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精子活力和頂體形態(tài)雙重?zé)晒馊旧噭┖挟a(chǎn)品說明書
閱讀:1410 發(fā)布時(shí)間:2015-5-5提 供 商 | 上海哈靈生物科技有限公司 | 資料大小 | 35KB |
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資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 1410次 |
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主要用途
精子活力和頂體形態(tài)雙重?zé)晒馊旧噭?/span>是一種旨在使用赫斯特33258和熒光素標(biāo)記的花生凝集素雙重?zé)晒?/span>染色技術(shù),,分析精子活力以及頂體狀態(tài)的而經(jīng)典的技術(shù)方法,。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的,。適用于各種動(dòng)物或人體精子細(xì)胞以及凍存精子細(xì)胞的檢測(cè),。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,,操作簡(jiǎn)便,,性能穩(wěn)定,熒光清晰,。
技術(shù)背景
在男科學(xué)(Andrology)中,,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子壽命,、以及生育能力的基礎(chǔ)信息,。其中精子的活力(vitality)、運(yùn)動(dòng)能力(motility),、授精潛力(fertilizing potential),、膜結(jié)構(gòu)或染色質(zhì)結(jié)構(gòu)完整性(integrity)、頂體反應(yīng)(acrosomal reaction)功能的評(píng)價(jià)是精子分析的重要指標(biāo),,也是決定人工受孕或體外授精(in vitro fertilization,;IVF)的重要參數(shù)。其中頂體反應(yīng),,是指當(dāng)精子接近卵子實(shí)施授精時(shí),,精子頭部前半端的帽狀結(jié)構(gòu)頂體,釋放出溶解酶,,以便精子和卵子的膜融合,。頂體反應(yīng)測(cè)試是一項(xiàng)穩(wěn)定的精子功能參數(shù),可以用于預(yù)測(cè)受精成功率,。因此頂體的結(jié)構(gòu)完整性(intact)是評(píng)價(jià)的主要標(biāo)志,,也是不育癥和避孕藥物研究的對(duì)象,。使用DNA敏感性熒光染料赫斯特33258(Hoechst 33258)和熒光素標(biāo)記的花生凝集素(Isothiocyano-fluoresceinated peanut Arachis hypogaea agglutinin;PNA-FITC)雙重?zé)晒?/span>染色技術(shù),,是精子活力,,以及精子頭部頂體狀態(tài)分析和授精效率評(píng)價(jià)的常用的方法。首先使用赫斯特33258染色,,分析精子活力,,基于赫斯特33258具有有限的膜通透性特點(diǎn),受到活體精子細(xì)胞(包括游動(dòng)性和非游動(dòng)性精子)的排斥,,而容易進(jìn)入死亡精子細(xì)胞,。其次使用熒光素標(biāo)記的花生凝集素染料,與頂體外膜糖蛋白上的半乳糖殘基(β-D-galactosyl residue)的結(jié)合,,顯示完整性(未反應(yīng)性u(píng)nreacted)頂體,,同時(shí)可以應(yīng)用于受精時(shí)的精卵反應(yīng)。雙染的作用,,以幫助區(qū)分生理性反應(yīng)性頂體缺失(loss)或病理性退行性頂體缺失,。通過常用的熒光顯微鏡(激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)530nm)便可清晰觀察到綠色頂體狀態(tài)(status),。