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細胞基質金屬蛋白酶原位明膠酶譜法熒光染色試劑盒
閱讀：1141 發(fā)布時間：2015-4-16| 提 供 商 | 上海哈靈生物科技有限公司 | 資料大小 | 55KB |
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| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 1141次 |
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主要用途
細胞基質金屬蛋白酶（MMP）原位明膠酶譜法（in situ zymography）熒光染色試劑是一種旨在通過異硫氰酸熒光素標記的明膠作為底物,，針對未固定處理的細胞樣品予以染色處理,，基質金屬蛋白酶切離底物產生高度綠色熒光，來定位細胞中的基質金屬蛋白酶活性的而經典的技術方法,。該技術經過精心研制,、成功實驗證明的。其適用于各種動物細胞基質金屬蛋白酶-2和9的分析。產品即到即用,，性能穩(wěn)定,，操作便捷，敏感度高,，熒光清晰,，重復性好。
技術背景
基質金屬蛋白酶（Matrix metalloproteinases,；MMPs）是一類結構高度同源的分泌型或膜相關性鋅內肽酶的總稱,，因含有金屬（鋅、鈣）離子而得名,。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種,，幾乎能降解除多糖以外的全部細胞外基質（extracellular matrix）成分，同時參與胚胎發(fā)育,、形態(tài)形成,、胚泡植入（blastocyst）、血管形成,、組織再吸收（tissue resorption）,、疾病發(fā)生，例如關節(jié)炎,、癌細胞浸入轉移等,。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類：（1）膠原酶：MMP1、MMP8,、MMP13主要消化Ⅰ,、Ⅱ、Ⅲ,、Ⅶ,、Ⅹ型膠原和蛋白多糖；（2）明膠酶（Ⅳ型膠原酶）：MMP2,、MMP9,，又稱明膠酶A、B,，主要消化Ⅳ,、Ⅴ、Ⅶ,、Ⅹ型膠原和彈性纖維,；（3）基質溶解素：MMP3、MMP7,、MMP16,、MMP11,，主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白,、彈力纖維,、Ⅲ、Ⅳ,、Ⅴ,、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1,、MMP8,、MMP9；（4）膜型金屬蛋白酶：MT1-MMP,、MT2-MMP,、MT3-MMP，主要作用于明膠,、Ⅳ型膠原,、MMP2。體內絕大多數(shù)細胞并不儲備MMPs,，當需要MMPs的信號傳遞到細胞后才臨時合成,，合成的MMPs以無活性的酶原（proenzyme）形式分泌到細胞外,，隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活,，一種激活的MMPs可激活另一種MMPs，形成瀑布效應,。原位明膠酶譜法熒光染色（in-situ fluorescence zymography）技術在于提高基質金屬蛋白酶檢測的敏感性,，使用異硫氰酸熒光素（FITC）標記的明膠作為底物,，經過基質金屬蛋白酶水解后產生熒光多肽，據(jù)此在熒光顯微鏡下檢測酶的活性和位置,。