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主要用途

   我公司通用型線粒體DNA損傷超長(zhǎng)延展定量PCR擴(kuò)增分析試劑是一種旨在運(yùn)用rTth聚合酶XL進(jìn)行超長(zhǎng)延展PCR擴(kuò)增，產(chǎn)生8.9kb線粒體DNA目標(biāo)片段,，根據(jù)產(chǎn)物量值的差異,，來(lái)定量分析線粒體DNA損傷程度的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制,、成功實(shí)驗(yàn)證明的,。廣泛應(yīng)用于腫瘤、衰老,、毒理作用,、DNA修復(fù)等研究。產(chǎn)品即到即用,，性能穩(wěn)定,，無(wú)核酶污染，操作便捷,，敏感,，重復(fù)性強(qiáng)。

注意事項(xiàng)

• 本產(chǎn)品為20次操作
• 操作時(shí),，須戴手套
• 建議使用帶濾芯的槍頭,，避免污染
• 在－20℃冰箱里儲(chǔ)存的產(chǎn)品避免反復(fù)凍融
• 建議樣品為純化的線粒體DNA
• 根據(jù)用戶(hù)PCR儀的性能，決定是否加入礦物油（Mineral Oil）

• 本產(chǎn)品適合各種熒光定量PCR儀
• 建議整個(gè)操作在4℃下進(jìn)行
• 配制完成后,，即刻進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng),，以確保反應(yīng)物的活性
• PCR擴(kuò)增反應(yīng)的初3個(gè)循環(huán)為定量基線；3至15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)的10倍值為熒光閾值,；熒光信號(hào)達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)為Ct值（參考圖像如下)
• Ct值作為端粒酶活性的計(jì)量單位
• 用戶(hù)可以使用293細(xì)胞（10,，100，和1000細(xì)胞數(shù)）作為陽(yáng)性對(duì)照,，以此建立標(biāo)準(zhǔn)曲線：橫座標(biāo)（X軸）為細(xì)胞量對(duì)數(shù),，縱座標(biāo)（Y軸）為Ct值
• 建議選用正常淋巴細(xì)胞作為正常對(duì)照或校正對(duì)照，以此作為評(píng)價(jià)hTERT的參考指標(biāo)；用戶(hù)可以選用任何其它正常細(xì)胞或組織,，例如腫瘤組織旁的正常組織等
• 建議選用hTERT陽(yáng)性表達(dá)的MCF7細(xì)胞作為陽(yáng)性對(duì)照,，以此構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱坐標(biāo)（Y軸）為Ct值，橫坐標(biāo)（X軸）為已知細(xì)胞量對(duì)數(shù)值或拷貝數(shù)或RNA量等,，其低有效用量作為樣品檢測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)
• 建議使用無(wú)模板作為陰性對(duì)照
• 內(nèi)參液（Reagent E）為看家基因甘油醛-3-磷酸脫氫酶基因（Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,；GAPDH）作為比較分析時(shí)樣品測(cè)試用量校正統(tǒng)一的參考標(biāo)準(zhǔn)
• Ct值可以作為hTERT表達(dá)的計(jì)量單位，也可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線轉(zhuǎn)換為表達(dá)分子數(shù)進(jìn)行計(jì)量
• 本公司提供系列線粒體DNA損傷檢測(cè)試劑產(chǎn)品

如:

   通用型線粒體DNA損傷AP位點(diǎn)比色法定量分析試劑盒