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冰凍切片基質(zhì)金屬蛋白酶原位明膠酶譜法熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書
閱讀：1847 發(fā)布時間：2015-5-28| 提 供 商 | 上海哈靈生物科技有限公司 | 資料大小 | 208.3KB |
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主要用途
冰凍切片基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）原位明膠酶譜法（in situ zymography）熒光染色試劑是一種旨在通過異硫氰酸熒光素標(biāo)記的明膠作為底物,，針對未固定處理的冰凍切片予以染色處理,，基質(zhì)金屬蛋白酶切離底物產(chǎn)生高度綠色熒光,，來定位組織中的基質(zhì)金屬蛋白酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法,。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制,、成功實驗證明的,。其適用于各種冰凍動物組織的基質(zhì)金屬蛋白酶-2和9的分析,。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定,，操作便捷,，敏感度高，熒光清晰,，重復(fù)性好,。
技術(shù)背景
基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrix metalloproteinases；MMPs）是一類結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱,，因含有金屬（鋅,、鈣）離子而得名,。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種，幾乎能降解除多糖以外的全部細胞外基質(zhì)（extracellular matrix）成分,，同時參與胚胎發(fā)育,、形態(tài)形成、胚泡植入（blastocyst）,、血管形成,、組織再吸收（tissue resorption）、疾病發(fā)生,，例如關(guān)節(jié)炎,、癌細胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類：（1）膠原酶：MMP1,、MMP8,、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ,、Ⅲ,、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖,；（2）明膠酶（Ⅳ型膠原酶）：MMP2、MMP9,，又稱明膠酶A,、B，主要消化Ⅳ,、Ⅴ,、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維,；（3）基質(zhì)溶解素：MMP3,、MMP7、MMP16,、MMP11,，主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白,、彈力纖維,、Ⅲ、Ⅳ,、Ⅴ,、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1,、MMP8,、MMP9,；（4）膜型金屬蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP,、MT3-MMP,，主要作用于明膠、Ⅳ型膠原,、MMP2,。體內(nèi)絕大多數(shù)細胞并不儲備MMPs，當(dāng)需要MMPs的信號傳遞到細胞后才臨時合成,，合成的MMPs以無活性的酶原（proenzyme）形式分泌到細胞外,，隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活，一種激活的MMPs可激活另一種MMPs,，形成瀑布效應(yīng),。原位明膠酶譜法熒光染色（in-situ fluorescence zymography）技術(shù)在于提高基質(zhì)金屬蛋白酶檢測的敏感性，使用異硫氰酸熒光素（FITC）標(biāo)記的明膠作為底物,，經(jīng)過基質(zhì)金屬蛋白酶水解后產(chǎn)生熒光多肽,，據(jù)此在熒光顯微鏡下檢測酶的活性和位置。