠家的一些看法
閱讀:3605 發(fā)布時間:2013-8-20
近來,,網上關于ELISA試劑盒的討論帖子很多,,今天我也發(fā)表一下自己的一些看法,對ELISA的見解有不合錯誤的地方,,希望指正或者直接拍磚,。其實許多客戶上當上當都和網絡有關,要是你不是在baidu或者google上找試劑,,而是認真看看帖子,,大概會改變你原來的選擇,。
首先,,談一下市場。首先RnD和Bender等一些著名品牌的ELISA試劑盒照舊很值得信任的,也得到了市場的承認,,特別是RnD的試劑盒,,我們銷量很好,價格也是很公道,,當然經費不是很充分的實行室很難消耗的起,。
國內的廠家,,以前我念書的時間,,晶美做的很不錯,也受到了客戶的好評,,后來聽說,,由于資金鏈的問題,遣散了,,真是可惜,。如今我們市場推薦給客戶的都是上海吉泰和深圳達科為的試劑盒,質量在靈敏度上和RnD的試劑盒依舊有很大差距,,但是有一點是可以肯定的,,試劑盒反應的效果是公正客觀的。另有一個缺點便是這兩個廠家可供選擇的盒子種類比較少,,主要集中在炎癥細胞因子上,。
ELISA試劑盒的挑選以及應用
談一下怎樣靈活應用ELISA這個檢測方法以及怎樣去挑選ELISA試劑盒。ELISA這個方法的原理,,大家都很明白,,網上的資料很多??烧嬲闷饋淼臅r候,,偶然間就會有點犯糊涂,我談一下自己的理解,。
1,、有些客戶會用OVA(卵清卵白)做一些哮喘,過敏性腸炎的模型,,然后會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清內里IgG,,IgE等指標。當客戶向我咨詢購置這幾個指標的試劑盒的時候,,我很肯定地說這些指標的檢測要你自己特制,,不會有商品化的試劑盒出售的。當你baidu或google一下時,,頁面出來大量的商品化的試劑盒,,千篇一律的明書時候,我真的是蒙了,我懷疑自己跟不上時代了,。我不去評論這些試劑盒的真假,,我仍舊建議做這些檢測指標的朋友,選擇sigma公司V級別的OVA,,然后用這個來造模,,自己包板摸條件,用OD值來比較抗體含量的變化,。
2,、對付一些小分子的檢測,例如:前線腺素,、糖皮質激素的檢測,,我的理解是要用競爭法ELISA去檢測,也要購買采用這個方法的盒試劑盒,。一般細胞因子的檢測,,都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測,由于因子分子量比力大,,一般10幾個KD左右,,很容易找到兩個或多個抗原表位。
而小分子很難找到兩個不通的表位,,也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結合小分子并固相化,。解決方案便是酶標板上包被二抗,每個孔加入一定量的酶標的小分子,,然后加樣品,,再加不帶標志的檢測抗體,顯色底物,。樣品的目標小分子的含量越高,,吸光度越低。
3,、對付胰島素的檢測,,我還是推薦millpore 旗下LInco公司的檢測試劑盒,不管是放免還是ELISA,,據說權在他們手中,。 近看了資料,瑞典Mercodia公司的胰島素檢測試劑盒也是得到市場的承認的,。對付ox-ldl的檢測,,Mercodia公司也是很牛的。
4,、NO的檢測,,一般都是采用經典的Greiss法,,如今市場上竟然有NO ELISA試劑盒,真是徹夜未眠也搞不明白,。另外還有做氧化應激指標MDA的檢測,,我還是推薦各位用碧云天或者進口的檢測試劑盒,而不是ELISA試劑盒,。
5,、我主要的客戶是醫(yī)學院校,做實行面向的種屬重要是人,,大鼠和小鼠,,如今市面市情上雞、牛,、馬,、羊,、兔種種指標的盒子都有售,,真不知道這些抗體是怎么來的。據我所相識,,這些炎癥指標依然有很大種屬特異性的,。
6、ELISA檢測方法簡單,,靈敏度高,,我個人認為ELISA適合檢測血清或者培養(yǎng)上清的細胞因子、胰島素,、激素等排泄型的小分子卵白的定量檢測,;病原體抗原的定性與定量;評估自己制備的血清抗體的效價等,。很多客戶有個誤區(qū),,拿來一個指標就想當然地嘗試用ELISA去檢測,我還是建議多動腦,,該檢測活性的檢測活性,,該做western的做western。
第三 談一下上海哈靈的ELISA試劑盒,,這個公司的產物許多客戶也發(fā)表了SCI文章,,要是我沒有記錯的話,mouse TGF-beta1 這個試劑盒發(fā)表在nature immunology上面,,25分多的雜志,。這個廠產業(yè)的試劑盒,是我公司主推的盒子,,給我的覺得是靈敏度不夠高,,個位數pg級達不到,,血清細胞因子的檢出率比力低,在估計范疇內,。大概隨著國內研究技能的不停改進,,我想應該會逐步解決這個問題。