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GES-1（人胃粘膜細胞）
閱讀：1091 發(fā)布時間：2017-7-5| 提 供 商 | 上海哈靈生物科技有限公司 | 資料大小 | 169.7KB |
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GES-1（人胃粘膜細胞）
1.Origin and General Characteristics
Cell Name | GES-1 |
Organism | Homo sapiens, human |
Age |
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Tissue |
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Morphology | epithelial |
Growth Properties | adherent |
Descriptions |
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Biosafety Level |
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2.Culture Conditions and Handling | |
Complete Growth Medium | RPMI-1640 (150110)+10% FBS (164210-500)+1% P/S (180120) |
| Remove and discard culture medium. Briefly rinse the cell layer with DPBS |
| solution to remove all traces of serum that contains trypsin inhibitor. |
| Add 1.0 to 2.0 mL of Trypsin-EDTA solution to flask and observe cells |
| under an inverted microscope until cell layer is dispersed (usually within 3 |
Subculturing | to 5 minutes). Cells that are difficult to detach may be placed at 37°C to |
| facilitate dispersal. |
| Add 4.0 to 6.0 mL of complete growth medium and aspirate cells by gently |
| pipetting. Add appropriate aliquots of the cell suspension to new culture |
| vessels. |
Subc*tion Ratio | 1:2-1:4 |
Medium Renewal | every 2 to 3 days |
Cryopreservation | Freeze medium: 50% basal medium+40% FBS+10% DMSO |
Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase | |
| |
Culture Conditions | Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5% |
Temperature: 37℃ | |
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3.Special Features of the Cell Line | |
Tumorigenic |
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Effects |
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Receptor Expression |
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Antigen Expression |
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Gene Expression |
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Applications |
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收到常溫細胞后如何處理,？
（細胞培養(yǎng)詳細操作步驟請參照郵件附件）
- 首先,，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請拍照,，并及時與（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）,。
- 用 75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 2-4 小時,，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
- 仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。?/span>、細胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
- 靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）,；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。
- 貼壁細胞：若細胞生長密度超過 80%，可正常傳代,；若未超過 80%,，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留 5ml 左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達 80%左右再進行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
- 懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至 50ml 無菌離心管內(nèi),，1200rpm 離心 5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細胞沉淀加入 5ml 培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時,，若細胞密度超過 80%,，可將細胞懸液分至 2 個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至 5ml,；若細胞密度未超過 80%,，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達 80%左右時再進行傳代操作。